Анализ крови пцр что это такое


что это, на какие инфекции сдают и как подготовиться.

Кровь методом ПЦР чаще всего проверяют на вирусные инфекции.

Значительно реже там определяются бактерии: стафилококки, стрептококки, туберкулезные палочки.

Анализ крови методом ПЦР позволяет установить, есть ли инфекция в организме.

Тест очень чувствительный.

Он выявляет инфекционные заболевания на ранней стадии, когда антитела к возбудителям ещё не образуются.

Основные болезни, которые выявляют в крови:

  • ВИЧ
  • гепатиты В и С
  • различные типы герпеса (возбудители генитального, лабиального герпеса, опоясывающего лишая, цитомегаловируса и инфекционного мононуклеоза)

При необходимости возможна количественная молекулярная диагностика методом ПЦР кровь.

Она позволяет понять, требуется ли пациенту лечение, какие нужны дозы и длительность курса терапии, приносят ли результат проводимые терапевтические мероприятия.

ПЦР крови на инфекции используется для лабораторного контроля их излеченности.

Рассмотрим основные заболевания, при которых используется исследование крови ПЦР.

Анализ крови методом ПЦР на туберкулез

ПЦР – один из методов диагностики туберкулеза.

С помощью лабораторного теста возможно выявление любых форм заболевания.

В том числе ранних, некультивируемых, с нетипичной локализацией возбудителя.

Методика имеет более высокую чувствительность, чем бактериологическое исследование.

Она очень информативна, так как позволяет проводить дифференциальную диагностику, отличая туберкулезные и нетуберкулезные микобактерии.

ПЦР обеспечивает их видовую и штаммовую идентификацию.

Особую ценность методика имеет при выявлении внелегочных форм туберкулеза.

Благодаря определению вида микобактерий, она дает возможность подобрать эффективную терапию.

Использование ПЦР для диагностики туберкулеза рекомендовано Министерством здравоохранения РФ, приказом №64 от 21 февраля 2000 года.

Для диагностики туберкулеза может использоваться любой биоматериал.

Это мокрота, кровь, пунктат лимфоузла, моча и т.д.

Кровь из вены для ПЦР сдают для дифференциальной диагностики ограниченных и диссеминированных форм туберкулеза.

Проще говоря, метод позволяет понять, находятся бактерии в ограниченном очаге, или уже проникли в кровь и разносятся по всему организму.

Часто ПЦР крови на микобактерии применяют у детей.

В том числе при отрицательных результатах бактериологического исследования.

Тем не менее, ПЦР крови имеет не очень высокую чувствительность.

Поэтому в клинической практике используется нечасто.

Наибольшая вероятность обнаружения ДНК в крови – у пациентов с ВИЧ или на фоне приема иммуносупрессивных препаратов.

У многих ПЦР дает отрицательные результаты даже в случае диссеминированных форм.

У женщин ДНК микобактерий определяют в менструальной крови.

Исследование проводится для диагностики туберкулеза половых органов.

Анализ делают на такие виды бактерий:

  • tuberculosis
  • bovis
  • bovis BCG
  • microti
  • africanum

ПЦР крови на герпес

Для диагностики герпетической инфекции ПЦР крови применяется нечасто.

Обычно берут материал с поверхности высыпаний.

Но иногда их нет.

В таком случае исследование крови остаётся информативным методом диагностики заболевания.

Показания к проведению теста:

  • ультразвуковые признаки внутриутробной инфекции
  • фетоплацентарная недостаточность
  • обследование детей, родившихся от женщин-носителей герпеса
  • увеличение печени, длительная лихорадка на фоне беременности
  • иммунодефицитные состояния и ВИЧ
  • подозрение на осложнения герпеса

Однажды заразившись, человек навсегда становится носителем герпеса.

Но ДНК определяется в крови только в активную фазу инфекции.

При бессимптомном течении ПЦР дает отрицательные результаты.

Анализ крови на ВИЧ методом ПЦР

ПЦР – в большей мере уточняющий метод при ВИЧ, нежели подтверждающий.

Для первичной диагностики обычно применяются серологические исследования.

В крови выявляют антитела и антигены к ВИЧ.

Иногда ПЦР применяют для установления диагноза.

Области применения метода:

  1. Тестирование донорской крови.

Вполне вероятно, что она была сдана человеком в период, когда антитела ещё не образовались.

Поэтому выявление РНК может дать положительные результаты при отрицательных серологических исследованиях.

  1. Диагностика новорожденных.

Если ребенок родился от матери, страдающей ВИЧ, его всегда обследуют.

В том числе если была проведена необходимая профилактика.

Но выявлять вирус серологическими методами нецелесообразно.

Потому что ребенок первых лет жизни содержит в крови материнские антитела.

Соответственно, они обязательно будут определены в ходе анализа, и не важно, болен ребенок или нет.

Серологические тесты всегда дадут положительный результат.

В такой ситуации на помощь приходит ПЦР.

Если РНК отсутствует, то ребёнок здоров.

  1. Подозрение на острую ВИЧ инфекцию в ранний период после заражения.

На антитела кровь сдают только через 3 месяца после заражения.

Есть есть необходимость ранней диагностики, используют только ПЦР.

Такая необходимость возникает, если есть основания полагать, что человек инфицирован.

По симптомам этого обычно понять нельзя.

Потому что клинические проявления ВИЧ не специфичны: они такие же, как у множества респираторных вирусных инфекций.

Но бывает так, что симптомы появляются на фоне данных анамнеза, указывающих на высокий риск инфицирования.

Например, медицинский работник имел контакт с кровью ВИЧ-инфицированного.

Если через несколько недель у него появились симптомы инфекции, это повод для обследования крови на РНК ретровируса методом ПЦР.

  1. Уточнение спорных результатов серологического исследования.

ПЦР может применяться только вместе с анализом крови на антитела, но не вместо него.

Проблема этого исследования состоит в том, что оно может дать ложноотрицательные результаты, пусть и в небольшом количестве случаев.

Причины их следующие:

  • в большинстве случаев ПЦР делают только на ВИЧ 1 типа, но около 0,5% случаев болезни вызывает ВИЧ 2 типа
  • не выявляются мутантные штаммы вируса, в то время как антитела к ним образуются и могут быть выявлены в крови
  • около 1% людей способны силами собственного иммунитета сдерживать репликацию вируса, у них есть в крови антитела, но не определяется РНК

При этом ПЦР играет важнейшую роль в лечебном процессе.

Методика позволяет оценить вирусную нагрузку.

Она позволяет врачу понять, когда стоит назначать лечение, эффективно ли оно или нужно менять схему.

На фоне удачной терапии ПЦР крови на ВИЧ становится отрицательной.

При этом антитела по-прежнему сохраняются и могут выявляться в анализах.

Поэтому серологические методы малоинформативны в оценке эффективности терапии и не используются с этой целью.

Анализ крови на стафилококковую и стрептококковую инфекцию методом ПЦР

Исследование крови на бактерии методом ПЦР проводят при тяжелых инфекциях:

  • пневмониях
  • менингитах
  • сепсисе

Этиологическая диагностика позволяет врачу не только подтвердить бактериальную этиологию процесса.

Она дает возможность подобрать наиболее эффективные препараты для лечения.

Потому что при разных патологиях назначаются разные антибиотики.

Если стрептококковая инфекция чувствительна к большинству препаратов, в том числе бета-лактамным антибиотикам, то стафилококк часто резистентный ко многим лекарственным средствам.

ПЦР обычно делают качественную.

Оценивается факт присутствия бактерий в крови, а не их количество.

Анализ крови на паразитов методом ПЦР

В крови определяют ДНК листерий и токсоплазм.

Это одноклеточные паразиты.

Листериозом чаще всего заражаются через еду.

Болезнь может давать осложнения, вызывать воспаление структур центральной нервной системы.

В группе риска – беременные, пожилые, лица с иммунодефицитом или онкозаболеваниями.

В большинстве же случаев листериоз протекает как кишечная инфекция.

Септическая его форма очень опасна и часто приводит к летальному исходу.

Токсоплазма – распространенная, не столь опасная инфекция.

Она представляет наибольшую угрозу для беременных.

Анализ назначается при:

  • привычном невынашивании беременности
  • длительной лихорадке неясного происхождения
  • ВИЧ
  • увеличении печени и селезенки

Все беременные сдают анализ на токсоплазму.

Хотя обследуют их обычно при помощи серологических методов.

Болезнь часто манифестирует на фоне иммунодефицита.

Анализ крови на ПЦР гепатит С количественный

ПЦР применяется с целью подтверждения диагноза.

При появлении клинических признаков или наличии анамнестических данных, указывающих на высокую вероятность этого заболевания, доктор назначает определение в крови РНК вируса.

Исследование очень чувствительно.

Поэтому может выявлять гепатит С в бессимптомной стадии.

Показания к назначению:

  • выявление в крови HCV Ab
  • негативные результаты HCV Ab на фоне иммунодефицита при имеющихся признаках поражения печени
  • начало лечения гепатита С при подтвержденном диагнозе

Количественная ПЦР проводится при:

  • принятии решения о необходимости противовирусной терапии
  • перед началом противовирусного лечения, для определения исходной вирусной нагрузки
  • в процессе лечения, для отслеживания эффективности проводимой терапии
  • в конце курса, для подтверждения излеченности или определения показаний для повторной терапии

До начала лечения ПЦР делают всем пациентам.

Знать исходную вирусную нагрузку врачу необходимо, чтобы:

  • определиться с дозами препаратов, длительностью лечения
  • оценить ожидаемую эффективность
  • в ходе дальнейших количественных исследований сравнить новые результаты с предыдущими, чтобы понять, есть ли положительная динамика

Раньше для первичной диагностики заболевания применялись качественные тесты.

Дополнительно использовались количественные, которые делали перед началом лечения и в процессе проведения терапии.

Но сегодня количественная ПЦР имеет столь же высокую чувствительность, что и качественная.

Она позволяет определять вирус гепатита С в крови с нижним порогом чувствительности 10-15 МЕ/мл.

Благодаря внедрению ПЦР в разы уменьшилось количество биопсий печени, проводимых с диагностической целью.

Методика позволяет врачу наблюдать за течением заболевания и эффективностью терапии.

Оценивать вирусологическую нагрузку в динамике ВОЗ рекомендует одним и тем же выбранным методом.

Как правило, врач направляет одного пациента в одну и ту же лабораторию для проведения одного и того же теста.

Такой подход обеспечивает точность результата.

В том числе при определении устойчивого вирусологического ответа, свидетельствующего об эффективности проводимой терапии.

Анализ крови ПЦР на гепатит В количественный

ПЦР позволяет выявить ДНК вируса гепатита В в различном биоматериале:

  • крови
  • лимфоцитах
  • биоптате печени

В рутинной практике используется анализ крови ПЦР на гепатит В.

Этот метод обладает самой высокой чувствительностью.

Иногда он незаменим в первичной диагностике.

Для установления диагноза гепатита В достаточно определения в крови антигенов и антител.

Но иногда инфекция протекает в скрытой форме.

Традиционно проводимые для установления первичного диагноза исследования могут давать отрицательные результаты.

При этом с помощью ПЦР удается выявить вирус.

Кроме того, ДНК возбудителя гепатита В является самым ранним маркером этого заболевания.

Она начинает определяться в крови раньше, чем антитела и антигены.

Благодаря ПЦР можно выявить форму заболевания, вызванную мутантными штаммами вируса.

Определение ДНК позволяет не только констатировать инфекцию.

Метод также дает возможность определять репликативную активность HBV.

ПЦР становится положительной ещё в инкубационный период.

В острый период заболевания количественные показатели увеличиваются.

ПЦР становится негативной уже в период ранней реконвалесценции.

Это позволяет врачу подтвердить излеченность с помощью данного метода.

Таким образом, области применения этого исследования следующие:

  • первичная диагностика заболевания в раннем периоде после заражения
  • проверка донорской крови
  • выявление форм заболевания, которые не обнаруживаются при помощи анализа крови на антигены и антитела к вирусу гепатита В (субклинические формы, мутантные штаммы вируса)
  • принятие решение о необходимости назначения терапии (вирусологическая нагрузка)
  • определение тактики лечения
  • оценка его эффективности

Анализ могут назначить пациентам, которые ранее переболели вирусным гепатитом В, а сейчас получают иммуносупрессивную терапию.

Потому что это фактор риска повторного возникновения заболевания.

Расшифровка результатов:

  • положительная ПЦР при любом количественном результате – устанавливается диагноз гепатита В
  • уровень ДНК больше 10 в 5 степени копий ДНК в мл – требуется лечение
  • уровень ДНК меньше 10 в 3 степени – лечение было эффективным, болезнь перешла в стадию ремиссии, прогноз благоприятный (хотя возможна реинфекция)

Если анализ отрицательный, это говорит о том, что человек здоров и не встречался с вирусом, либо излечен от гепатита В.

В результате успешной терапии ДНК полностью исчезает из крови и не определяется в ней при помощи ПЦР.

ПЦР на герпес зостер

Вирус варицелла зостер является возбудителем ветрянки и опоясывающего лишая.

Его ДНК появляется в крови только в острую фазу инфекции.

Ветрянка обычно диагностируется клиническим методом.

Потому что она имеет достаточно характерные симптомы.

В то время как при опоясывающем герпесе происхождение болезни не всегда очевидно.

Высыпания появляются не сразу.

А если появляются, то клиника может быть атипичной.

Для подтверждения диагноза может быть использована диагностика крови методом ПЦР.

Такая диагностика применяется нечасто.

Но иногда в ней возникает необходимость в спорных клинических ситуациях.

Где сдать кровь ПЦР?

Если вам нужно сдать анализ крови методом ПЦР, приходите в нашу клинику.

Здесь работают опытные врачи-венерологи.

Мы специализируемся в первую очередь на диагностике и лечении заболеваний с половым путем передачи.

У нас можно сдать кровь на:

  • ВИЧ
  • различные виды герпеса
  • вирусные гепатиты В и С

При необходимости мы также можем обследовать вас на туберкулез, стафилококк и многие другие инфекции.

К нам стоит обращаться в таких ситуациях:

  • планирование беременности
  • 1 триместр беременности (профилактическое обследование)
  • контакт (половой или любой другой) с источником инфекции – ВИЧ, гепатита и других опасных заболеваний
  • появление подозрительных симптомов, указывающих на возможное заражение вирусными инфекциями (пузыри на коже, увеличение печени и селезенки, очень тяжелые гриппоподобные симптомы)
  • положительный анализ других исследований (антитела, антигены)
  • рождение детей от инфицированных матерей

Мы также обследуем пациентов с уже установленным диагнозом.

Это необходимо для контроля лечения.

Наши преимущества:

  • работаем с лучшими лабораториями Москвы
  • мы сотрудничаем сразу с несколькими лабораториями, поэтому предлагаем широчайший спектр различных анализов, в том числе тех, которые используются редко, например, для выявления генерализованных форм инфекций
  • идеальное соблюдение правил забора биоматериала позволяет обеспечить точные результаты;
  • возможность анонимного обследования
  • доступные цены
  • аккуратный, безболезненный забор крови из вены без боли, ран, синяков и воспалений

После диагностики в нашей клинике можно пройти лечение, если в нём возникнет необходимость.

Для сдачи анализов крови методом ПЦР обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Кровь методом ПЦР что это и на какие инфекции сдается.

ПЦР – часто применяемый в венерологии и инфектологии метод выявления различных патологий.

Биоматериалом для исследований может служить любая биологическая жидкость. Многие инфекции могут быть выявлены в крови, если их ДНК попадает в системный кровоток. С помощью анализа крови на РНК или ДНК микроорганизмов можно выявить множество различных инфекций.

Таким способом диагностируют в основном:

  • вирусные инфекции
  • бактериальные инфекции в случае их генерализации

Реже ПЦР делают на грибки или паразиты. В большинстве случаев в крови определяются вирусы. Потому что другие группы микроорганизмов чаще создают локальные очаги воспаления. Но иногда происходит генерализация процесса.

Бактерии могут проникать в кровь, разноситься по организму. В этом случае проводится анализ крови методом ПЦР с целью их выявления.

Диагностика крови методом ПЦР бывает количественной и качественной. Иногда также проводятся полуколичественные тесты. При стандартном исследовании подтверждается или опровергается сам факт присутствия патогена в организме. Количественный метод используют для оценки уровня вирусной или бактериальной нагрузки. Полуколичественный способ используют для инфекций, которые иногда опасны, но в большинстве случаев не вызывают воспаления. Например, есть определенная концентрация, за границей которой есть риск патологии.

Тогда результатов может быть три:

  • ДНК не обнаружено
  • ДНК выявлено, но концентрация в пределах допустимой
  • ДНК обнаружено в высокой концентрации, достаточной для развития воспаления

При этом сами цифры, сколько именно копий ДНК содержит кровь в 1 мл, не указывают. Молекулярная диагностика методом ПЦР и дает возможность определить инфекции даже при небольшой концентрации возбудителей. Потому что данный диагностический тест обладает высокой чувствительностью.

У него также высокая специфичность. Ложноположительные результаты встречаются редко.

 

ПЦР крови на герпес

Этот анализ делают редко.

В основном ДНК вируса выявляют в биоматериале, полученном из поверхности высыпаний. Но анализ крови тоже делают. В ней могут быть обнаружены специфические участки ДНК.

Есть исследования с типированием или без него.

Часто анализ проводят сразу на 1 и 2 тип герпеса. При этом выявляется характерный для обоих типов фрагмент ДНК. То есть, он присутствует и у одного вируса, и у другого. Поэтому при положительном результате нельзя понять, каким типом заражен человек.

Часто это не имеет значения для определения терапевтической тактики. Потому что разные типы герпеса подавляются одними и теми же препаратами. Но есть значение для оценки прогноза заболевания.

Герпес 2 типа чаще рецидивирует. Соответственно, таким пациентам чаще назначается супрессивная терапия, направленная на снижение частоты обострений инфекции. Если возникает необходимость определения типа вируса герпеса, проводится ПЦР с типированием. В этом случае мишенью для выявления служат участки ДНК, характерные для одного либо другого вируса.

В результатах выдается не только «выявлено» или «не выявлено». Указывается и тип вируса простого герпеса.

 

Анализ ПЦР на герпес зостер

Варицелла зостер – это возбудитель ветрянки и опоясывающего лишая.

Данный вирус входит в семейство герпеса. При анализе крови с помощью ПЦР можно обнаружить его ДНК.

Проводится диагностика:

  • перед беременностью
  • при появлении симптомов опоясывающего лишая или ветрянки
  • для дифференциальной диагностики этих заболеваний с энтеровирусными инфекциями или простым герпесом

Хотя герпес зостер может долгое время пребывать в организме в случае перенесенной ветрянки, инфекция протекает в латентной форме.

Вирус «прячется» в нервных ганглиях.

Потому его ДНК в крови не определяется.

ПЦР даст позитивный результат, только если есть симптомы инфекции. Поэтому, если симптомы появились, а ДНК варицеллы зостер в крови нет, это означает, что болезнь вызвана другим возбудителем.

 

Анализ ПЦР на туберкулез

Кровь на туберкулез сдают из локтевой вены. Это требуется для обнаружения ДНК микобактерий в системном кровотоке. Исследование делают для того, чтобы дифференцировать ограниченные и генерализованные формы туберкулеза.

Показания, при которых врачи могут назначить этот анализ:

  • лихорадка с постоянными повышениями и понижениями температуры тела на фоне положительной туберкулиновой пробы
  • острое воспаление респираторных органов при наличии в анамнезе контакта с больным туберкулезом
  • дифференциальная диагностика ложноположительных результатов туберкулиновой пробы
  • рентгенологические признаки туберкулеза

Кроме того, женщины сдают менструальную кровь для выявления туберкулезного поражения репродуктивных органов.

Показания:

  • воспалительный процесс эндометрия
  • гистерографические признаки туберкулеза
  • бесплодие при исключении другой патологии

Результат выдается «обнаружено» или «не обнаружено». Выявление микобактерий – показание к назначению лечения.

 

Анализ крови на стафилококковую инфекцию методом ПЦР

Стафилококки являются условно-патогенными микроорганизмами. Это часть нормальной микрофлоры человека.

Бактерии живут на коже, в носу и мочеполовых органах.

Но иногда стафилококки способны вызывать тяжелые патологии.

При подозрении на генерализацию инфекции назначают ПЦР крови на стафилококк. Небольшое количество этих бактерий может присутствовать в крови в норме. Поэтому положительный результат выдается при их присутствии более чем 10 в 4 степени копий ДНК в мл крови. Это говорит о высокой вероятности заболеваний, таких как сепсис, менингит, пневмония стафилококковой этиологии.

С током крови бактерии могут попадать в различные органы. Установление этиологического фактора воспалительных процессов помогает подобрать более эффективное лечение.

 

Анализы ПЦР на паразитов

На глисты ПЦР крови не делают.

Для диагностики используют ИФА – определяют уровень иммуноглобулинов в крови. А также исследуют материал, который взят непосредственно из очага поражения.

Паразитами также считаются одноклеточные простейшие микроорганизмы. Это трихомонада и токсоплазма.

На трихомонаду ПЦР делают. Но исследуют на кровь, а мазок из урогенитального тракта, мочу или эякулят.

А вот на токсоплазму делают и анализ крови методом ПЦР. Этот патоген опасен для беременных. Поэтому часто анализы проводят как скрининг при подготовке к зачатию.

Основные показания к проведению ПЦР на токсоплазмы:

  • ВИЧ
  • планирование беременности
  • лимфаденопатия неустановленной этиологии
  • увеличение печени и селезенки
  • миозиты, энцефалиты, лихорадка непонятного происхождения

Специфичность теста ПЦР очень высокая – она достигает 98%. Паразиты выявляются в крови даже в малых количествах.

 

ПЦР на гепатит B количественный

Часто выполняется анализ крови методом ПЦР на гепатиты, которые передаются половым и парентеральным путем.

Хотя основными методами диагностики остаются серологические исследования крови. Диагноз обычно подтверждается путем определения антигенов и антител.

Тем не менее, ПЦР дает возможность:

  • выявить скрытую инфекцию
  • определить мутантные штаммы вируса гепатита B, при которых не обнаруживаются другие маркёры этого заболевания

ПЦР крови позволяет обнаружить ДНК вируса даже в инкубационный период.

В период ранней и поздней реконвалесценции генетический материал возбудителя исчезает из крови. Поэтому метод может применяться для подтверждения излеченности. Анализы проводят не только качественные, но и количественные.

Они позволяют оценивать:

  • вирусную нагрузку
  • риск перехода болезни в хроническую форму
  • риск тяжелого течения патологии
  • течение инфекции
  • динамику излечения (по уменьшению вирусной нагрузки)

С помощью количественного теста можно установить, какой вирус является главным виновником поражения печени. Ведь у одного пациента их может быть сразу несколько.

Часто ПЦР используют для обследования контактных лиц. Потому что это самый ранний маркёр вирусного гепатита В. Метод также позволяет обнаружить репликацию вирусов при хроническом течении заболевания ещё до появления клинических симптомов.

Введение в клиническую практику ПЦР позволило:

  • эффективно выявлять больных с низкой виремией
  • устанавливать взаимосвязь между вирусной нагрузкой и неблагоприятными исходами патологии

Стабильно высокая вирусная нагрузка – основание для противовирусной терапии.

 

Анализ крови на ПЦР гепатит C количественный

Исследование применяют для:

  • раннего обнаружения вируса гепатита С (РНК патогена выявляется в крови уже спустя 10-14 дней после инфицирования, в то время как антител ещё нет)
  • тестирования донорской крови
  • подтверждения излеченности (при выздоровлении РНК вируса больше не определяется в крови, в то время как антитела продолжают обнаруживаться ещё некоторое время)

ПЦР – более достоверный тест, чем анализ на антитела, который дает до 20% ложноположительных результатов. Метод дает возможность идентифицировать разные типы вируса.

В свою очередь это позволяет оценить прогноз заболевания и подобрать терапевтическую тактику. Кроме того, может использоваться анализ крови ПЦР количественный. Его назначают для оценки уровня вирусной нагрузки.

Исходная вирусная нагрузка оценивается для определения показаний к началу терапии. Она влияет на выбор схемы лечения.

В последующем анализ делают для оценки результативности терапии. Расшифровка анализа крови ПЦР на гепатит С дает возможность установить оптимальные дозы препаратов и сроки лечения.

 

Анализ крови ПЦР на ВИЧ

Основным исследованием для первичной диагностики ВИЧ-инфекции остается анализ крови на антитела.

ПЦР применяется в ограниченном количестве случаев. Это исследование необходимо для подтверждения диагноза при слабоположительном результате крови на антитела.

ПЦР также проводится для первичной диагностики ВИЧ у новорожденных. Потому что наличие у них антител ни о чем не говорит.

Ведь долгое время после рождения в крови детей циркулируют материнские антитела. Таким образом, серологические тесты не позволяют врачу узнать, вырабатывает организм малыша собственные иммуноглобулины или нет. В то же время ПЦР позволяет определить вирусную РНК.

Поэтому позитивный результат теста свидетельствует о том, что ребенок болен ВИЧ.

ПЦР сдают при наличии подозрения на острую инфекцию. То есть, когда человек только недавно заразился, и у него проявился гриппоподобный синдром. В этом случае серологические анализы крови могут ещё не дать положительные результаты. Ведь с момента заражения прошло слишком мало времени.

ПЦР дает положительные результаты гораздо раньше других тестов, даже в ранние периоды инфекции. Поэтому именно этот метод используется в острой фазе заболевания.

ПЦР применяется для оценки качества донорской крови. Тем не менее, для первичной диагностики ПЦР применяется не вместо серологических тестов, а в дополнение к ним.

Причин тому несколько:

1. ПЦР не выявляет ВИЧ 2 типа, который составляет около 0,5% случаев

2. Возможны мутации ВИЧ, и в этом случае искомый фрагмент РНК может быть не найден Проблему решает проведение ПЦР с двойной мишенью. В этом случае определяется не один, 2 фрагмента генетического кода.

3. Организм некоторых пациентов сдерживает развитие ВИЧ. Вирусная нагрузка у них ниже определяемой. То есть, ПЦР дает отрицательный результат. При этом антитела в крови присутствуют. Таких пациентов около 1% от общего числа инфицированных.

 

ПЦР на ВИЧ количественный

Количественное исследование применяется не для выявления, а для мониторинга инфекции. Это исследование определяет показания к лечению и оценивает его результаты.

Виремия обозначается в количестве копий в мкл. Нагрузка ниже 10 тысяч копий считается низкой.

Если она превышает 100 тысяч копий, то её называют высокой. Эти границы весьма условны. Потому что даже у одного пациента в разных образцах крови возможны колебания значений вирусной нагрузки. Показателем успешности лечения ВИЧ и её целью является неопределяемая вирусная нагрузка.

У каждого теста ПЦР есть граница чувствительности. Это количество копий генетического материала вируса, при котором они передают определяться в крови. Обычно это 50 копий в мкл.

Если уровень вирусной нагрузки ниже, она считается неопределяемой. Это благоприятный прогностический знак.

Он говорит о том, что:

1. Антиретровирусная терапия работает. К препаратам ещё не выработалась резистентность. Поэтому в замене препаратов и коррекции схемы лечения нет необходимости.

2. Уровень СД4 лимфоцитов не будет уменьшаться. То есть, иммунитет человека не страдает. Поэтому в ближайшее время ожидать оппортунистических инфекций нет оснований.

У некоторых пациентов наблюдаются всплески вирусной нагрузки. Это значит, что иногда анализ крови на ВИЧ методом ПЦР показывает положительный результат.

Но при этом вирусная нагрузка минимальная. Она обычно не превышает 200 копий в мкл. Это не говорит о том, что терапия стала неэффективной. Со временем вирусная нагрузка снова может снизиться до неопределяемого уровня.

Благодаря определению вирусной нагрузки анализ крови методом ПЦР позволяет:

  • определить стадию инфекционного процесса
  • дать прогноз развитию заболевания
  • оценить заразность человека
  • определить показания к назначению антиретровирусной терапии
  • оценить её эффективность
  • определить момент, когда стоит ввести другие препараты для терапии

 

Где сдают анализы ПЦР

Если вам нужно исследовать кровь методом ПЦР, обращайтесь в нашу клинику.

Мы предлагаем:

  • аккуратный забор биоматериала
  • соблюдение всех правил, позволяющих избежать загрязнения крови в пробирке (это может привести к ложноположительным результатам)
  • дополнительные методы диагностики инфекций
  • расшифровку анализов
  • при положительном результате – лечение инфекционных заболеваний

В нашей клинике работают опытные врачи.

Анализы ПЦР крови на гепатиты С и В, ВИЧ и другие патологии можно сдать по доступным ценам.

Если вам необходимо сдать анализы крови методом ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

 

 

распространенные инфекции, расшифровка, чего опасаться

Многие вирусы могут очень долго присутствовать в организме и циркулировать в крови, до поры до времени не вызывая никаких неприятностей. Однако это вовсе не значит, что они безопасны. Лабораторные анализы на вирусы позволяют выявить наличие последних, даже если никаких симптомов нет.


Анализы на вирусы: какие инфекции они выявляют

Для выявления вирусов лаборатории проводят исследования крови несколькими методами. Наибольшее распространение на сегодня получили ПЦР и иммуноферментный (ИФА) анализы.

Иммуноферментный анализ крови определяет наличие антител к вирусам (или антигенов к ним) в крови — иммуноглобулины (lgA, lgG, lgM) вырабатываются при заражении вирусами и являются своеобразными маркёрами инфекции.

Анализ на ДНК вируса, или ПЦР-исследование, позволяет выявить тип инфицирующего агента.

В качестве биоматериала для исследования обычно берут кровь. Анализ крови может подтвердить гепатит, герпес и вирус Эпштейна-Барра, аденовирус, различные половые инфекции (в том числе и сифилис), вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) и другие инфекции. Однако кровь не единственный биоматериал, пригодный для выявления вирусных поражений. В зависимости от заболевания и симптомов, для анализа на вирусы сдают соскоб слизистой оболочки, кал, мочу, мазок, слюну.

Кстати
Нередко целесообразно проводить исследование крови на вирусы одновременно с общим биохимическим анализом крови для получения максимально точных результатов.


Методы анализа на вирусы

Как мы уже отмечали, исследование крови на вирусы можно проводить двумя разными способами. Расскажем о них подробнее.

ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это новый способ выявления вирусов, основанный на принципах молекулярной биологии. ПЦР идентифицирует генетический материал «агрессора». Так можно установить и вид вируса, и, что особенно важно, количество инфицированных клеток. Для проведения анализа биоматериал, в котором могут находиться фрагменты ДНК или РНК возбудителя болезни, смешивают с особыми ферментами, создающими копию этих фрагментов. Каждая копия также создает копию, и вскоре на лабораторном стекле оказывается количество молекул, достаточное для идентификации «врага». Их анализируют и сравнивают с базой данных, чтобы выяснить тип вируса. Этот способ эффективен для выявления разных инфекций (не только вирусных) — гепатита, многих половых инфекций (уреаплазмоза, хламидиоза), микоплазмоза, ВИЧ, папилломавируса, вируса гриппа и некоторых других.

Иммуноанализ (ИФА)

Иммуноферментный метод анализа на вирусы позволяет установить форму болезни, вызванной вирусом (хроническая, острая или бессимптомная), а также оценить эффективность противовирусной терапии. Это один из самых распространенных и точных методов для выявления половых инфекций, в частности ВИЧ и ВПЧ, гепатита В.

Для анализа на вирусы чаще всего сдается кровь. Обязательно предупредите врача, если вы недавно проводили вакцинацию, — этот факт может отразиться на точности анализов. Рекомендуется не принимать пищу на протяжении 8-ми часов перед забором биоматериала, а также воздержаться от употребления алкоголя и от курения.

Время ожидания результатов зависит от типа вируса, на который проводится анализ, и от методики работы лаборатории. Обычно результаты готовы через 1–3 дня, но иногда приходится ждать и 2 недели.

Расшифровка результатов анализа на вирусы

Рассказать о том, каким образом следует трактовать результаты анализов на все виды вирусов, в рамках одной статьи невозможно. Далее мы поговорим лишь о наиболее известных заболеваниях и о часто назначаемых исследованиях.

Гепатит С

В случае проведения анализа методом ИФА наличие IgG в крови на гепатит говорит о том, что этот вирус в организме присутствовал, но иммунная система выработала к нему антитела. Присутствие одновременно антител класса IgM и IgG говорит о заболевании в острой форме. Иммуноглобулины только класса IgM — признак первичного инфицирования.

При проведении исследования методом ПЦР определяется РНК вируса. Результаты могут быть приведены в следующем формате:

  • РНК вируса не выявлена.
  • РНК вируса выявлена в концентрации ниже предела количественного определения (менее15 МЕ/мл). Сомнительный результат.
  • РНК вируса гепатита С выявлена (от 15 и выше 100000000 МЕ/мл).
Гепатит В

Для выявления этого вируса гепатита чаще всего назначается ИФА. Если в крови присутствуют антитела IgG и IgM, это значит, что вирус очень активен или же заражение произошло недавно.

В случае проведения ПЦР-анализа определяется концентрация фрагментов ДНК вируса гепатита В. Пациент получает результат с одной из приведенных трактовок:

  • Не обнаружено.
  • Сомнительный результат (результат положительный с концентрацией ДНК вируса гепатита В на границе точности метода).
  • Обнаружено.
Герпес

Если говорить о трактовке ИФА, то наличие антител, обозначаемых как Anti-HSV-IgG, говорит не об иммунитете к вирусу, а о том, что вы уже были когда-то инфицированы. Этот маркёр наблюдается у большинства пациентов. Если показатель anti-HSV-IgG в пробах, взятых в динамике за 2-недельный период, заметно растет, это значит, что заражение произошло недавно. О рецидиве говорит высокий показатель IgG.

Папилломавирус

Для выявления этого вируса исследуется соскоб эпителиальных клеток. Наличие вируса выявляется методом идентификации его ДНК. Если в результате сказано «ДНК не обнаружено», это говорит об отсутствии вируса. Менее 3 Lg говорит о незначительной концентрации вируса, 3–5 Lg – о клинически значимой, более 5 Lg — об очень высокой.

Вирус Эпштейна-Барр

Если иммуноглобулины VGA IgM, VGA IgG, EA IgG и EBNA IgG в бланке анализа значатся как «отрицательные», вируса в организме нет. Положительный VGA IgM при отрицательном результате на остальные антитела сигнализирует о ранней стадии заражения.

Справка
Вирус Эпштейна-Барр (EBV) вызывает развитие инфекционного мононуклеоза, многих онкологических процессов в организме. Он передается через слюну или кровь.


Вирус иммунодефицита человека

Расшифровка анализа крови на ВИЧ очень проста — если результат отрицательный, это значит, что вирус не обнаружен, если положительный — увы, вирус в крови есть. Но следует знать, что сегодня даже самые надежные методы точны лишь на 98–99%, то есть всегда остается шанс, что результат будет, например, ложноположительным.

Аденовирус

При анализе на аденовирус, вызывающий респираторные заболевания, применяется в основном ИФА. В ходе анализа подсчитываются IgG-антитела. Если показатель менее 0,8 условных единиц — результат отрицательный, более 0,8 — положительный.

Ротавирус

Ротавирус (в народе его называют кишечным гриппом) — острая кишечная инфекция, самый распространенный возбудитель диареи. Для анализа обычно берется образец кала. Обозначение «отрицательно» в результатах говорит о том, что следов антигенов не обнаружено, «положительно» — что состояние вызвано именно ротавирусом.

Проходить обследование на вирусы обязательно, даже если нет никаких изменений в самочувствии. Как мы уже говорили, некоторые вирусные поражения никак не проявляют себя, однако отсутствие симптомов еще не означает, что человек здоров. Яркий пример таких «тихих» вирусов — ВИЧ, который на ранних стадиях не дает никаких симптомов, оставаясь, тем не менее, смертельно опасным.


что это такое? что показывает анализ и как его сдавать?

Нечасто возникает ситуация, когда за разработку технологии научного исследования, которое потом широко применяется в клинической практике, автор получает Нобелевскую премию. Но именно так произошло с Кэрри Муллисом, который в 1993 году получил Нобелевскую премию по химии. Итогом его многолетних исканий явился метод полимеразной цепной реакции или ПЦР. Что это такое? Почему этот способ изучения молекулярных структур так широко стал применяться в медицине, хотя в науке он считается экспериментальным способом? Чтобы разобраться в этом, нужно вспомнить, что такое геном.

Что такое геном?

Известно, что каждое живое существо на планете обладает определенным набором наследственной информации, которая передается от поколения к поколению. У человека это информация зашифрована в 46 хромосомах, у других живых существ, как животных, так и растений, существует иное количество хромосом. Но в каждой хромосоме содержатся очень компактно скрученные нити ДНК – дезоксирибонуклеиновой кислоты, которая является гигантской молекулой «биологической памяти».

Именно молекула ДНК хранит закодированную информацию о структуре живой ткани, а точнее — о белках, которые должны синтезироваться. По сути, ДНК представляет собой матрицу, на которой один за другим располагаются участки, отвечающие за синтез отдельных белков. У каждого живого существа есть свои собственные, уникальные участки этой молекулы, которые не встречаются у другого вида: белки строго видоспецифичны, а их определенная последовательность также уникальна. Как же можно воспользоваться этой структурой в диагностических целях?

В том случае, если проводится анализ крови ПЦР методом, то можно выделить наследственный материал тех живых существ, которые оставили свои следы в организме человека. Конечно, прежде всего, это возбудители различных инфекционных заболеваний: вирусы и бактерии, грибы и простейшие, другие патогенные формы жизни.

Вся сложность состоит в том, что если в организм человека попало определённое количество возбудителей, например, бактерий, и организм их уже успела разрушить, то в плазме крови сохраняются незначительные обрывки наследственной информации.

Эти обрывки и остатки содержат, в том числе, фрагменты тех самых уникальных последовательностей ДНК, но их нужно каким-то образом сделать узнаваемыми. Как же получить выявляемые участки генома, которые можно подвергнуть дальнейшему исследованию, и дать ответ, находится ли данный возбудитель в организме, или его остатки? Для этого и разработан метод полимеразной цепной реакции, или анализ крови на ПЦР в медицине. В чём суть метода?

Что такое полимеразная реакция?

Полимераза — это особый фермент, который в соответствующих условиях может многократно умножать, или амплифицировать заданный участок ДНК, копируя его много раз. Этот метод напоминает человека, который вошел в темную комнату с зеркальными стенами, и зажег в ней фонарик. Многократное отражение луча от стен делает комнату светлой, хотя луч из фонарика по-прежнему выходит один. Также и фермент ДНК полимераза, позволяет многократно увеличить количество наследственного материала, делая его концентрацию доступной для определения.

Сама технология этой реакции — достаточно тонкий процесс. В начале необходимо задать точную температуру, которая измеряется десятыми долями градусов. Материал, в котором, возможно, находится наследственный материал возбудителей, нагревают до высокой температуры, чтобы разрушить водородные связи внутри двухцепочечной структуры ДНК.

Затем добавляется в раствор ДНК полимераза, особые праймеры, которые крепятся к свободным концам фрагментов ДНК, откуда и начинает работать полимераза, туда же добавляются нуклеотиды — аденин, гуанин, цитозин и тимин, и проводятся определенный технологические процедуры. В результате на выходе образуется гораздо больше копий с заданными параметрами, чем на входе этой реакции. Если ДНК полимераза успешно справилась с заданием, то многократно умноженный и достроенный фрагмент сверяется с необходимой базой данных, и затем делается заключение о наличие в организме определённого возбудителя.

Где еще применяется ПЦР?

Не стоит думать, что анализ крови на ПЦР и применение ее в медицине является единственным. Различных способов исследовать наследственный материал методом ПЦР существует много. Насчитывается более 10 разновидностей полимеразной цепной реакции, например, инвертированная, ступенчатая, с обратной транскрипцией, ПЦР длинных фрагментов, и даже виртуальная ПЦР. Последняя разновидность есть не что иное, как математический метод компьютерного моделирования, который проводится для предсказания достоверности будущих реакций.

В современной практике полимеразная цепная реакция с успехом применяется в криминалистике, если на месте преступления оставлены биологические материалы. Если есть подозреваемый, то нет никаких проблем с идентификацией принадлежности материала конкретному лицу.

ПЦР диагностика помогает выявить отцовство, а также применяется для клонирования генов, которая необходима в современной медицине для создания моноклональных антител. Они перспективны как способ лечения лечения злокачественных новообразований, рассеянного склероза, и многих аутоиммунных болезней. Также это реакция применяется в генетике для секвенирования ДНК, а также для экспериментального мутагенеза, или внесения необходимых исследователям изменений в избранный геном.

Применение в медицине

Расшифровка анализа крови, выполненного методом ПЦР, позволяет быстро и с высокой достоверностью определить наличие в организме пациента возбудителей очень многих заболеваний, которые не растут на искуственных средах. Чаще всего к ним относятся различные вирусы и «капризные» микроорганизмы. Это вирусы папилломы и клещевого энцефалита, цитомегаловирусная инфекция и туберкулез, вирусные гепатиты и мононуклеоз, герпетическая инфекция и ВИЧ-инфекция,  микоплазменная и хламидийная инфекция.

Что показывает анализ? Практически всегда он выполняется качественно, и в заключении дается ответ, есть в образце наследственный материал определенного возбудителя, или его нет, человек заражен, или инфицирования не выявлено. Иногда проводится количественное определение, но оно выполняется реже и стоит дорого дороже.

Большим преимуществом является то, что сдавать кровь на ПЦР вполне можно безо всякой подготовки, в отличие от изучения многих биохимических показателей. Кровь сдается, как обычно, без сложностей. В начале XXI века метод ПЦР — золотой стандарт диагностики различных инфекций. Но, как и у любого способа, у метода ПЦР имеются плюсы и минусы.

Плюсы и минусы

Безусловными плюсами этого метода является широкая универсальность. Он может обнаружить очень многих возбудителей, исследовать можно любой биоматериал, от соскобов и до биоптатов тканей, от крови и слюны до мочи и спермы. При необходимой подготовке в одном образце можно сразу поставить реакцию на выявление нескольких возбудителей, провести групповое определение.

Метод ПЦР очень чувствительный, и даже если в исследуемом образце находится всего лишь несколько обрывков ДНК, то можно определить даже раннюю стадию заболевания, включая даже день заражения. Это реакция показана для выявления латентной инфекции, которая никак себя не проявляет, в том числе, если у пациента на фоне иммунодефицита не синтезируются антитела.

Метод ПЦР позволяет проводить быструю диагностику, и уже на следующий день после сдачи анализов получить результат. Наконец, ПЦР — диагностика отличается высокой достоверностью, точностью, и, как показала практика, небольшой стоимостью. Последнее качество очень важно, поскольку при поиске различных инфекций пациенту приходится платить сразу за постановку реакций для поиска нескольких возбудителей. Поэтому количество ПЦР-исследований в каждой крупной лаборатории очень велико.

Но не существует совершенных методов исследования. Следует помнить, что далеко не каждая лаборатория может себе позволить проведение анализов ПЦР. Необходим специальный прибор, в котором ставится реакция, и он называется амплификатор. Профессионализм специалистов лаборатории должен быть очень высоким, соблюдение технологии — безукоризненным, а чистота в лаборатории должна быть абсолютной. Также предъявляются высокие требования к чистоте и исходного образца. В том случае, если берется кровь, то необходимо тщательно обработать кожу, иначе в кровь могут попасть частицы микроорганизмов, которые находятся на ее поверхности. Это же относится и к другим образцам, например, смывам из носоглотки, или к вагинальным мазкам.


Смотрите также