Иммуногистохимическое исследование эндометрия что это такое


Иммуногистохимическое исследование - «Оппа! Была здорова и вот получи-распишись хронический эндометрит! Иммуногистохимия при подготовке к ЭКО: зачем делать, сколько стоит и как проходит?»

Самые важные вещи - это не вещи. Это здоровье, а подчас-репродуктивное здоровье. Вот уже три года я борюсь с бесплодием неясного происхождения. Какие обследования только ни прошла наша семья: проверка проходимости маточных труб, спермограммы, бесчисленные анализы на гормоны, коагулограммы, на ЗППП и прочую нечисть. А уж кабинет репродуктолога и УЗИ-как дом родной. Вердикт-здоровы! Но беременности нет. Остается ЭКО.

При подготовке к ЭКО особое внимание уделяется эндометрию пациентки. Ведь причины пролета в протоколе ЭКО чаще всего сводятся к двум: некачественный эмбрион и некачественный эндометрий. Эндометрий, который не готов или нездоров, не примет оплодотворенную клетку! Что толку тогда мучить женщину дозами гормонов и бесплодными надеждами? Поэтому я была готова к тому, что мне придется пройти гистероскопию или аспират эндометрия перед ЭКО.

Я отношусь к числу женщин с "пышным", "хорошим" эндометрием по УЗИ. Никогда к нему не было вопросов. Пока несколько месяцев назад эндометрий перестал показываться в виде трех ровных полосочек и появились непонятные включения.

Предварительный диагноз перед аспиратом эндометрия был либо хронический эндометрит, либо полипоз.

Чтобы вы понимали, что такое хронический эндометрит и чем он опасен:

Хронический эндометрит — заболевание, которое характеризуется развитием воспалительного процесса в матке. Данный патологический процесс является следствием поздно выявленного и плохо пролеченного острого эндометрита, который перешел в хроническую стадию.

В случае несвоевременного лечения этого патологического процесса инфекция может распространиться на маточные трубы или в глубокие слои матки, что приводит к развитию бесплодия и сепсиса.

Иными словами, это заболевание в хронической стадии протекает практически бессимптомно, что соответственно затрудняет его диагностику, и может привести либо к бесплодию, либо к самопроизвольному прерыванию беременности на ранних сроках.

После проведенного аспирата эндометрия все "материалы" были направлены в патологоанатомическое отделение на гистологию. Гистология подтвердила признаки хронического эндометрита, и вот тогда-то для уточнения диагноза мне было предложено иммуногистохимическое исследование (ИГХ).

Что это такое?

Иммуногистохимические исследования – вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркером. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.

Мне это исследование было назначено именно как УТОЧНЕНИЕ диагноза и подтверждение его природы. Допустим, гистология определяет состояние слоя матки как хронический эндометрит. Но согласитесь, неразумно лечить болезнь, не зная ее природы-бактериальной, травматической, аутоимунной и т.д.

Исследование моего материала проводилось в том же патологоанатомическом отделении. Результат обоих исследований в совокупности я получила на руки за неделю. А стоимость в моем городе Туле составила 5000. Зато я точно знаю, что со мной и как теперь с этим бороться)

Иммуногистохимия в моем случае подтвердила наличие хронического эндометрита, слава Богу, умеренно выраженного, но имеющего аутоиммунный компонент.

То есть, патологический процесс воспринимается организмом как норма и поддерживается им же!

Хронический эндометрит это клинико-морфологический синдром, при котором возникают функциональные и структурные изменения слизистой полости матки вследствие повреждения клеток эндометрия инфекционным агентом. Хронический эндометрит может протекать без отсутствия клинических признаков.

В результате воздействия патологического фактора развивается воспалительная реакция, которая является универсальным способом защиты в организм. Про хроническом эндометрите возникает воспаление в интерстициальной ткани. Оно проявляется инфильтраций макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками и фиброзом ткани.

В настоящее время воспалительные заболевания органов малого таза относят к аутоиммунному процессу, который протекает как самоподдерживающаяся патологическая реакция
Иммунногистохимическое исследование определяет характер иммунологических нарушений. Анализ выявляет пациенток с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.

Вот и представьте, что меня лечили бы в слепую, или не лечили бы вообще, не согласись я на ИГХ!

По результатам иммуногистохимического исследования выдается протокол с описанием, но это уже скорее для врача).

Простому смертному это непонятно. И конечно же, стеклышки с парафином, которые надо беречь!

Мой лечащий врач успокоил меня, сказал, что в моей степени заболевания это все корректируется и расписал мне схему лечения, включающую поддержание иммунитета, физиотерапию и прочее.

Да, это нелегкий и тернистый путь к материнству. Но я справлюсь)

Вот такая информативная и порой необходимая процедура. Когда мне только предложили провести ИГХ, я тут же кинулась читать отзывы и не нашла здесь ничего. Зато Интернет кишел "полезной" информацией об ИГХ при раке! Чего только я себе ни передумала, уж думала, что у меня подозревают страшную болезнь. Оказалось, нет, это просто еще один достоверный способ детального изучения болезней эндометрия.

Всем девушкам, кому для подтверждения диагноза порекомендуют пройти это исследование, очень рекомендую не пожалеть денег, не плевать на свое здоровье и сделать иммуногистохимию. Врага нужно знать в лицо, а лечение должно быть грамотным - это теперь мой девиз)

Всем здоровья и деток-планирующим!

Лечение бесплодия - Иммуногистохимический анализ эндометрия

Уникальные диагностические исследования для женщин в Клинике Молодости и Красоты СЛ:

  • комплексное морфометрическое исследование эндометрия
  • морфометрическое исследование площади поверхности эпителия с пиноподиями
  • морфометрическое исследование рецептивности эндометрия к половым гормонам методом Hitscore
  • ИГХ до 5 антител и более 5 антител

ИГХ - иммуногистохимический анализ эндометрия. Это анализ, который может быть назначен лечащим гинекологом в случае, если:

  • поставлен диагноз или подозрение на «бесплодие»
  • происходит невынашивание беременности (ранняя потеря беременности)
  • несколько попыток ЭКО оказались неудачными
  • необходима диагностика хронического эндометрита

ИГХ – анализ, который помогает определить наличие и количество клеток, препятствующих возникновению беременности. А также определяет чувствительность рецепторов эндометрия к гормональной стимуляции, т.к. может сложиться ситуация, что женщина в целом здорова и все показатели в норме, однако, эндометрий не воспринимает гормоны, что не позволяет ему развиваться правильно. В этом случае, могут быть обнаружены такие патологические изменения эндометрия, как:

  • гиперплазия
  • эндометрит
  • десинхронизация процессов дифференцировки эндометрия
  • неполноценная секреторная трансформация

Зачастую (в 2 из 3 случаях не возникновения желанной беременности) именно эти патологии становятся главными причинами, поэтому так важно вовремя обратиться к опытному специалисту и провести ИГХ.

После назначения анализа доктором, производится биопсия (забор) эндометрия (пайпель-биопсия, гистероскопия с биопсией) - для диагностики эндометрита на 5-7й день цикла. Для оценки секреторной трансформации (рецептивность эндометрия, оценка пиноподий) на 20-24й день цикла при 28-дневном цикле. В любом случае, день и способ забора материала определяются на консультации со своим лечащим врачом в Клинике.

С помощью иммуногистохимического исследования эндометрия можно выявить инфицирование вирусами (ВПЧ 16, ВПГ и др.), чему в последнее время уделяется большое внимание, как причине хронического эндометрита и, как следствие, бесплодности женщины.

Понимание причины неудачных попыток забеременеть поможет подобрать необходимое лечение и дать возможность получить желанную беременность!

Информация, указанная на сайте Clinic-sl.ru не является публичной офертой. Изображения товаров, услуг на фотографиях, представленных на сайте, могут отличаться от оригиналов. Информация о цене товара или услуги, указанная на сайте, может отличаться от фактической, уточняйте стоимость по телефону (843) 522 -47-47 или у администраторов на ресепции клиники по адресу: г.Казань, ул. Павлюхина, 37. Самостоятельно ознакомится с услугами можно здесь.

ИГХ Рецепторы к эстрогенам и прогестерону (иммуногистохимическое исследование)

Метод определения

Гистологическое исследование биоптатов слизистой тела матки, биоптатов молочной железы (с окрашиванием гематоксилином-эозином). Иммуногистохимическое исследование экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона с применением моноклональных антител к эстрогенам и прогестерону (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).

Исследуемый материал Смотрите в описании

Доступен выезд на дом

Комплексное исследование биоптатов. Включает морфологическое описание рецепторов к эстрогенам (ЭР) и прогестерону (ПР) и оценку их экспрессии. 

Рецепторы к эстрогенам (ЭР) и прогестерону (ПР) относятся к внутриклеточным рецепторам стероидных гормонов. Они присутствуют в различных тканях-мишенях, в том числе в молочных железах и матке, где участвуют в механизмах гормональной индукции синтеза матричной РНК, белков, высвобождении цитокинов и факторов роста. 

ЭР и ПР вовлечены в механизмы развития и метастазирования опухолей. Исследование экспрессии ЭР и ПР входит в стандарт обследования больных раком молочной железы, так как позволяет определить гормональную чувствительность опухоли, уточнить прогноз заболевания и потенциальный эффект гормонального лечения. 

Исследование ЭР и ПР также используют в диагностике и прогнозе развития следующих патологических состояний: нарушения женской репродуктивной функции, бесплодие, гиперплазия эндометрия, злокачественные заболевания тела матки.

Опухоли молочной железы

Рак молочной железы – самое распространенное онкологическое заболевание у женщин (частота встречаемости в течение жизни у женщин в возрасте от 13 до 90 лет – 1:9-1:13). Большинство этих опухолей гормонально зависимы, эстрогены и прогестерон стимулируют их рост и метастазирование. Данные гормоны также способствуют развитию некоторых видов рака молочной железы. 

Исследование экспрессии ЭР и ПР в биоптате опухоли в настоящее время рекомендовано проводить всем больным раком молочной железы для определения гормональной чувствительности опухоли, уточнения прогноза заболевания и потенциального эффекта гормонального лечения. 

Опухоли с высоким содержанием ЭР и ПР, как правило, высокодифференцированные, с низкой пролиферативной активностью и минимально агрессивным течением, они хорошо отвечают на гормональную терапию и обычно имеют хороший прогноз. Эффективность гормональной терапии составляет около 50% при опухолях, экспрессирующих рецепторы к эстрогенам (ЭР+), и доходит до 75% при опухолях, экспрессирующих рецепторы как к эстрогенам, так и к прогестерону (ЭР+/ПР+). 

Если опухолевые клетки экспрессируют мало рецепторов к эстрогенам (ЭР-), гормональная терапия обычно неэффективна. Исключение составляют варианты, когда клетки опухоли экспрессируют рецепторы к прогестерону (ЭР-/ПР+) – гормональная терапия эффективна у 10% таких больных. 

Несмотря на то, что изредка резистентность к гормональной терапии наблюдается даже у пациентов с ЭР+/ПР+ опухолями, в настоящее время исследование ЭР и ПР в опухолевой ткани входит в «золотой стандарт диагностики» при раке молочной железы наряду с определением герцепт-статуса (HER-2, рецептор 2-го типа человеческого эпидермального фактора роста) и пролиферативной активности.

Частота встречаемости рецепторов к эстрогенам и прогестерону в клетках опухоли рака молочной железы:

  • Около 75% всех раковых опухолей молочной железы эстроген-позитивны (ЭР+). 
  • Около 65% эстроген-позитивных опухолей имеют также рецепторы к прогестерону (ЭР+/ПР+). 
  • Около 25% всех раковых опухолей молочной железы эстроген-прогестерон-негативны (ЭР-/ПР-), либо их гормональный статус неизвестен. 
  • Около 10% всех раковых опухолей молочной железы эстроген-позитивны и при этом прогестерон-негативны (ЭР+/ПР-). 
  • Около 5% всех раковых опухолей молочной железы эстроген-негативны и при этом прогестерон-позитивны (ЭР-/ПР+).

Бесплодие

Стероидная рецепция эндометрия при бесплодии существенно меняется. Получены достоверные данные о снижении количества прогестерон-позитивных стромальных клеток, повышенной экспрессии α-эстрогенов в железистых и стромальных клетках как при первичном, так и при вторичном бесплодии. Исследование ЭР и ПР позволяет №525 ИГХ Рецепторы к эстрогенам и прогестерону (иммуногистохимическое исследование) оценить потенциальную способность эндометрия к нидации плодного яйца. 

Не менее важна оценка состояния эндометрия перед назначением высоких доз гормональных препаратов в программах ЭКО. С одной стороны, гормональные препараты оказывают существенное влияние на систему рецепторов, с другой – нарушения в рецепторном аппарате могут привести к недостаточной восприимчивости эндометрия к экзогенному гормональному воздействию. 

Восприимчивость эндометрия к воздействию эндогенных гормонов и гормональных препаратов можно определить с помощью соответствующих иммуногистохимических маркеров.

Гиперплазия эндометрия 

Уровень экспрессии ЭР и ПР при простой железистой гиперплазии эндометрия без атипии не зависит ни от возраста женщины, ни от наличия неопухолевой гинекологической патологии (хронического эндометрита, полипов эндометрия, фолликулярных кист яичников). Это позволяет сделать вывод, что женщин постменопаузального возраста следует лечить консервативно. 

Вне зависимости от возраста простая железистая гиперплазия эндометрия с кистозными изменениями желез характеризуется снижением экспрессии ЭР в эпителии кист по сравнению с экспрессией ЭР в неизмененных железах.

Рак тела матки

Эндометриальные карциномы – гетерогенная группа опухолей, состоящая из разных нозологических форм, характеризующихся различным клиническим течением и выживаемостью больных (ВОЗ, Histological Typing Tumors of Female Genital Organs, 2003). Однако даже при одной и той же нозологической форме, например, при наиболее частой разновидности рака тела матки – эндометриоидной аденокарциноме – применяемые методы лечения оказываются неэффективными у каждой пятой больной. Биологическое поведение опухоли, обусловленный им вариант клинического течения и прогноз заболевания остаются недостаточно предсказуемыми даже для больных с одной и той же формой рака тела матки.

Гормонально-рецепторный статус – важнейшая характеристика, определяющая клиническое течение заболевания и выживаемость больных эндометриоидным раком тела матки. Известно, что неопухолевая гинекологическая патология (хронический эндометрит, полип эндометрия, наличие фолликулярных кист яичника) не влияет на рецепторный статус эндометрия. 

В опухолях эндометрия экспрессия рецепторов зависит от степени дифференцировки опухолевой ткани. Снижение дифференцировки клеток злокачественных опухолей приводит к снижению экспрессии рецепторов половых стероидов. В низкодифференцированных опухолях количество ЭР+ и ПР+ клеток достоверно меньше, чем в высокодифференцированных опухолях. Та же закономерность существует в отношении ПР+ клеток в опухолях с умеренной степенью дифференцировки по сравнению с высокодифференцированными карциномами.

Материал для исследования:

биоптат слизистой тела матки, биоптат опухоли молочной железы, фиксированный в 10%-м растворе формалина, забуференного по Лилли.

Литература

  • Волченко Н.Н., Франк Г.А. Комплекс морфологических и прогностических факторов при раке молочной железы: Пособие для врачей. - М., 2000. 
  • Иммуногистохимические методы, руководство (пер. с англ. под ред. Г.А. Франка и П.Г. Малькова) // М., 2011 – 224 с. 
  • Пожарисский К.М., Самсонова ЕА, Тен В.П., Максимова Н.А., Урманчеева А.Ф. Иммуногистохимический профиль эндометриоидной аденокарциномы тела матки: ER, PR, HER2, Ki-67 и их прогностическое значение //Архив патологии. - 2005. -Вып. 2.- с.13-17. 
  • Самсонова Е.А.. Максимова Н.А., Урманчеева А.Ф., Пожарисский К.М. Экспрессия рецепторов эстрогенов, прогестерона и онкобелка HER2 как показатели клинического течения и исхода эндометриоидной аденокарциномы тела матки (иммуногистохимическое исследование) //Вопр. онкол. - 2004. - Т. 50, № 2. - С. 196-201. 
  • Almasri N.M., Al Hamad M. Immunohistochemical evaluation of human epidermal growth factor receptor 2 and estrogen and progesterone receptors in breast carcinoma//Breast Cancer Res.-2005.-Vol.7 (5).-P.598-604. 
  • WHO Classification of Tumors of the Braest. WHO, Lyon, 20

Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) при беременности

Актуальность иммуногистохимических исследований

Развитие вспомогательных репродуктивных технологий эффективно решает проблему бесплодия. Однако, несмотря на уровень развития современной медицинской науки, не все попытки результативны. Одной из основных причин неудач остается отсутствие имплантации эмбриона в слизистую матки. Этот завершающий этап всех процедур ЭКО зависит от качества переносимого эмбриона и состояния внутренней оболочки матки, называемой эндометрием. Причем именно патология эндометрия ответственна за отсутствие имплантации в 30% случаев.

Адекватное функционирование слизистой матки и готовность к имплантации во многом зависят от состояния ее внутриклеточных рецепторов  к стероидным гормонам – эстрогенам и прогестерону. Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) материала эндометрия помогает наиболее точно оценить его рецепторный аппарат, а значит и потенциальную способность к успешному прикреплению плодного яйца. Кроме того, этот метод позволяет определить чувствительность эндометрия к гормональным препаратам, назначаемым в программах ЭКО, что чрезвычайно важно при их проведении.

В клинике «Новая жизнь» ИГХ-исследования проводятся как для выяснения факторов воспаления эндометрия, так и для выявления рецепторной активности Прогестерона и Эстрогенов. Процедура довольно проста, в определенный день менструального цикла при помощи Пайпель биопсии берут кусочек эндометрия для исследования. Взятая ткань отправляется в специальную лабораторию для исследования данного материала. Через 6-8 дней вы получите заключение проведенного исследования.

По полученному результату врач определит состояние эндометрия на конкретный день менструального цикла, выяснит, не является ли причиной отсутствия имплантации воспалительный процесс или сдвиг окна имплантации. Т.е. отсутствие готовности эндометрия на данный день менструального цикла имплантировать эмбрион.

 

Понятие о рецептивности и имплантационном окне    

Основная роль в процессе имплантации принадлежит такому свойству эндометрия, как рецептивность. Под этим понятием подразумевают способность последнего наиболее эффективно обеспечить необходимые этапы внедрения эмбриона: ориентацию в полости матки относительно места будущего прикрепления, непосредственно прикрепление к внутреннему слою матки-эндометрию. Чтобы оптимально осуществить все эти последовательные действия, эндометрий и эмбрион должны развиваться синхронно.

Перенос эмбрионов не увенчается успехом, если между степенью их развития и функциональной полноценностью слизистой матки будут различия. Поэтому так важен вопрос определения периода наибольшего соответствия эмбриона и эндометрия. Этот временной промежуток именуют имплантационным окном. Внедрение человеческой бластоцисты в  матку и дальнейшее благополучное развитие  плода до родов возможно только в определенный период.

В другие периоды рецептивность эндометрия недостаточная, и успешный процесс имплантации эмбриона невозможен. Имплантационное окно составляет от 2-х до 4-х суток (20-й – 24-й дни менструального 28 дневного цикла) и характеризуется изменениями в строении эпителия эндометрия: на его поверхности возникают специфические выпячивания – пиноподии.     

 

Преимущества ИГХ

Поскольку наступление беременности во многом зависит от состояния слизистой оболочки матки, то характеристика эндометрия в период имплантационного окна приобретает первостепенное значение. Стандартное гистологическое исследование соскобов и биоптатов не в состоянии предоставить всю необходимую информацию для выбора тактики лечения бесплодия. Так, например, опираясь лишь на результаты гистологии, нельзя достоверно установить недостаточность лютеиновой фазы и сделать выводы о рецептивности эндометрия. Данные гистологического заключения свидетельствуют о клеточном изменении эндометрия в соответствии с менструальным циклом и наличии морфологических изменений , но не определяют количество рецепторов Прогестерона и Эстрогена , которые влияют на готовность матки принять эмбрион.  

Окончательным и информативным этапом диагностики состояния эндометрия и оценки его рецепторного аппарата является использование иммуногистохимического метода. Это исследование необходимо при выборе лечебных мероприятий пациенткам после неудач программ ВРТ и при назначении высоких дозировок гормональных препаратов в протоколах ЭКО. Также ИГХ позволяет объективно судить о восприимчивости слизистой матки к воздействию собственных гормонов и принимаемых гормональных препаратов, а значит делает возможным дифференцированный подход к лечению каждой женщины, страдающей бесплодием.

 

Что изучают при проведении ИГХ

Объектом для исследования является биоптат слизистой тела матки, получаемый при помощи аспирационной кюретки. Процедура забора безболезненна и успешно проводится в нашей клинике без предварительной анестезии. Когда проводить забор материала для иммуногистохимического анализа, решает специалист клиники индивидуально для каждой пациентки.

Выбор фазы и конкретного дня менструального цикла зависит от цели исследования и задач, которые хочет решить врач, при исследовании нарушений имплантации ,чаще это 18 – 22 дни стандартного цикла. При исключении воспалительного процесса 9-10 день менструального цикла.

В нашей клинике при подозрении сдвига окна имплантации мы проводим ИГХ исследование как в натуральном цикле ( если женщина овулирует) и в цикле ЗГТ ( если у пациентки отсутствует овуляция).

При ИГХ изучают и описывают морфологию, то есть форму и строение, эстрогеновых и прогестероновых рецепторов эндометрия при помощи окраски антител к данным гормонам, вычисляют коэффициент , а главное, оценивают экспрессию или чувствительность этих рецепторов к данным половым гормонам в эпителиальных железах и клетках стромы.

Исследуют многочисленные иммуногистохимических маркеры: Кi67, циклин Е, Р27 и другие. Показатели экспрессии каждого из этих белков, регулирующих клеточный цикл, помогают врачу клиники при выборе тактики лечения пациенток с бесплодием различного происхождения, в том числе, спровоцированного патологией эндометрия.       

Дополнительная информация

Микрофлора женских половых органов

В этой статье речь пойдет о женских проблемах в репродуктивном возрасте ( 18- 45 лет), т.к. в подростковом и перименопаузальном периоде, появляются свои особенности, которые необходимо учитывать в лечении.

Лечение бесплодия у мужчин

Поставить диагноз мужчине наиболее просто. После 2-3 дней воздержания сдают сперму на исследование и через час уже готов анализ и исследована репродуктивная функция.

Лечение бесплодия у женщин

В семье первой "бьет тревогу" женщина. И часто без мужа приходит на прием к врачу репродуктологу. При доступности всемирной паутины, форумов и сайтов на прием приходят уже с анализами и самостоятельно поставленными диагнозами.

Будущий папа

Перед планируемым зачатием нужно подумать о здоровом образе жизни.

Контрацепция

В клинике "Новая Жизнь" вы можете получить консультацию высококлассных врачей гинекологов-эндокринологов по наиболее подходящему для вас методу контрацепции.

Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции, расширенное) (PR, ER, CD56, CD138, LIF)

Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса эндометрия (стадия секреции, расширенное (PR, ER, CD-56, CD-138, LIF)) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для определения рецепторного статуса эндометрия. 

ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.

Иммуногистохимическое исследование  
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.

Хронический эндометрит

Хронический эндометрит — это клинико-морфологический синдром, при котором возникают функциональные и структурные изменения слизистой полости матки вследствие повреждения клеток эндометрия инфекционным агентом. Хронический эндометрит может протекать без отсутствия клинических признаков. Он часто является причиной нарушения репродуктивной функции, вплоть до бесплодия.

По этиологическому фактору хронический эндометрит бывает специфическим (с выявлением инфекции) или неспецифическим (полимикробной ассоциации).

Факторы риска развития хронического эндометрита: 

  • Инфекционно-воспалительный процесс в малом тазу.
  • Наличие внутриматочной спирали.
  • Инфекции влагалища и шейки матки.
  • Бактериальный вагиноз.
  • Деформации полости матки с нарушением циклического отторжения эндометрия.
  • Инвазивные вмешательства в полость матки.
  • Лучевая терапия в области органов малого таза.
  • Раннее начало половой жизни.
  • Курение.
  • Употребление алкоголя.
В результате воздействия патологического фактора развивается воспалительная реакция, которая является универсальным способом защиты в организм. Про хроническом эндометрите возникает воспаление в интерстициальной ткани. Оно проявляется инфильтраций макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками и фиброзом ткани. На местном уровне наблюдается активация цитокинов-медиаторов воспаления. Цитокины способствуют дополнительному привлечению в зону воспаления лимфоцитов, активации нейтрофилов и макрофагов. В результате воспаления наблюдается повреждение эпителия, нарушение его пролиферации и нормальной циклической трансформации.

«Золотой стандарт» в диагностике хронического эндометрита это гистологическое исследование.
Диагноз выставляется врачом-патоморфологом на основании изучения биоптатов эндометрия. Морфологически заболевание проявляется инфильтрацией стромы эндометрия плазматическими клетками.

В настоящее время воспалительные заболевания органов малого таза относят к аутоиммунному процессу, который протекает как самоподдерживающаяся патологическая реакция.

Иммуногистохимическое исследование определяет характер иммунологических нарушений. Анализ выявляет пациенток с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.

Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR)
Эстроген и прогестерон — основные женские половые гормоны. Они вырабатываются яичниками и являются основными регуляторами деятельности репродуктивной системы женщины.

Рецепторы присутствуют в различных тканях, в том числе в молочных железах и матке.

Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR) являются веществами белковой природы, которые локализованы на поверхности опухолевой клетки. Под влиянием женских половых гормонов, рецепторы формируют комплекс, который стимулирует появление новых опухолевых клеток. Разрушение этого механизма лежит в основе гормонотерапии.

Иммуногистохимическое определение ER и PR способно повести дифференциальную диагностику характера опухоли, выявить чувствительность опухоли к гормонам. Анализ позволяет скорректировать и уточнить лечение, а также оценить эффективность.

Опухоли с высоким содержанием рецепторов к эстрогенам и прогестерону являются высокодифференцированными. Они обладают низкой пролиферативной активностью и характеризуются не агрессивным течением. Опухоли с такими показателями хорошо отвечают на гормональную терапию и имеют хороший прогноз. Эффективность гормональной терапии составляет около 50% при опухолях, экспрессирующих рецепторы к эстрогенам, и 75% при опухолях, экспрессирующих рецепторы к обоим гормонам.

Если опухолевые клетки имеют низкое число рецепторов к эстрогенам, гормональная терапия обычно неэффективна. Исключение составляют случаи, когда опухолевые клетки экспрессируют рецепторы только к прогестерону. При таком варианте гормональная терапия эффективна у 10% таких больных.

CD-56
CD-56 — прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD-56 позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD-56 негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гемофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

CD-138
Это маркёр плазматических клеток. Его определение показано при неполной морфологической картине хронического эндометрита.

LIF 
LIF — лейкемия-ингибирующий фактор — продуцируется различными типами клеток, в том числе Т-клетками, клетками миеломоноцитарной линии, фибробластами, клетками печени, сердца и меланомы. LIF в течение длительного времени поддерживает эмбриональные стволовые клетки в недифференцированном состоянии, подавляя спонтанную дифференцировку. Кроме того, LIF обладает свойствами стимулировать синтез белков острой фазы в гепатоцитах, стимулировать дифференцировку холинергических нервов и подавлять адипогенез ингибируя липопретеинлипазу в адипоцитах. В эндометрии здоровых женщин экспрессия LIF резко возрастает в середине секреторной фазы, совпадая с предполагаемым окном имплантации.

Эндометрий бесплодных женщин и женщин с необъяснимым рецидивирующим выкидышем синтезирует значительно меньше LIF и его рецепторов (LIFR и gp130) в период рецептивности по сравнению со здоровыми женщинами. Обнаружена связь мутаций гена LIF и наличия антифосфолипидных антител у бесплодных женщин: у 100% женщин с мутациями гена LIF детектировались антифосфолипидные антитела, тогда как у бесплодных женщин, без этого вида мутаций, частота выявления антифосфолипидных антител составила 30% (p = 0,0035). LIF-R необходим для нормального развития мотонейронов в головном и спинном мозге. При нарушениях гена LIF-R, в эксперименте отмечают дефекты развития плаценты, скелета, нервной системы у эмбрионов, приводящие к перинатальной смерти. Возможные области использования этого маркёра — в изучении таких видов патологии, как онкологические, аутоиммунные и воспалительные заболевания в качестве диагностического инструмента, а также для мониторинга и терапевтического вмешательства.

Показания к проведению ИГХ-исследования:

  • рак молочной железы — для оценки гормональной чувствительности опухоли, уточнения прогноза и выбора метода лечения;
  • первичное/вторичное бесплодие — для оценки потенциальной способности эндометрия к нидации (имплантации) плодного яйца; 
  • рак тела матки — для оценки гормональной чувствительности опухоли, уточнения прогноза и выбора метода лечения; 
  • нарушения менструального цикла, дисфункция яичников, гиперплазия эндометрия — в качестве дополнительного исследования для оценки потенциальной эффективности гормональной терапии.
Подготовка
Подготовка определяется лечащим врачом.

Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки рекомендовано проводить в среднюю и позднюю фазу пролиферации — на 7–10-й день менструального цикла.

Интерпретация результатов
Единицы измерения: проценты (%).

Интерпретация: описательный ответ с указанием процента клеток, в которых определяется ЭР и ПР, CD56, LIF. Даётся подсчет пиноподий.

Референсные значения: диапазон значений индивидуален, зависит от фазы менструального цикла, анамнеза, проведённого лечения и клинического диагноза.

Форма выдачи результата

Проводится морфологическая оценка состояния эндометрия или морфологическая оценка опухоли молочной железы согласно классификации ВОЗ (2012).

Проводится подсчёт количества окрашенных ядер клеток желёз эндометрия, учитывается процентное соотношение окрашенных/неокрашенных ядер клеток на 100 учтённых клеток в 10 репрезентативных полях зрения при 40-кратном увеличении.

Иммуногистохимическая диагностика хронического эндометрита (фаза пролиферации)

Комплексное иммуногистохимическое исследование экспрессии специфических иммунологических маркеров хронического эндометрита (натуральных киллеров CD56 и CD16, B-клеток (CD20), плазматических клеток (CD138) и активированных лимфоцитов (HLA-DR), позволяющее провести более точную диагностику и спрогнозировать течение процесса, оценить эффективность проводимой терапии и провести ее коррекцию.

Синонимы русские

Иммуногистохимическое исследование биоптата эндометрия.

Синонимы английские

Immunohistochemical analysis of endometrial biopsies.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани (в парафиновом блоке).

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Иммуногистохимия – это метод исследования тканей и клеток, основанный на обнаружении специфических антигенов с помощью присоединения к ним антител, меченных флюорохромом или ферментом. Антигены – молекулы белков или углеводов, имеющие уникальную трёхмерную структуру, способные индуцировать образование антител. Антитела – это иммуноглобулины, распознающие антигены и присоединяющиеся к ним во время реакции "антиген-антитело". Антигены и антитела – это молекулы, неразличимые при исследовании методом световой и электронной микроскопии. Для обнаружения специфических антигенов к образцу ткани или клеток добавляют реагент, содержащий меченные флюорохромом или ферментом антитела, в результате чего образуется иммунный комплекс "антиген-антитело". Комплексы формируют специфическое окрашивание тканей и клеток, обеспечивая детекцию патологических изменений на молекулярном уровне. Иммуногистохимическое исследование позволяет верифицировать онкологические заболевания, метастатические поражения,  определить их гистологический подтип, экспрессию биомаркеров, определяющих прогноз заболевания и схему лечения.

Эндометрий – это слизистая оболочка, выстилающая полость матки изнутри, необходимая для имплантации оплодотворенной яйцеклетки и развития плаценты во время беременности. Он подвергается динамическим структурным и функциональным изменениям во время менструального цикла под действием женских половых гормонов. Для исследования эндометрия в фазе пролиферации материал для исследования забирается с 5 до 14 день менструального цикла. Пролиферативная фаза прекращается в момент овуляции, когда зрелая яйцеклетка выходит из фолликула яичника в маточную трубу. Под действием гормона желтого тела яичника – прогестерона приостанавливается рост желез эндометрия и стромы, начинается секреторная фаза, характеризующаяся образованием вакуолей секретом в клетках желез (15-18 день). Позже секрет выделяется в просвет желез, формируется гипертрофия стромальных клеток, появляются видимые спиральные артериолы. Морфологические изменения сопровождаются небольшой нейтрофильной и лимфоцитарной инфильтрацией.

Ряд патологических состояний нарушает нормальное циклическое функционирование эндометрия у женщин репродуктивного возраста. Наиболее распространенными причинами считаются хронический эндометрит, полипы эндометрия, ановуляция и миома матки.

Хронический эндометрит – это воспалительное заболевание эндометрия, чаще поражающее женщин репродуктивного возраста, но встречающееся и в постменопаузе. Факторами риска являются воспалительные заболевания органов малого таза, внутриматочные контрацептивы (спирали), хирургические манипуляции в полости матки (выскабливание), недавняя беременность. Возбудителями заболевания чаще всего являются Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus agalactiae, Mycoplasma hominis и различные вирусы. Наиболее распространенный симптом – маточные кровотечения, не связанные с менструацией. Кроме того, хронический эндометрит может быть причиной бесплодия и самопроизвольного прерывания беременности.

Золотым стандартом диагностики хронического эндометрита является гистологическое исследование биоптата эндометрия. Главным маркером является инфильтрация стромы эндометрия плазматические клетками (CD138). Также часто обнаруживаются и другие воспалительные элементы: нейтрофилы (обычно в поверхностном эпителии и железах), субэпителиальные лимфоцитарные инфильтраты, гистиоциты с гемосидерином и редкие эозинофилы.

Поскольку эпизодические плазматические клетки обнаруживаются и в поздней секреторной фазе, и в строме полипов эндометрия, их присутствие не всегда означает инфекционную этиологию. В очень редких случаях обнаружение плазматических клеток в биоптате эндометрия может свидетельствовать о лимфопролиферативном заболевании. 

Для дифференциальной диагностики используется метод иммуногистохимии, позволяющий определить маркеры хронического эндометрита на молекулярном уровне и идентифицировать воспалительные клетки (плазматические клетки CD138), натуральные киллеры CD56 и CD16, B-клетки (CD20) и активированные лимфоциты (HLA-DR).

При верификации диагноза назначается специфическая антибактериальная терапия. По результатам исследования можно оценить эффективность проводимой терапии, определить показания к ее коррекции.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики хронического эндометрита;
  • для дифференциальной диагностики причин маточных кровотечений, не связанных с менструацией;
  • для определения причин бесплодия или самопроизвольного прерывания беременности;
  • для дифференциальной диагностики лимфопролиферативных заболеваний с поражением матки.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на хронический эндометрит, особенно при наличии факторов риска в анамнезе: воспалительные заболевания органов малого таза, внутриматочные контрацептивы (спирали), хирургические манипуляции в полости матки (выскабливание), недавняя беременность;
  • при маточных кровотечениях, не связанных с менструацией;
  • при бесплодии;
  • при самопроизвольном прерывании беременности;
  • для исключения противопоказаний перед проведением экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

Что означают результаты?

Исследование назначается при наличии клинико-анамнестических данных и по результатам предварительно проведенного гистологического исследования.

Структуры эндометрия, соответствующие фазе пролиферации, наблюдаемые в физиологических условиях в первую половину 2-фазного менструального цикла могут отражать гормональные нарушения, если их обнаруживают во второй половине цикла (это может указывать на ановуляторный, однофазный цикл или на ненормальную, удлиненную фазу пролиферации с запоздавшей овуляцией при двухфазном цикле), при железистой гиперплазии эндометрия в различных участках гиперплазированной слизистой оболочки матки и при дисфункциональных маточных кровотечениях у женщин в любом возрасте.

Обнаружение специфических маркеров (натуральных киллеров CD56 и CD16, B-клеток CD20), плазматических клеток (CD138) и активированных лимфоцитов (HLA-DR) в биоптате эндометрия в пролиферативную фазу свидетельствует о хроническом эндометрите.

 Скачать пример результата

Важные замечания

  • Для исследования эндометрия в фазе пролиферации материал забирается с 5-го по 14-й день менструального цикла.
  • Противопоказаниями к проведению любого вида биопсии эндометрия являются: беременность, острые инфекции мочеполовых органов, воспалительные заболевания органов малого таза – половых и мочевыводящих, значительные нарушения свертываемости крови.

Кто назначает исследование?

Гинеколог, репродуктолог.

Также рекомендуется

Литература

1) Techniques of immunohistochemistry: principles, pitfalls, and standardization. Richard W. Cartun, Clive R. Taylor and David J. Dabbs. Diagnostic Immunohistochemistry, Chapter 1, 1-46.

2) Benign Endometrium. David W Kindelberger  and Marisa R Nucci. Gynecologic Pathology: A Volume in the Series: Foundations in Diagnostic Pathology, Chapter 6, 197-232.

3) The Female Genital Tract. Lora Hedrick Ellenson and Edyta C. Pirog. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease, Chapter 22, 991-1042.

4) Immunohistochemical analysis of CD56-positive natural killer cells in the human endometrium. Maja Weber, Bettina Toth, Isabel Santillan, Christin Bär, Ekkehard Schleußner  and Udo R. Markert. Journal of Reproductive Immunology, 2016-06-01, Volume 115, Pages 79-80.

5)  Genital Tract Infections: Vulva, Vagina, Cervix, Toxic Shock Syndrome, Endometritis, and Salpingitis. Carolyn Gardella, Linda O. Eckert and Gretchen M. Lentz Comprehensive Gynecology, 23, 524-565.

Иммуногистохимия. Помогите расшифровать. - запись пользователя Ирина (Shkurka) в сообществе ЭКО - мама в категории Эндометрий и все о нем (лечение, наращивание, улучшение)

Девочки, добрый день!

Делала ИГХ. Пришли результаты.

Понимаю, что подтвердился ХЭ и есть проблемы с рецепторами и пиноподиями, но до конца понять реальную картину по результату не могу. И инете тоже очень мало инфы.

Если кто разбирается хорошо, помогите, плиз, расшифровать результат.

Спасибо!

=======================

НАЗНАЧЕННЫЕ ОКРАСКИ: LIF 4/100, Окраска гематоксилином и эозином, CD56, CD138, Estrogen Receptor, Progesterone Receptor.

МАКРОСКОПИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ: В ПРОВОДКУ ВЗЯТО: 0 1 КУС. Фрагменты серой ткани общими размерами 1х0.5х0.3 см

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ: В исследуемом материале фрагменты эндометрия: строма с неравномерным отеком, мелкоочаговые кровоизлияния. Эндометриальные железы извитые, с расширенным просветом, в эпителии желез субнуклеарные вакуоли, ядра вытянутые, расположены на различных уровнях, что соответствует 2-3 дню после овуляции. В строме артерии достигли поверхности, покровный эпителий содержит менее 35% пиноподий. В строме очаговый фиброз, очаговая слабо выраженная лимфоклеточная инфильтрация.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Эндометрий недостаточной фазы секреции с задержкой желез в ранней стадии, очаговый фиброз стромы.

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ: С парафинового блока деланы срезы и проведены иммуногистохимические реакции с антителами к: PgR (1E2, Roche-Ventana), ER (SP1, Roche-Ventana), CD56 (123C3, Roche- Ventana),CD138 ((B-A38) CD-138/syndecan-1, Roche-Ventana) LIF (Abcam) с помощью иммуногистостейнера Ventana BenchMark ULTRA.

Результаты:

PgR - ядерная реакция в железах эндометрия составляет 209 баллов (выраженная экспрессия по Н-Score)

PgR - ядерная реакция в стромальных клетках эндометрия составляет 135 баллов (умеренная экспрессия по Н-Score)

ER - ядерная реакция в железах эндометрия составляет 210 баллов (выраженная экспрессия по Н-Score)

ER - ядерная реакция в стромальных клетках эндометрия составляет 95 баллов (умеренная экспрессия по Н-Score)

LIF- 5-6 баллов (норма 10) СD56 в строме эндометрия - диффузно расположенные клетки с умеренно выраженной мембранной реакцией, до 6 в поле зрения (норма до 10)

CD138 в строме эндометрия - очагово расположенные клетки с умеренно выраженной мембранной реакцией, до 2 в поле зрения (норма 0)

Положительный контроль позитивный. Отрицательный контроль негативный.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Морфологическая картина недостаточной фазы секреции с задержкой желез в ранней стадии. Данные подтверждаются иммуногистохимически - LIF снижен отмечается гиперэкспрессия рецепторов прогестерона в железах (приближен к ранней секреции) и в строме (уровень соответствует ранней секреции). Гиперэкспрессия эстрогенов в железах (приближен к ранней секреции) и строме (уровень соответствует ранней секреции). Очаговое обнаружение плазматических клеток (CD138) свидетельствует об очаговом хроническом эндометрите.

================================

Иммуногистохимия при ЭКО | Unim

При планировании беременности методом ЭКО важно пройти все необходимые процедуры обследования. Это поможет врачу правильно подготовить организм пациентки к зачатию и вынашиванию беременности.

Одной из таких диагностических процедур является иммуногистохимия. Иммуногистохимия при ЭКО проводится при наличии первичного или вторичного бесплодия. Гистология при ЭКО также является важной частью диагностики, она проводится одновременно с иммуногистохимией. ИГХ необходима, чтобы оценить потенциальную способность эндометрия к имплантации (нидации) плодного яйца. Гистология включает в себя исследование структуры поверхностного эпителия эндометрия.

ИГХ ЭКО определяет наличие благоприятных и неблагоприятных критериев наступления беременности. К негативным критериям относят персистирующую гиперэкспрессию ЭРα в среднелютеиновую фазу менструального цикла, а к позитивным — соотношение прогестероновых и α-эстрогеновых рецепторов (ПР/Эрα), соответствующее морфологической структуре эндометрия и количество клеток поверхностного эпителия в эндометрии с наличием пиноподий ≥50%. При первичном и вторичном бесплодии наблюдается снижение количества прогестерон-позитивных стромальных клеток, повышенная экспрессия α-эстрогенов в железистых и стромальных клетках.

Также при проведении иммуногистохимии возможно оценить восприимчивость рецепторов к эндогенным гормонам, и в соответствии с этим скорректировать дозу препаратов при подготовке к циклу ЭКО.

Для проведения иммуногистохимии необходим образец ткани эндометрия. Его получают при процедуре, называемой биопсия. Затем этот образец ткани помещают в специальный раствор и доставляют в патоморфологическую лабораторию, где его подготавливают к исследованию. После подготовки готовый образец в виде гистологических стекол попадает к врачу-патоморфологу, который изучает его под микроскопом и ставит диагноз.

В диагнозе указывается морфологическое описание клеток эндометрия, а также результаты ИГХ-реакции на рецепторы гормонов (прогестерона, эстрогена) в ядрах клеток эпителия желез и стромы, а также указывается экспрессия рецепторов в эндометрии и общая оценка .

Также иммуногистохимическое исследование при ЭКО может быть направлено на определение клеток-киллеров, создающих препятствия беременности. К ним относят CD4 (В-ХЛЛ) , CD8 (Т-лимфоциты-киллеры/супрессоры) ,СD16 (NK-клетки, естественные клетки-киллеры), CD56 (часть Т-клеток), CD20 (В-клетки), CD23 (активированные В-клетки), CD38 (В-клетки, активированные лимфоциты).


Смотрите также