Пцр диагностика на туберкулез что это такое


ПЦР диагностика туберкулеза - суть метода, плюсы и минусы

Полимеразная цепная реакция (далее ПЦР) — это высокоточный метод молекулярно-генетического исследования материла, который позволяет выявить у человека различные инфекционные заболевания и установить генотип возбудителя.

ПЦР для выявления различных заболеваний стала применяться в самом конце прошлого века. Первооткрывателем этого метода исследования является американский биохимик Кэри Муллис. Свое открытие он сделал в 1983 году. Но еще несколько лет понадобилось, чтобы доработать метод.

Суть метода

С помощью ПЦР-диагностики можно обнаружить фрагменты чужеродного ДНК в любой жидкой среде организма. На анализ могут быть взяты такие жидкости:

  • Кровь.
  • Слюна.
  • Мокрота.
  • Выделения из половых органов.
  • Смывная жидкость бронхов.
  • Желудочный сок.

Лечащий врач сам определяет, какую биологическую жидкость лучше взять на анализ при конкретном заболевании.

ПЦР-диагностика позволяет не только обнаружить микрофрагменты чужеродной ДНК, но и определить к какому конкретному виду она относится. То есть с помощью ПЦР можно не только точно установить возбудителя заболевания, но и выяснить к какому виду он принадлежит.

Процесс анализа ПЦР — очень сложный. Он состоит из нескольких этапов:

  1. Сначала нужно обнаружить фрагменты вредоносной ДНК в предоставленном образце.
  2. Копирование фрагмента ДНК. Маленького участка ДНК для анализа недостаточно, поэтому его копируют. Нуклеиновая кислота может копироваться в пробирке с помощью фермента полимеразы (вне живого организма). В пробирке образуется множество клонов, то есть происходит цепная реакция. Весь процесс происходит в три этапа под воздействием различных температур.
  3. Когда генетического материала становится достаточно для исследования, тогда возбудитель определяется обычными методами.

Метод ПЦР очень точен и может выявить наличие любого возбудителя по небольшому фрагменту ДНК или РНК.

ПЦР-исследование туберкулеза

ПЦР-анализ на туберкулез является самым информативным методом диагностирования этого заболевания. Относительно туберкулеза этот метод позволяет не только установить наличие микобактерий в организме, но и определить к какому виду они принадлежат.

Результат ПЦР диагностики может быть простой и расширенный. В простом результате указывается только наличие/отсутствие микобактерии. Расширенный результат дает представление о дополнительных параметрах протекания заболевания. Правильно понять, что написано в результате анализа ПЦР может только фтизиатр.

Показания для проведения ПЦР-исследования туберкулеза

ПЦР-диагностика туберкулеза не проводится всем без исключения. Это объясняется дороговизной реактивов и недоступностью проведения исследования в некоторых отдалённых районах (в таких местах пользуются другими методами диагностики).

Показаниями для проведения ПЦР-исследования являются:

  • Длительный контакт с больным туберкулезом.
  • Беременность. ПЦР крови на туберкулез является самым быстрым и безопасным методом для беременной женщины.
  • Экстренная ситуация. Например, необходимость срочного оперативного вмешательства, при котором нужно точно установить наличие/отсутствие туберкулеза в организме.
  • Аллергическая реакция на туберкулиновые пробы.
  • ВИЧ-инфекция.
  • Невозможность диагностирования заболевания другими способами, при наличии явных признаков туберкулеза.
  • Неоднозначные симптомы, которые не позволяют создать четкую клиническую картину заболевания (болезни верхних дыхательных путей, сопровождающиеся большим количеством мокроты, кровохарканьем и пр.).

Метод ПЦР, при всей своей сложности и дороговизне, проводится и расшифровывается в течение нескольких часов. Что делает этот метод золотым стандартом при диагностике туберкулезной инфекции.

Забор материала

Забор материала — это первый этап при выполнении ПЦР-исследования. Для того, чтобы выполнить качественный анализ, нужно соблюдать определенные правила по сбору материла:

  • Для ПЦР мокроты на туберкулез нужно тщательно провести туалет полости рта. Делать это нужно вечером и утром перед анализом. Все это время не есть. Вечером выпить муколитическое средство для лучшего отхождения мокроты.
  • Перед сдачей крови на ПЦР нужно не употреблять пищу в течение 8 часов. Лучше всего производить забор крови утором натощак. Курить перед забором крови также нельзя. Кровь берется из вены на локтевом сгибе руки в стерильную пробирку. В эту же емкость добавляется антикоагулянт, чтобы кровь оставалась жидкой. Смешивать антикоагулянт с кровью нужно очень аккуратно, не делая резких движений. Если кровь была взята не в лабораторных условиях, то она должна быть предоставлена лаборанту до истечения пятичасового срока. Иначе результат может быть не точным.
  • Моча собирается в стерильную емкость утром, до приема пищи. Перед сбором мочи необходим тщательный туалет промежности.
  • Остальные виды жидкостей (смывы с бронхов, спинномозговая жидкость) может собрать только специалист в условиях стационара.
  • Перед забором жидкостей на ПЦР-исследование запрещено принимать некоторые препараты (например, прием некоторых антибиотиков нужно прекратить за две недели до забора материала).
  • Требования к лаборатории, в которой проводится забор анализов на ПЦР очень строгие. Лаборатория должна быть стерильна, чтобы не произошло перекрестное загрязнение материала. В этом случае результаты могут быть ложноположительными.

ПЦР-тест на туберкулез — высокоточный информативный анализ. И требования к его проведению крайне строгие. Чтобы анализ получился, нужно соблюдать регламент.

Требования к ПЦР-лаборатории

Для работы в ПЦР-лаборатории приглашаются специально обученные врачи: бактериологи, вирусологи, микробиологи. Все они прошли дополнительное обучение для работы на сложном оборудовании.

Лаборатория должна иметь лицензию на выполнение работ связанных с бактериологически-опасными вирусами и бактериями.

В самой лаборатории должны быть выделены такие рабочие зоны:

  • Зона приемки и сортировки проб.
  • Зона подготовки проб. В этом помещении выделяются нуклеиновые кислоты из образцов материала.
  • Зона проведения реакционных проб.
  • Зона для учета результатов и расшифровки анализов.

Все помещения располагают последовательно. Допуск в эти зоны разрешен только работающим там сотрудникам, которые при входе соблюдают правила личной защиты от бактерий и вирусов.

Лучше, если есть возможность расположить лабораторию в отдельно стоящем здании с собственной системой вентиляции.

В лаборатории соблюдаются стерильные условия работы, чтобы избежать перекрестного загрязнения проб. Даже если один фрагмент чужеродной ДНК попадет в исследуемый материал, ПЦР его размножит, и анализ получится ложноположительным.

В каждой зоне лаборатории имеется свой набор оборудования и посуды для проведения исследований. Также имеются свои холодильники, которые не могут быть использованы в других целях, кроме хранения материала конкретной зоны исследований.

Использованные расходные материалы и остатки биологического материала уничтожаются специальными способами, в соответствии с инструкциями.

Плюсы ПЦР-диагностики

ПЦР-тест на туберкулез имеет множество плюсов, которые делают этот метод диагностики все более востребованным:

  • Срок проведения. Несмотря на сложность проведения анализа, он готовится намного быстрее других лабораторных методов диагностики туберкулеза (около пяти часов). Это свойство анализа ПЦР становится особенно важным, когда анализ необходимо провести экстренно.
  • Анализ ПЦР абсолютно безопасен и может проводиться беременным женщинам и детям.
  • ПЦР-исследование можно сделать, когда по каким-то причинам нельзя выполнить другие методы диагностики.
  • С помощью ПЦР-диагностики можно провести исследование любой биологической жидкости на выбор. В некоторых случаях это имеет большое значение.
  • Позволяет обнаружить возбудителя на любой фазе заболевания. Даже после проведенного лечения, сохранившиеся остатки ДНК мертвых микобактерий будут обнаружены.
  • Высочайшая чувствительность этого метода позволяет обнаруживать в биологическом материале даже единичные фрагменты ДНК микроорганизмов.
  • Метод ПЦР позволяет не только обнаружить присутствие заболевания, но и может определить генотип возбудителя, отличив его от похожих микроорганизмов.
  • ПЦР-исследование очень эффективно при рецидивирующем течении заболевания.
  • Благодаря высочайшей чувствительности, анализ ПЦР может распознать микобактерии в организме человека, когда он только недавно инфицировался туберкулезом, задолго до появления клинических симптомов.

Казалось бы, метод ПЦР-диагностики содержит в себе только плюсы, но это не так.

Минусы ПЦР-диагностики

Минусы этого метода исследования тоже существенны. При выборе метода исследования туберкулеза это также стоит учитывать:

  • Это дорогостоящий метод исследования. Для проведения ПЦР-диагностики нужна специально-оборудованная лаборатория. Оборудование для таких исследований стоит очень дорого, и не во всякой лаборатории оно имеется. В крайнем случае, можно обратиться в платную лабораторию.
  • Сразу же после проведенного лечения метод ПЦР применять не рекомендуется. В крови пациента некоторое время сохраняется небольшое количество живых и мертвых микобактерий. Если провести анализ в этот период, он покажет ложноположительный результат.
  • При мутациях микобактерий, анализ будет недостоверным, так как нормальная ДНК не сможет синтезироваться.
  • Для ПЦР-исследования имеет значение правильный выбор биологической жидкости на анализ.
  • Сверхчувствительность. Это тот случай, когда достоинство метода становится его недостатком. Если при проведении анализа в биологический материал каким-то образом попадет даже единичный фрагмент чужеродного ДНК, то ПЦР его размножит, и будет получен ложный результат.

Где пройти ПЦР-исследование на туберкулез

ПЦР-лаборатория имеется только в крупных противотуберкулезных диспансерах и диагностических центрах.

Объясняется это высокой стоимостью оборудования и высокими требованиями к содержанию лаборатории (реактивы, обработка).

Медицинские чиновники не сильно переживают из-за отсутствия ПЦР-лаборатории в каком-то конкретном населенном пункте, поскольку анализы на туберкулёз можно провести другими методами (культивирование микобактерий, микроскопическое исследование).

Если в населённом пункте нет бесплатной ПЦР-лаборатории, пациент по желанию может обратиться в платное учреждение.

В последнее время ПЦР-диагностика занимает все более прочные позиции в диагностике туберкулеза и других заболеваний, отодвигая на задний план другие методы диагностики.

что это такое, выявление туберкулёза с её помощью

Туберкулёз — специфическая инфекция, его очаг может находиться в тканях человека годами, а после чего распространиться в течение нескольких месяцев. Это хроническое заболевание, оптимальные схемы лечения которого сложно подобрать. Одна из причин этого — запоздавшая диагностика, когда микобактерии, находясь в организме человека, уже адаптировались ко многим препаратам.

Какие современные методы постановки диагноза существуют? ПЦР диагностика — что это такое? Как проводится это исследование? В каких случаях туберкулёз диагностируется этим методом и в чём его суть?

Что такое ПЦР диагностика

Это один из самых современных методов диагностики не только заболеваний, но и обнаружения биологического материала. ПЦР диагностика была изобретена относительно недавно. Около 30 лет назад в 1983 году американский биохимик Кэри Бэнкс Муллис предложил сложную схему восстановления биологического материала микроорганизмов по одному краткому сегменту. Благодаря своему открытию учёный был удостоен наивысшей награды — Нобелевской премии.

Что это такое — ПЦР диагностика инфекций? Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это диагностика выявления вирусных заболеваний, основанная на методах генной инженерии. Она широко применяется в медицинской микробиологии, иммунологии и вирусологии. Метод универсальный и помогает поставить диагноз при малом количестве материала. Выявить инфекцию можно буквально в первые часы заражения ею, задолго до того, как проявятся первые симптомы заболевания.

Суть метода заключается в получении из материала от больного человека не самого возбудителя, а фрагментов генома (частиц ДНК), его биосинтезе с последующим определением к какому классу микроорганизмов принадлежит полученный генетический материал с помощью молекулярно-генетических методов.

Несмотря на то что это сложный процесс, он занимает намного меньше времени, чем многие биологические способы обнаружения возбудителей инфекций. В течение всего нескольких часов с помощью ПЦР удаётся обнаружить микроорганизм. Для этого нет необходимости выделять его из среды (крови, спинномозговой жидкости, мокроты) и долго выращивать на искусственных питательных средах. Достаточно чтобы в исследуемом материале присутствовал небольшой фрагмент нити ДНК возбудителя инфекции.

В основе реакции лежит возможность в искусственных условиях (в пробирке) создать синтез молекул нуклеиновых кислот возбудителя инфекции.

Что необходимо для проведения ПЦР?

  1. Праймеры — участки ДНК, с которых и начинается биосинтез или создание.
  2. Нуклеотиды или сложные соединения, которые являются основой молекулы ДНК либо РНК.
  3. Полимеразная цепная реакция невозможна без присутствия полимеразы, которая представляет собой фермент ускоряющий ход ПЦР.

Этапы ПЦР диагностики

Как проводится молекулярная диагностика методом ПЦР? Процедура несложная и занимает короткий промежуток времени с учётом сбора материала.

  1. Перед началом исследования берут необходимый биологический материал — это промывные воды бронхов, кровь, желудочное содержимое, мокрота. Тип биологического материала зависит от предполагаемого возбудителя.
  2. Денатурация или разрушение первичной структуры ДНК, которая состоит из двух цепочек. Суть этого этапа — разъединить две цепи под воздействием высокой температуры (максимальная — 98 ºC, которая действует не более двух минут).
  3. На следующей стадии ПЦР, под названием — отжиг, температуру снижают на несколько градусов, чтобы праймер связался с нитью ДНК.
  4. Элонгация, в процессе которой происходит непосредственно синтез нужных молекул.

В результате всего 25–30 таких циклов получают нужное количество копий ДНК микроорганизмов, которые легко распознать.

Нужна ли ПЦР диагностика туберкулёза

Нет возможности абсолютно всем людям с подозрением на туберкулёз проводить ПЦР, так как метод требует наличия дорогостоящего оборудования. Не все государственные поликлиники могут себе позволить купить его. Кроме этого, так сложилось, что привычные методы диагностики инфекции в большинстве случаев тоже себя оправдывают.

К ним относятся:

  • опрос пациента, сбор анамнеза;
  • полноценный осмотр человека;
  • исследование с помощью туберкулиновой пробы Манту;
  • рентгенография или флюорография;
  • компьютерная диагностика при необходимости;
  • микробиологические методы исследования: микроскопия мазка и бактериологическое исследование мокроты.

ПЦР на туберкулёз проводится в особых случаях, когда сложно поставить диагноз или нет возможности провести другие инструментальные методы.

Несмотря на изобилие способов диагностики заболеваемость туберкулёзом продолжает расти. В настоящее время отмечается не только её рост, но и другие особенности:

  • болезнь часто протекает в тяжёлой форме;
  • повышается количество летальных случаев;
  • всё чаще диагностируются устойчивые к современным химиопрепаратам формы заболевания.

Нежелание самих людей ежегодно проходить обычные профосмотры, отказ от вакцинации приводит к распространению туберкулёза. В таких условиях нужны быстрые, информативные и эффективные методы исследования, которые должны быть доступны для детей и взрослых. Все вышеперечисленные методы диагностики во многом уступают ПЦР.

Преимущества диагностики туберкулёза с помощью ПЦР

Это исследование хоть и новое, но хорошо себя зарекомендовало, особенно в спорных случаях, когда диагноз поставить невозможно по ряду причин.

Благодаря ПЦР намного легче обнаружить в исследуемом материале ДНК возбудителя туберкулёза.

Преимущества ПЦР диагностики в следующем.

  1. Это быстрый анализ. По небольшому фрагменту молекулы ДНК можно установить диагноз всего за несколько часов (около пяти), что успешно используется в экстренных ситуациях, когда, например, перед операцией нужно установить не болен ли человек туберкулёзом.
  2. Анализ ПЦР допускается в случае, когда другие методы недоступны или запрещены (для обнаружения туберкулёза лёгких иногда приходится сделать несколько рентгенографических снимков, что составит большую дозу облучения).
  3. С помощью ПЦР проводится исследование любой биологической среды на присутствие в ней возбудителя. К примеру, можно провести исследование спинномозговой жидкости, если есть подозрение на туберкулёзный менингит.
  4. Разрешена ПЦР диагностика инфекционных заболеваний в детском возрасте, так как метод безопасен.
  5. Позволяет выявить возбудителя на любой стадии развития болезни.
  6. Высокая чувствительность ПЦР позволяет обнаружить микобактерии туберкулёза, даже если в биологическом материале всего несколько микроорганизмов.
  7. Хорошо его проводить для диагностики рецидива заболевания.

После всего прочитанного ПЦР кажется практически идеальным методом диагностики, который должны делать всем с подозрением на туберкулёз. Но и здесь есть свои минусы, их необходимо учитывать.

Недостатки ПЦР при диагностике туберкулёза

В наше время такая диагностика скорее редкость, чем закономерность. И для этого есть основания.

  1. Это дорогой метод исследования. Во многих поликлиниках оборудование для проведения ПЦР отсутствует из-за высокой его стоимости, но в платных лабораториях анализ всё-таки можно сделать.
  2. Сразу после проведённого лечения мёртвые микобактерии или живые в незначительном количестве могут ещё присутствовать в организме человека (при проведении ПЦР диагностики результат будет положительным), поэтому в это время метод будет недостоверным, проводить его нет смысла.
  3. Мутации микобактерий приводят к неэффективности ПЦР — не может синтезироваться нормальная последовательность нити ДНК.
  4. Нужно правильно выбирать среду для исследования, кровь берут только при подозрении на её заражение (сепсис), нет необходимости брать мокроту если под вопросом стоит туберкулёз органов нервной системы. В таком случае ПЦР не сможет обнаружить возбудителя и диагностика будет неинформативной.

Показания для выявления туберкулёза с помощью ПЦР анализа

ПЦР диагностика туберкулёза проводится чаще всего в спорных случаях. Когда врачи направляют на это исследование?

  1. Если сложно поставить диагноз обычными доступными методами, но был контакт с больным туберкулёзом.
  2. В случае, когда человека невозможно доставить на исследование в поликлинику для прохождения рутинных привычных исследований на туберкулёз, его легче обследовать с помощью ПЦР, так как мокроту для исследования можно доставить в баночке, а диагноз подтверждается в течение нескольких часов.
  3. Если человеку предстоит экстренная операция и нужно срочно выяснить болен ли он туберкулёзом.
  4. При необходимости беременную женщину тоже лучше обследовать на туберкулёз с помощью ПЦР, так как метод безопасен.
  5. На платной основе диагностику может пройти каждый, у кого туберкулёз не был подтверждён с помощью бактериологических методов и рентгеноскопии. Такое бывает, когда очаг в лёгких незаметен на прямом снимке, а человек при сдаче мокроты на исследование не смог соблюсти рекомендации по правильному забору материала. При этом человека беспокоят все симптомы, характерные для туберкулёза лёгких.
  6. Когда есть сомнения в результатах пробы Манту.
  7. Предпочтительнее делать ПЦР диагностику туберкулёза у детей. Процедура безопасна, не создаёт дополнительную лучевую нагрузку, эффективна в отношении обнаружения сложных для диагностики форм заболевания.

Своевременная диагностика туберкулёза — это залог правильно назначенного лечения и снижения распространения заболевания. Часто знакомые методы выявления болезни не всегда эффективны. Поэтому ПЦР на сегодня является одним из самых достоверных и безопасных способов обнаружения инфекции на ранних этапах её развития.

какие сдавать, методы диагностики, где можно сдать





Микроскопия мазка подразумевает поиск возбудителя туберкулеза в отделяемой при кашле жидкости — мокроте.

Подробнее...


Метод ИФА подходит в качестве уточняющего шага, а также для диагностики скрыто протекающего и внелегочного туберкулеза.

Узнать цены...


Метод ПЦР позволяет обнаружить туберкулез даже тогда, когда все другие методики показывают отрицательный результат.

ПЦР: что это такое?


Эксперты констатируют: туберкулез в России — больше, чем просто болезнь. Это — неприятное социальное клеймо, которое, помимо физических страданий, становится для заболевшего человека источником серьезного психологического дискомфорта, а иногда и вынуждает на долгие месяцы и годы отказаться от привычного образа жизни, карьеры и планов на будущее.

Лечение туберкулеза — процесс сложный и длительный, а успех во многом определяется тем, насколько своевременно было выявлено заболевание. С учетом того, что никто из нас не застрахован от заражения, крайне важно регулярно проходить профилактическое скрининговое обследование, а при малейших подозрениях на недуг — обращаться к уточняющим анализам. Лишь такое ответственное поведение убережет вас от беды.


Когда сдать анализы на туберкулез и почему не стоит с этим медлить

По мнению обывателей, туберкулезом страдают лишь неблагополучные люди, проживающие на грани нищеты, а также выходцы из мест лишения свободы. Однако такой взгляд, как отмечают врачи, не имеет ничего общего с реальностью. Пациентами фтизиатров нередко становятся и учителя, и бизнесмены, и чиновники, и даже сами доктора. Ведь ключевой фактор, приводящий к развитию заболевания, — это отнюдь не финансовое благополучие, а состояние иммунитета. Если по каким-то причинам (стресс, сопутствующее заболевание, беременность, перенесенная операция, погрешности в питании) организм ослаблен — туберкулезная палочка не упустит шанса для атаки.

Важно знать
По статистике в России ежегодно туберкулез выявляют более чем у 80-ти тысяч человек. Каждый третий заболевший погибает от этой болезни. При этом важно понимать, что 90% жителей уже инфицированы — то есть в их легких живет возбудитель заболевания. Но сильный иммунитет не дает болезни развиться, поэтому лишь 1% инфицированных столкнется с какими-либо симптомами туберкулеза.

Болезнь развивается постепенно, начинаясь в лимфатических узлах, а затем распространяясь по органам и тканям организма. Чаще туберкулез поражает легкие, однако в некоторых случаях, а также при отсутствии лечения бактерии размножаются в пищеварительном тракте, органах мочеполовой системы, костях, коже, оболочках головного и спинного мозга и даже в глазах.

Коварная особенность возбудителя заболевания — микобактерии туберкулеза — умение быстро приобретать устойчивость к антибактериальным препаратам, без которых невозможно успешное лечение. Ученые вынуждены разрабатывать все новые и новые лекарства, что в конечном итоге делает терапию дорогой, а также приводит к неизбежным побочным эффектам, таким как поражение печени. Поэтому важным этапом диагностики туберкулеза является определение чувствительности выявленного возбудителя к различным антибиотикам, это помогает врачам подобрать эффективное лечение.

В силу широкого распространения туберкулеза в нашей стране (70% от общего числа российских больных инфекционными и паразитарными заболеваниями умирают именно из-за такого диагноза) выявление зараженных микобактериями среди детей и взрослых организовано достаточно хорошо.

Так, детям и подросткам до 18-ти лет время от времени проводят туберкулиновые пробы, знакомые нам всем как реакция Манту. После достижения совершеннолетия основным методом диагностики становится флюорография, которую каждый гражданин РФ обязан проходить раз в два года, а определенные категории людей — каждый год. Без такого рентгеновского снимка вас, скорее всего, не допустят к работе: результаты флюорографии необходимо предъявлять при трудоустройстве, а в дальнейшем — повторять процедуру в ходе регулярных медосмотров. Таким образом медики стараются минимизировать количество больных туберкулезом, которые не получают лечение и заражают окружающих.

Помимо этих правил, провериться на туберкулез нужно в случаях, если у вас появились симптомы, указывающие на вероятность развития заболевания (слабость, ночное потоотделение, необъяснимая потеря веса, небольшое повышение температуры по вечерам, увеличение лимфоузлов, хронический кашель). Иногда догадка о возможной причине такого недомогания возникает у врача, но вы и сами можете пройти обследование и сдать анализы, чтобы исключить вероятность инфекции.

Какие анализы сдают на выявление микобактерии туберкулеза

Выявить туберкулез можно несколькими путями. Основной задачей диагностики в детском возрасте является определение самого факта инфицирования, ведь в этот период вероятность, что бактерия, попавшая в организм, сразу вызовет патологический процесс, значительно выше, чем у взрослых. По этой причине ведущей методикой первичного скрининга остается туберкулиновая проба.

Оценить признаки поражения легких — наиболее типичное клиническое свидетельство начала заболевания — позволяет флюорография. В случае сомнений для уточняющей диагностики врач назначит рентген — развернутую визуализацию легочной ткани.

Лабораторные анализы крови и мочи помогают «поймать» возбудителя туберкулеза или зафиксировать следы его присутствия в организме. Их назначают для окончательного установления диагноза, а также в целях уточнения степени тяжести заболевания и чувствительности микобактерии к антибиотикам.

Туберкулиновая проба-тест

Туберкулин — это смесь белков, выделенных из погибших возбудителей туберкулеза. Введение небольшого количества такого препарата под кожу вызывает реакцию иммунитета у всех людей, однако в зависимости от состояния их здоровья она проявится по-разному. Так, у пациентов, в организме которых отсутствует микобактерия туберкулеза, через двое суток после пробы останется лишь незначительный след от укола (или его не будет вовсе). Если же размер красной отметины в месте введения туберкулина больше сантиметра или в этой области на коже появился гнойник — высока вероятность, что человек заражен.

Напомним, реакция Манту — метод первичной диагностики, он не может со 100%-ной вероятностью ответить на вопрос, болен ли человек туберкулезом, но позволяет выделить группу риска, которой предстоит пройти дополнительные обследования.

Аппаратные методы диагностики

Поскольку степень инфицирования населения в России микобактериями туберкулеза очень высока, у лиц старше 18-ти лет врачи по умолчанию допускают контакт с инфекцией. Задачей становится поиск больных со скрыто протекающей инфекцией, которые не знают о своем состоянии.

  • Флюорография
    Оптимальным методом массовой диагностики в этом случае была и остается флюорография. Это — фотоснимок экрана рентгеновского аппарата, который можно получить очень быстро, не подвергая при этом человека значительной лучевой нагрузке. Поэтому кабинеты флюорографии есть практически во всех населенных пунктах нашей страны, а пройти процедуру можно за считанные минуты.
  • Рентген и КТ
    В случае если человек не предъявляет никаких жалоб на самочувствие, а флюорография не выявила признаков изменения легочной ткани, врачи делают заключение, что туберкулеза у пациента нет. Но для более тщательной проверки легких может быть назначено развернутое рентгенографическое исследование (когда снимки делаются не только в прямой, но и в боковой проекции, а специалист лучевой диагностики тщательно изучает каждый сантиметр изображения), а также компьютерная томография (КТ), позволяющая с наибольшей степенью достоверности выявить визуальные признаки туберкулеза и оценить степень распространения патологического процесса.

Типы лабораторных анализов на туберкулез

Некоторые из лабораторных анализов, назначаемых при подозрении на туберкулез, являются специфическими — они проводятся только при этом заболевании. Другие же вы можете пройти в рамках общего медицинского осмотра: это ценный источник информации о вашем состоянии здоровья, который способен указать на наличие инфекционного процесса.

  • Общий анализ крови/мочи является диагностическим стандартом при самых разных патологиях. В случае с туберкулезом исследование крови покажет повышение уровня лейкоцитов (сдвиг лейкоцитарной формулы влево) и ускоренную скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Изменения в анализе мочи будут наблюдаться при поражении микобактериями почек и мочевыводящих путей — в этом случае в образце обнаружатся признаки амилоидоза.
  • Микроскопия мазка подразумевает поиск возбудителя туберкулеза в отделяемой при кашле жидкости — мокроте. Пациенты с подозрением на заболевание особым образом собирают мокроту в стерильную банку, после чего доставляют анализ в лабораторию. Там частицы мокроты переносят на предметное стекло и окрашивают методом по Цилю-Нильсену (при этом микобактерии туберкулеза приобретают хорошо различимый под микроскопом красный цвет, а большинство остальных микроорганизмов — синий).
  • Классический культуральный метод. Если в ходе микроскопии лаборант выявил в мокроте микобактерии в достаточном количестве (более 5-ти в поле зрения), то следующим этапом лабораторной диагностики туберкулеза становится бактериологический посев образца в питательную среду. Будучи помещенными в оптимальные температурные условия, микроорганизмы быстро растут, что позволяет уточнить их вид и провести оценку чувствительности к различным типам антибиотиков.
  • ИФА (метод иммуноферментного анализа) обнаруживает в крови у пациента антитела к туберкулезу, что указывает на инфицированность (но не обязательно на заболевание). Данный метод подходит в качестве уточняющего шага, а также для диагностики скрыто протекающего и внелегочного туберкулеза.
  • ПЦР (метод полимеразной цепной реакции) выявляет ДНК микобактерий в различных средах — в сыворотке крови, моче, мокроте, спинномозговой жидкости и так далее. Это крайне точный метод, который с достоверностью в 100% может дать ответ на вопрос о том, присутствует ли возбудитель в конкретном органе человека. Чувствительность ПЦР так высока, что в некоторых случаях этот анализ позволяет обнаружить туберкулез даже тогда, когда все другие методики показывают отрицательный результат.
  • Гистологические анализы (биопсия) подразумевают изъятие маленького фрагмента ткани из тела пациента с целью его обстоятельного микроскопического изучения. Биопсия является важным методом диагностики, особенно в ситуациях, когда исследовать биологические жидкости при помощи других анализов не представляется возможным (например, в случае вялотекущего туберкулеза костей).

Диагностика туберкулеза — сложная и крайне ответственная задача, но благодаря развитию современных медицинских технологий получить точную информацию о состоянии здоровья и ответ на вопрос «болею ли я туберкулезом?» — стало доступно каждому. При наличии малейших подозрений на инфекцию — не откладывайте визит к врачу, ведь от вашей сознательности зависит не только прогноз заболевания — но и благополучие окружающих.

Анализ на пцр туберкулез - диагностика

Анализ крови по ПЦР-методике на туберкулез – современная диагностика выявления абсолютно всех штаммов инфекционного заболевания и их очагов в биоматериале организма человека.

Анализ крови и мочи методикой ПЦР на туберкулез – является фактически обязательным исследованием скрытого проистекания заболевания, передающегося не только воздушно-капельным путем, но и посредством контакта с насекомыми. Туберкулез представляет собой достаточно специфическое инфекционное заболевание, очаг которого в тканях любого человека может находиться на протяжении многих лет, а выход распространения найти в течение нескольких недель. Именно потому сдавать анализы крови либо мочи на выявление туберкулеза стоит наряду с основными исследованиями.

Содержание статьи

Современный метод постановки диагноза: ПЦР-диагностика

Подобрать оптимальные варианты лечения туберкулеза довольно сложно. Основная причина затруднительного излечивания состоит в поздних сроках обнаружения инфекционного заражения. Диагностика ПЦР методикой представляет собой современный способ выявления очагов микобактерий в мизерном составе, когда сама болезнь еще не подала признаки присутствия. То есть до первых симптомов проявления туберкулеза, а особо до достижения состояния переносчика, допустимо диагностировать и излечить инфекцию.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) методика исследования лабораторным способом определения ДНК микобактерий, основанная на генетик-биологическом материале. В основе действия стоит особый фермент – полимераза, отвечающая за синтез молекул ДНК.

Применение полимеразы в исследовательских целях на небольших фрагментах биологического материала, выявляет ДНК бактерий существующих в минимальных количествах. Размножение ДНК молекул дает необходимый объем материала для исследований и определения типа бактерий, и ее функциональную принадлежность к определенному штамму туберкулеза.

Диагностика туберкулеза посредством полимеразной цепной реакции выдает фактически 100% результаты, что относит методику к наиболее достоверным способам выявления заболеваний бактериального и инфекционного типа. Не исключено, что в будущем пробу Манту и другие методы диагностирования для определения микобактерии туберкулеза, полностью сменит ПЦР-методика.

Примечательно, что анализ ПЦР является достаточно специфичным. Поясняется фактор тем, что при исследовании биологического материала на признак туберкулеза, диагностика вполне может выявить и другие типы инфекций, либо опровергает наличие таковых в легких.

Необходимость в диагностике методом ПЦР

Симптоматика проистекания такого заболевания, как туберкулез, весьма спорна. Например, у детей болезнь протекает без особых явных симптомов, как и в случае заражением иного рода бактериальной инфекцией. По сути, треть всего населения проживающего на планете заражены туберкулезом и являются носителями инфекции.

Существует несколько форм заболеваний:

  • первичная – является ранней стадией;
  • латентная – скрытая форма болезни, не является заразной;
  • активная – заразная открытая форма заболевания;
  • вторичная – имеет свойство распространяться через кровь по всему организму.

Специалисты не дают направление на ПЦР на туберкулез абсолютно всем пациентам, что проходят обследования. Причина тому дороговизна оборудования для поликлиник государственного значения, и высокая стоимость анализа в частных лабораториях.

При условии, что выявлены симптомы:

  • продуктивного кашля, особо сильно проявляющегося в утреннее время;
  • выделения мокроты во время кашля зеленоватого либо желтоватого оттенка;
  • в процессе прогрессирования туберкулеза, в мокроте начинают появляться прожилки и сгустки крови.

Вышеперечисленные симптомы определенно указывают на присутствие в организме инфекции в открытой форме проистекания, которая требует незамедлительного лечения. Закрытая форма туберкулеза не имеет определенных симптомов на ранней стадии развития, тем не менее, существует ряд отличительных особенностей в самочувствии:

  • ночное отделение пота;
  • плохой аппетит;
  • общий упадок сил;
  • ощутимая потеря веса;
  • в целом ощущение слабости и недомогания.

До назначения ПЦР диагностики, специалист может дать направления на анализы привычных исследований заболевания, которые так же оправдывают себя при постановке диагноза:

  • осмотр и прослушивание пациента;
  • сбор анамнеза, опрос;
  • флюорография либо рентгенография;
  • лабораторные исследования – бактериологический посев мокроты, анализ мочи, микроскопия мазка, общий анализ венозной крови;
  • компьютерная диагностика.

ПЦР методика исследует инфекционные поражения туберкулезной палочкой легких фактически во всех биологических материалах человека.

Диагностика проводится фактически с фрагментами любого типа:

  • венозной кровью либо с пальца;
  • со сбором мочи;
  • с выделениями мочеполовой системы;
  • калом;
  • мокротами;
  • соскобами с любых органов;
  • спинномозговой жидкостью;
  • околоплодными водами при беременности.

На диагностирование методикой полимеразной цепной реакцией может направить специализированный медик с таких сфер, как терапевт, фтизиатр, педиатр, пульмонолог, венеролог, гинеколог, и прочие.

Расшифровка результатов ПЦР на туберкулез

Оглавление: [скрыть]

  • Что такое ПЦР диагностика
  • Ответственность перед сдачей анализов
  • Процесс сбора анализов
  • Как расшифровываются результаты

В последнее время ПЦР на туберкулез считается наиболее точным анализом, хотя и существуют другие методы. Данное заболевание набирает обороты, поэтому специалисты стараются изобрести новые технологии по выявлению палочки Коха в организме. Всем известно, что туберкулез является инфекционной болезнью, которая может передаваться как воздушно-капельным путем, так и через насекомых и т.д. поэтому крайне важно проводить периодические обследования.

Что такое ПЦР диагностика

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет всего в течение нескольких часов обнаружить возбудителя инфекции, причем выявить можно даже 1-2 молекулы среди огромного количества. Данный тест имеет массу достоинств, которые проявляются в следующем:

  • 100%-ное выявление, так как в биологической пробе определяется от 10 до 100 клеток;
  • специфичность ДНК МБТ является очень высокой;
  • скорость анализ имеет от 4 до 4,5 часа;
  • диагностика туберкулеза легких, что практически нереально для других методов;
  • выявляется особенный фрагмент, который имеется только в конкретном возбудителе.

С помощью этой диагностики можно своевременно не только обнаружить инфекцию, но и изолировать человека и назначить ему соответствующее лечение. Особенно это касается туберкулеза, потому что точное расположение палочки Коха выявить проблематично. Кроме того, данный анализ способен исследовать устойчивость микобактерий к определенному медицинскому препарату, тем самым определяется метод лечения. Чтобы провести полимеразную цепную реакцию на устойчивость, используют гены, запоминающие невосприимчивость к некоторым лекарствам, после чего через двое суток можно получить результат. Это благотворно сказывается на профилактике заболевания.

Вернуться к оглавлению

Ответственность перед сдачей анализов

Следует отметить, что ПЦР выявляет возбудителей не только туберкулезной палочки, но и многих других заболеваний и даже ВИЧ. Анализ проводится с любой биологической жидкостью. Это могут быть:

  • кровь;
  • моча;
  • кал;
  • выделения половых органов;
  • мокрота;
  • жидкость спинномозговая;
  • соскоб со всех органов.

Собранный материал помещается в специальный амплификатор, то есть реактор, где находятся некоторые ферменты, благодаря которым идет цепная реакция по удвоению ДНК инфекции. После этого производится расшифровка. Результат, как правило, бывает либо положительный, либо отрицательный.

Назначается диагностика туберкулеза в тех случаях, когда, во-первых, существуют основные симптомы болезни, во-вторых, человек очень длительное время болеет острыми заболеваниями дыхательных путей и, в-третьих, люди контактируют с больными туберкулезом. Но врач может провести данный анализ и при наличии сомнительных снимков после рентгенологического обследования.

На полимеразную цепную реакцию могут направить такие специалисты, как пульмонолог, фтизиатр, терапевт, а детей — педиатр. Конечно, есть правила, которые необходимо соблюдать пациенту перед сдачей, например, крови на туберкулез. Прежде всего, нельзя употреблять пищу за 4-5 часов до сдачи, а за сутки до этого нужно исключить из своего рациона жирные и аллергенные продукты. Также желательно не использовать антибиотики и личные средства гигиены в виде гелей.

Вернуться к оглавлению

Процесс сбора анализов

Но не только больной обязан соблюдать необходимые условия. То же относится и к врачам. Чтобы забор анализов на туберкулез был проведен правильно, нужно делать это только в стерильных условиях, иначе в жидкую среду могут попасть другие микроорганизмы, следовательно, интерпретация будет неверной. Все инструменты, приборы и контейнеры тоже должны быть в стерильном виде.

Итак, материал собирается в специальные контейнеры, которые при необходимости специалист дает пациенту. Например, моча собирается только первая после пробуждения человека утром. Но при этом необходимо провести утренние водные процедуры в соответствующих местах. Мочи для сбора достаточно от 20 до 30 мл. А вот синовиальную жидкость из спинного мозга и прочие сложные анализы берет только высококвалифицированный специалист, находящийся в стационарных условиях.

У женской половины человечества мазок берет только гинеколог на специализированном кресле, а у мужчин соскоб или мазок забирается из мочеиспускательного канала (из наружной части). Из зева мазок берет врач специальной лопаткой или другими инструментами. Кровь берется непосредственно из вены стерильными шприцами.

На последнем этапе сбора доктор с учетом всех требований транспортировки и хранения направляет образец в специальную лабораторию для дальнейшего исследования. Для этого персонал лаборатории помещает кровь или прочие мазки в пробирку, в которую заблаговременно добавлено вещество, препятствующее преждевременному старению образца.

В случае с кровью, что особенно важно, данное вещество не позволяет ей свернуться, следовательно, наличие сгустков исключено. Пробирки при этом не встряхиваются, так как можно повредить состояние эритроцитов. Это все нужно для того, чтобы легче и быстрее было определить все компоненты крови.

Потом кровь на туберкулез центрифугируют, чем отделяют от плазмы клеточный осадок, который и изучается под микроскопом. Изучив первоначальные данные, добавляют фермент (транскриптазу) и при определенном температурном режиме проводят следующую цепную реакцию. Благодаря этому образуются фрагменты генетического материала, которые и подвергаются расшифровке.

Вернуться к оглавлению

Как расшифровываются результаты

Не всегда анализ бывает правдивым. Ложноположительный результат бывает только в том случае, если не соблюдены все требования по подготовке и сдаче мазков и т.д. Именно поэтому следует как пациенту, так и врачам строго придерживаться всех правил, о которых говорилось выше.

Расшифровка может быть как простой, так и сложной. К первой относится определение «отрицательно» или «положительно», что свидетельствует о том, что при отрицательной расшифровке пациенту не о чем беспокоиться, т.к. инфекций не обнаружено.

При положительных результатах простой формы количество содержащихся возбудителей является ничтожно малым. Дело в том, что в медицине существуют определенные нормы, благодаря которым можно определить степень устойчивости к заболеваниям.

Но в сложной расшифровке теста определяется конкретное содержание тех или иных микроорганизмов, что позволяет сделать самые точные выводы. Естественно, ни один пациент не сможет самостоятельно расшифровать все эти цифры, а врач способен подробно объяснить больному.

Именно эти цифры показывают, где расположены очаги, на какой стадии находятся и что является причиной возникновения заболевания туберкулезом.

На основании расшифровки специалисты назначают метод лечения и пр. Никогда не стоит забывать о том, что малейшее наличие возбудителей свидетельствует об их присутствии в организме. Поэтому рано или поздно инфекция может распространиться дальше и стадия туберкулеза увеличится. Не следует безответственно относиться к собственному здоровью, всегда следуйте рекомендациям специалистов.

ПЦР диагностика при туберкулезе легких у детей и взрослых: что это такое и как проводиться?

Полимеразно-цепная реакция (ПЦР) представляет собой современный и эффективный метод диагностики многих заболеваний, в том числе и туберкулеза. Такая процедура позволяет достаточно быстро определить возбудителей различных заболеваний. В итоге ПЦР на туберкулез помогает пациенту и его лечащему врачу своевременно начать терапию выявленной патологии.

  • Как проводится сама ПЦР-диагностика
  • К кому обратиться за проведением анализа?
  • Кому проводится?
  • Основные минусы

Методика исследования

ПЦР-диагностика туберкулеза потребует предварительного забора материала. В качестве него подойдут следующие биологические жидкости:

  • кровь,
  • моча,
  • кал,
  • мокрота,
  • соскоб с любых органов,
  • выделения половых органов,
  • спинномозговая жидкость.

При этом от того, какой именно материал был взят для исследования, будет зависеть достоверность полученного результата. Чаще всего такой анализ на туберкулез предполагает забор крови, мочи или мокроты у пациента. При этом наиболее достоверный результат можно получить в тех случаях, когда в качестве материала выступает мокрота.

Что касается крови и мочи пациента, то, несмотря на достаточно высокую частоту использования именно таких материалов, эффективность и актуальность выявления микобактерии туберкулеза данным способом является сомнительной.

Дело в том, что в таких биологических средах инфекция данного типа появляется либо при сепсисе, либо при диссеминированном туберкулезе. При локальных формах, которые встречаются значительно чаще в анализе крови и мочи могут отсутствовать какие бы то ни было изменения.

Как проводится сама ПЦР-диагностика

Для проведения подобного метода исследования необходимо сначала взять тот или иной материал. После этого он попадает в специальную камеру, называемую амплификатором. Названа она таким образом по той причине, что именно здесь происходит удвоение цепи ДНК, позволяющее в дальнейшем вынести положительный или отрицательный результат.

В амплификаторе находятся все необходимые ферменты для того, чтобы обеспечить возможность удвоения молекул ДНК. В дальнейшем оценивается их количество. Таким методом устанавливается факт наличия или отсутствия возбудителя туберкулеза.

Современные аппараты не только выполняют полимеразную цепную реакцию, но также и выдают результаты проведенного обследования. В дальнейшем их расшифровкой занимается врач-фтизиатр. Пациент должен прийти к данному специалисту с выпиской, в которой указаны результаты проведенного исследования.

При этом доктор пользуется следующей системой оценки:

  • менее 0,9 относительных единиц говорят об отрицательном результате,
  • от 0,9 до 1,1 относительных единиц свидетельствуют о сомнительном результате,
  • более 1,1 относительных единиц говорят о положительном результате исследования, то есть о наличии туберкулеза.

В результате доктор получает возможность достаточно легко определить наличие или отсутствие возбудителя заболевания в исследуемом материале.

К кому обратиться за проведением анализа?

В настоящее время есть сразу несколько специалистов, которые могут назначать подобный вариант исследования.

Основными среди них являются следующие врачи:

  • пульмонолог,
  • фтизиатр,
  • терапевт,
  • педиатр.

Несмотря на то, что назначить ПЦР для диагностики туберкулеза может каждый из этих специалистов, однако оценить результаты такого анализа и установить окончательный диагноз может только врач-фтизиатр.

Помимо этого, он назначит необходимый курс лечения, установит, где именно он должен проходить (на дому или в специализированном стационаре), а также предоставит пациенту все необходимые рекомендации по изменению образа жизни.

Преимущества и недостатки методики

ПЦР-анализ на туберкулез обладает целым рядом плюсов, которые привлекают, как пациентов, так и врачей-специалистов. Основными среди них являются следующие:

  1. Анализ обеспечивает практически 100% выявление возбудителя заболевания в собранном биологическом материале. Для того чтобы аппарат выдал положительный результат, достаточно наличие всего 10-100 клеток микобактерии туберкулеза.
  2. Результат после того, как выполнен анализ крови или мокроты, будет готов уже спустя 4-5 ч. Другие методики определения наличия микобактерии туберкулеза в биологических средах могут потребовать ожидания от нескольких недель до 1 месяца.
  3. Низкий риск ложного результата. Это обусловлено достаточно высокой специфичностью ДНК, которой обладает возбудитель туберкулеза.
  4. Появляется возможность выявить ДНК микобактерии при туберкулезе легких. При помощи прочих лабораторных методов исследования добиться подобных результатов практически невозможно.

Еще одним огромным преимуществом, которое предоставляет именно такой диагностический процесс, является возможность определения устойчивости бактерий к тем или иным антибиотиками. В результате, подобный анализ крови или мокроты позволяет установить, к каким именно медикаментозным препаратам наиболее чувствительна микобактерия туберкулеза.

В конечном итоге, можно достаточно быстро не только установить сам факт наличия заболевания, но также и назначить максимально эффективный курс лечения. Результатом станет значительно меньшее количество осложнений у пациентов.

При этом такой вариант исследования позволяет установить подобную устойчивость всего-навсего за 2 дня. Прочие варианты обследования не предоставляют таких же возможностей. Срок установления восприимчивости к определенным антибактериальным лекарственным средствам, если берется обычный анализ крови, может достигать 1 месяца.

Кому проводится?

ПЦР туберкулеза хорош еще и тем, что может проводиться у следующих групп пациентов:

  • У детей,
  • У пациентов с иммунодефицитом.

Диагностика туберкулеза у детей при помощи данного метода исследования используется достаточно часто. При этом намного чаще для этих целей проводится именно анализ крови, а не мокроты. Это обусловлено тем, что далеко не всегда ребенок, особенно маленький, способен в точности выполнить указания специалиста для того, чтобы получить достаточное количество мокроты из дыхательной системы.

При острой необходимости для получения подобного биологического материала можно провести бронхоскопию. Ребенок, как, впрочем, и взрослый, достаточно тяжело переносит подобный вариант исследования, поэтому его проводят только в исключительных случаях.

Для пациентов с иммунодефицитом подобный вариант исследования является основным методом исследования. Это обусловлено тем, что ИФА-диагностика для данной группы лиц является малоинформативной.

Связано такое положение с тем, что у них значительно уменьшена выраженность иммунного ответа на проникновение инфекции. Кровь подобных пациентов содержит сравнительно небольшое количество антител. Кроме этого, детям с ослабленным иммунитетом не рекомендуется проводить обследование с использованием реакции Манту. ПЦР-диагностика для них становится отличным выходом из сложной ситуации.

Основные минусы

Помимо несомненных преимуществ, у подобного метода исследования имеются и свои недостатки. Основными среди них являются следующие:

  • если кровь не содержит ДНК микобактерии туберкулезис, то это абсолютно не свидетельствует об отсутствии заболевания,
  • при локальных формах туберкулеза при помощи полимеразной цепной реакции установить наличие ДНК в любых биологических средах обычно не удается,
  • на ранних стадиях болезни ДНК микобактерии туберкулезис в различных биологических средах обычно отсутствуют.

В результате, применимым данное исследование может быть для лиц с иммунодефицитом или же в случаях с пациентами, которые находятся в тяжелом состоянии. Кроме этого, особенно ценной полимеразно-цепная реакция становится в диагностике туберкулеза легких для детей, которым противопоказаны другие методы диагностики. В остальных случаях его проведение обязательно должно дополняться другими методами.

Загрузка...

ПЦР на туберкулез — Диагностика и анализ крови на туберкулез, советы врачей

Анализ ПЦР на туберкулез является самым популярным среди медицинских исследований в области данного заболевания.

Но как предупредить себя и своих близких от этого страшного заболевания? Как правильно сдать необходимые анализы на ПЦР?

Симптомы туберкулеза и его профилактика

Специалисты утверждает, что туберкулезом страдают около 30% всего населения.

Самый высокий процент заболевания развит в малоразвитых странах. Это чаще всего происходит в результате пониженного иммунитета у человека.

Заболевание является одним из самых старых. Эта болезнь может находиться в оболочки мозга, в пищевом тракте, на суставах и позвоночнике, в мочевыделительной системе и небольшими участками на коже человека.

Специалисты легче всего определяют пораженную болезнью кожу. На участке возникают небольшие уплотнения, которые со временем увеличиваются в размере, прорываются наружу вместе с беловатой жидкостью.

Возбудитель туберкулеза чаще всего можно подцепить при разговоре с больным человеком, при его кашле или чихании. Обычно заболевание протекает без симптомов или имеет открытую форму, но ПЦР диагностика туберкулеза дает возможность выявить его на ранних этапах и в экстренных случаях.

Симптомы заболевания: продолжительный мокрый кашель, лихорадка, озноб, обильное потоотделение по ночам, резкая потеря в весе, чувство усталости и слабости.

Открытая форма заболевания является самой опасной. Человек, болеющий туберкулезом способен заразить здоровых людей.

Самым главным признаком болезни легких является кровохарканье. Оно возникает при любой форме заболевания.

В некоторых ситуациях это может перейти в кровотечение легких человека. Это очень опасно и требует срочное медицинское вмешательство.

Для профилактики и распознавания туберкулеза специалисты назначают: пробу – тест туберкулина, экспертизу биологического материала, флюорографию, рентген и анализ крови, мокроты или слюны.

Диагностирование заболевания

Усовершенствованная диагностика заболевания – это правильное и во время начатое лечение. В большинстве случаев привычные методы обнаружения возбудителей болезни не всегда имеют эффект и к тому уже устарели.

Самым главным способом определения и диагностирования заболевания легких является медицинское исследование анализов. Обычно пользуются диагностикой ПЦР.  Данное обследование было открыто совсем недавно, в 1983 году американским биохимиком Муллисом.

Тест у больного при туберкулезе легких выполняют исключительно в особых случаях, когда тяжело установить диагноз или невозможно провести инструментальным способом обнаружение заболевания.

Полимеразная цепная реакция является надежным методом ПЦР. Данный анализ дает возможность определить возбудителя, сколько его находиться в крови, моче и жидкости спинного мозга. Такое медицинское обследование является самым безопасным.

Анализ ПЦР дает 100% результат.

Он имеет высокую чувствительность, что помогает распознать заболевание впервые часы после заражения, до того, как появятся симптомы болезни. Такой способ анализа дает результат уже через несколько часов, после сдачи биологического материала. Посев этого анализа выполняют три раза, но аспирацию больного желудка проводят только в больнице.

Для определения результатов разработано три критерия: высокая точность, чувствительность до 90%, специфичность.

Тест на ПЦР применяют в некоторых случаях:

  1. для диагностирования туберкулеза в легких;
  2. определения источника заболевания;
  3. определение внелегочной локализации;
  4. диагностирование рецидивов.

Оценить результат, и назначит правильное медицинское лечение, может только специалист. Очень важно, для назначения правильной схемы медицинского лечения при обнаружении туберкулеза, нужно провести тест на чувствительность возбудителя к противотуберкулезным аппаратам.

Разновидность медицинских анализов на туберкулез

Сдать необходимый анализ можно двумя способами: взять кровь или слюну у человека или произвести забор мокроты.

Анализ крови методом ПЦР может быть двух видов: ИФА и ПЦР. Такое исследование помогает следить за эффективностью медицинского лечения.

Иммуноферментный анализ крови помогает найти в организме человека антитела противостоящие микробам туберкулеза. Такое исследование проводиться один раз в течение суток. Главный минус – это его низкая чувствительность, что позволяет определить только заболевание с низким уровнем зараженностью.

Самым популярным и эффективным исследованием является анализ на микобактерии туберкулеза. С помощью нее врачи легко могут найти ДНК бактерий в крови человека. Такой метод используют так же и для определения количества бактерий, для контроля над лечением пациента, для выявления раннего рецидива.

ПЦР слюны является одним из самых современных способов исследования. Такой анализ поможет выявить в слюне инфекционные бактерии. С помощью ПЦР увеличивают число фрагментов ДНК вредных микробов.

Культуральный метод предназначен для обследования мокроты человека, для обнаружения микробактерий.

Подготовка к сдаче анализов на ПЦР

Внимание, нужна правильная подготовка слюны к ПЦР. Если не соблюдать все предписания, то анализ может быть ложноположительным.

Перед сдачей анализа за 12 часов запрещается курить, принимать пищу и лекарства, а так же употреблять алкоголь. Запрещено чистить зубы, нельзя пользоваться ополаскивателем, освежителем для рта и зубной нитью.

Запрещено пользоваться губной помадой и вступать в интимные отношения. Разрешено ополаскивать рот простой кипяченой водой;

Данное обследование поможет выявить: герпес, хламидии, туберкулез, возбудители пневмонии, онковирусы, бароллеоз, мононуклеоз, ВИЧ, гепатит всех видов, краснуху.

Анализ на микобактерии в основном проводят в спорных случаях, а именно если тяжело поставить диагноз или был контакт с больным туберкулеза, перед началом операции, для обнаружения заболевания. Используют для обследования беременной женщине, так как такой метод самый безопасный для матери и плода.

Иногда анализ выполняют в частной клинике, так как пациент не придерживался правил для сдачи анализа, но при этом его беспокоят все симптомы. Анализ могут выполнить, когда специалисты не уверены после проведения пробы Манту или пациентом является ребенок.

Преимущества и недостатки медицинских анализов для определения туберкулеза

ПЦР является самым востребованным и эффективным способом определения заболевания.

Его самое большое отличие от других исследований – это быстрый и точный результат.

Плюсом этого медицинского обследования является то, что его можно проводить для урологических, гинекологических, онкологических, инфекционных, гематологических, пульмонологических, гастроэнтерологических и других исследований.

Главным преимуществом такого медицинского исследования является, что анализ крови, мокроты и слюны готовы в короткие сроки (для выявления заболевания потребуется от 5 часов). Такое медицинское обследование позволяет провести анализы, когда под запретом или недоступные некоторые способы изучения болезни. Отлично подходит для выявления рецидива у человека

Благодаря такому анализу появилась возможность проведения исследований для любой биологической среды. Он разрешен для взятия материала у детей. ПЦР дает возможность выявить возбудителя на любом этапе заболевания. Благодаря его высокой чувствительности, можно найти микробы даже если присутствует всего несколько бактерий.

Метод ПЦР расширяет свои возможности. Его так же используют для определения отцовства, для изготовления новых генов, мутаций, для скрещивания элементов ДНК и так далее.

Недостатки данного исследования — это дорогостоящий способ обследования.

После медицинского лечения анализ крови может показать присутствие живых или мертвых возбудителей в небольших количествах, после проведения медицинского обследования, он даст положительный результат.

Бактерии и микробы могут подвергнуться мутации, после чего ПЦР не сможет их определить и выявить, поэтому только специалист может назначить исследование необходимой среды, иначе такое медицинское обследование будет безрезультатным.

После сдачи анализов бывает отрицательный результат, но это никак не исключает возможность человека быть зараженным туберкулезом. Такое медицинское обследование проводят для больных с тяжелой стадией заболевания легких, когда любые другие исследования не дают точных результатов. ПЦР будет полезна для людей с легочным и внелегочным туберкулезом.

К сожалению, медицинское оборудование для выявления возбудителей туберкулеза очень дорого стоит.

Государственные больницы и поликлиники не могут его себе этого позволить, но платные клиники принимают анализы пациентов и в короткие сроки предоставляют готовый результат.

вакцинация — панацея или смерть » ПЦР диагностика туберкулёза

09.09.2016  

Туберкулёз — специфическая инфекция, его очаг может находиться в тканях человека годами, а после чего распространиться в течение нескольких месяцев. Это хроническое заболевание, оптимальные схемы лечения которого сложно подобрать. Одна из причин этого — запоздавшая диагностика, когда микобактерии, находясь в организме человека, уже адаптировались ко многим препаратам.

Какие современные методы постановки диагноза существуют? ПЦР диагностика — что это такое? Как проводится это исследование? В каких случаях туберкулёз диагностируется этим методом и в чём его суть?

Что такое ПЦР диагностика

Это один из самых современных методов диагностики не только заболеваний, но и обнаружения биологического материала. ПЦР диагностика была изобретена относительно недавно. Около 30 лет назад в 1983 году американский биохимик Кэри Бэнкс Муллис предложил сложную схему восстановления биологического материала микроорганизмов по одному краткому сегменту. Благодаря своему открытию учёный был удостоен наивысшей награды — Нобелевской премии.

Что это такое — ПЦР диагностика инфекций? Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это диагностика выявления вирусных заболеваний, основанная на методах генной инженерии. Она широко применяется в медицинской микробиологии, иммунологии и вирусологии. Метод универсальный и помогает поставить диагноз при малом количестве материала. Выявить инфекцию можно буквально в первые часы заражения ею, задолго до того, как проявятся первые симптомы заболевания.

Суть метода заключается в получении из материала от больного человека не самого возбудителя, а фрагментов генома (частиц ДНК), его биосинтезе с последующим определением к какому классу микроорганизмов принадлежит полученный генетический материал с помощью молекулярно-генетических методов.

Несмотря на то что это сложный процесс, он занимает намного меньше времени, чем многие биологические способы обнаружения возбудителей инфекций. В течение всего нескольких часов с помощью ПЦР удаётся обнаружить микроорганизм. Для этого нет необходимости выделять его из среды (крови, спинномозговой жидкости, мокроты) и долго выращивать на искусственных питательных средах. Достаточно чтобы в исследуемом материале присутствовал небольшой фрагмент нити ДНК возбудителя инфекции.

В основе реакции лежит возможность в искусственных условиях (в пробирке) создать синтез молекул нуклеиновых кислот возбудителя инфекции.

Что необходимо для проведения ПЦР?

  1. Праймеры — участки ДНК, с которых и начинается биосинтез или создание.
  2. Нуклеотиды или сложные соединения, которые являются основой молекулы ДНК либо РНК.
  3. Полимеразная цепная реакция невозможна без присутствия полимеразы, которая представляет собой фермент ускоряющий ход ПЦР.

Этапы ПЦР диагностики

Как проводится молекулярная диагностика методом ПЦР? Процедура несложная и занимает короткий промежуток времени с учётом сбора материала.

  1. Перед началом исследования берут необходимый биологический материал — это промывные воды бронхов, кровь, желудочное содержимое, мокрота. Тип биологического материала зависит от предполагаемого возбудителя.
  2. Денатурация или разрушение первичной структуры ДНК, которая состоит из двух цепочек. Суть этого этапа — разъединить две цепи под воздействием высокой температуры (максимальная — 98 ºC, которая действует не более двух минут).
  3. На следующей стадии ПЦР, под названием — отжиг, температуру снижают на несколько градусов, чтобы праймер связался с нитью ДНК.
  4. Элонгация, в процессе которой происходит непосредственно синтез нужных молекул.

В результате всего 25–30 таких циклов получают нужное количество копий ДНК микроорганизмов, которые легко распознать.

Для плеера требуется установить Flash Player

Нужна ли ПЦР диагностика туберкулёза

Нет возможности абсолютно всем людям с подозрением на туберкулёз проводить ПЦР, так как метод требует наличия дорогостоящего оборудования. Не все государственные поликлиники могут себе позволить купить его. Кроме этого, так сложилось, что привычные методы диагностики инфекции в большинстве случаев тоже себя оправдывают.

К ним относятся:

  • опрос пациента, сбор анамнеза;
  • полноценный осмотр человека;
  • исследование с помощью туберкулиновой пробы Манту;
  • рентгенография или флюорография;
  • компьютерная диагностика при необходимости;
  • микробиологические методы исследования: микроскопия мазка и бактериологическое исследование мокроты.

ПЦР на туберкулёз проводится в особых случаях, когда сложно поставить диагноз или нет возможности провести другие инструментальные методы.

Несмотря на изобилие способов диагностики заболеваемость туберкулёзом продолжает расти. В настоящее время отмечается не только её рост, но и другие особенности:

  • болезнь часто протекает в тяжёлой форме;
  • повышается количество летальных случаев;
  • всё чаще диагностируются устойчивые к современным химиопрепаратам формы заболевания.

Нежелание самих людей ежегодно проходить обычные профосмотры, отказ от вакцинации приводит к распространению туберкулёза. В таких условиях нужны быстрые, информативные и эффективные методы исследования, которые должны быть доступны для детей и взрослых. Все вышеперечисленные методы диагностики во многом уступают ПЦР.

Преимущества диагностики туберкулёза с помощью ПЦР

Это исследование хоть и новое, но хорошо себя зарекомендовало, особенно в спорных случаях, когда диагноз поставить невозможно по ряду причин.

Благодаря ПЦР намного легче обнаружить в исследуемом материале ДНК возбудителя туберкулёза.

Преимущества ПЦР диагностики в следующем.

  1. Это быстрый анализ. По небольшому фрагменту молекулы ДНК можно установить диагноз всего за несколько часов (около пяти), что успешно используется в экстренных ситуациях, когда, например, перед операцией нужно установить не болен ли человек туберкулёзом.
  2. Анализ ПЦР допускается в случае, когда другие методы недоступны или запрещены (для обнаружения туберкулёза лёгких иногда приходится сделать несколько рентгенографических снимков, что составит большую дозу облучения).
  3. С помощью ПЦР проводится исследование любой биологической среды на присутствие в ней возбудителя. К примеру, можно провести исследование спинномозговой жидкости, если есть подозрение на туберкулёзный менингит.
  4. Разрешена ПЦР диагностика инфекционных заболеваний в детском возрасте, так как метод безопасен.
  5. Позволяет выявить возбудителя на любой стадии развития болезни.
  6. Высокая чувствительность ПЦР позволяет обнаружить микобактерии туберкулёза, даже если в биологическом материале всего несколько микроорганизмов.
  7. Хорошо его проводить для диагностики рецидива заболевания.

После всего прочитанного ПЦР кажется практически идеальным методом диагностики, который должны делать всем с подозрением на туберкулёз. Но и здесь есть свои минусы, их необходимо учитывать.

В наше время такая диагностика скорее редкость, чем закономерность. И для этого есть основания.

  1. Это дорогой метод исследования. Во многих поликлиниках оборудование для проведения ПЦР отсутствует из-за высокой его стоимости, но в платных лабораториях анализ всё-таки можно сделать.
  2. Сразу после проведённого лечения мёртвые микобактерии или живые в незначительном количестве могут ещё присутствовать в организме человека (при проведении ПЦР диагностики результат будет положительным), поэтому в это время метод будет недостоверным, проводить его нет смысла.
  3. Мутации микобактерий приводят к неэффективности ПЦР — не может синтезироваться нормальная последовательность нити ДНК.
  4. Нужно правильно выбирать среду для исследования, кровь берут только при подозрении на её заражение (сепсис), нет необходимости брать мокроту если под вопросом стоит туберкулёз органов нервной системы. В таком случае ПЦР не сможет обнаружить возбудителя и диагностика будет неинформативной.

Показания для выявления туберкулёза с помощью ПЦР анализа

ПЦР диагностика туберкулёза проводится чаще всего в спорных случаях. Когда врачи направляют на это исследование?

  1. Если сложно поставить диагноз обычными доступными методами, но был контакт с больным туберкулёзом.
  2. В случае, когда человека невозможно доставить на исследование в поликлинику для прохождения рутинных привычных исследований на туберкулёз, его легче обследовать с помощью ПЦР, так как мокроту для исследования можно доставить в баночке, а диагноз подтверждается в течение нескольких часов.
  3. Если человеку предстоит экстренная операция и нужно срочно выяснить болен ли он туберкулёзом.
  4. При необходимости беременную женщину тоже лучше обследовать на туберкулёз с помощью ПЦР, так как метод безопасен.
  5. На платной основе диагностику может пройти каждый, у кого туберкулёз не был подтверждён с помощью бактериологических методов и рентгеноскопии. Такое бывает, когда очаг в лёгких незаметен на прямом снимке, а человек при сдаче мокроты на исследование не смог соблюсти рекомендации по правильному забору материала. При этом человека беспокоят все симптомы, характерные для туберкулёза лёгких.
  6. Когда есть сомнения в результатах пробы Манту.
  7. Предпочтительнее делать ПЦР диагностику туберкулёза у детей. Процедура безопасна, не создаёт дополнительную лучевую нагрузку, эффективна в отношении обнаружения сложных для диагностики форм заболевания.

Своевременная диагностика туберкулёза — это залог правильно назначенного лечения и снижения распространения заболевания. Часто знакомые методы выявления болезни не всегда эффективны. Поэтому ПЦР на сегодня является одним из самых достоверных и безопасных способов обнаружения инфекции на ранних этапах её развития.

Для плеера требуется установить Flash Player

Рубрики: видео, инструкции, Манту
Метки: вакцина, вирус, врачи, ДНК, исследование, отказ, ПЦР, рак, рентген, симптомы, туберкулин, флюорография 
Комментариев нет

Добавить комментарий

Микобактерии туберкулеза, определение ДНК (Mycobacterium tuberculosis, DNA) в сыворотке крови

Метод определения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».

Исследуемый материал Сыворотка крови

Доступен выезд на дом

Определение ДНК возбудителей туберкулеза, комплекса микобактерий: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Туберкулёз (от лат. tuberculum — бугорок) – распространённое, социально зависимое заболевание человека. Болеют им и животные. Возбудитель туберкулёза открыт Р. Кохом в 1882 г. Это кислотоустойчивые аэробные бактерии (74 вида) рода Мycobacterium, широко распространённые в почве, воде и у животных. У человека чаще всего возбудителем является Mycobacterium tuberculosis. Второй по частоте является Mycobacterium bovis. Оба вида очень устойчивы ко многим факторам внешней среды, а в организме очень долго остаются жизнеспособными и могут вызвать заболевание через многие годы после заражения. Очень важно, что микобактерии туберкулёза могут образовывать так называемые L-формы. Сохраняясь в организме, они создают противотуберкулёзный иммунитет.

Длительное время туберкулёз может протекать скрыто и обнаруживаться случайно, хотя нередко уже проявляются такие симптомы, как слабость, быстрая утомляемость, субфебрильная температура, ночная потливость, а в крови – анемия и лейкопения. В настоящее время, несмотря на все достижения антимикробной терапии, туберкулёз угрожает будущему нации. Поэтому все методы диагностики, особенно его латентных форм являются крайне важными.

Существует много методов лабораторной диагностики туберкулёза: микроскопия мазка (чаще всего для этого используют мокроту), классический культуральный метод, ИФА. Всем им присущи достоинства, но и определённые недостатки, в частности, обнаружение микобактерий только в случае их достаточного количества.

В последние годы для диагностики используют полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Её высокая чувствительность позволяет обнаружить в исследуемом материале единичные клетки и даже их фрагменты ДНК. Метод исключает перекрёстные реакции и специфичность достигает 100%. ПЦР позволяет дифференцировать ограниченные и диссеминированные формы туберкулёза, особенно у детей даже при отрицательных результатах микробиологических исследований.

Аналитические показатели:

  • определяемый фрагмент - специфичные участки ДНК микобактерий;
  • специфичность определения - 100%;
  • чувствительность определения- 100 копий ДНК микобактерий в образце.

Литература

  1. Макаревич А.Э. Заболевания органов дыхания – М. Высшая школа, 2000. – 368 с.
  2. Jacobs D. et al. Laboratory test handbook/ Lexi-Comp./2002 - pр. 828 - 829.

Что представляет собой анализ ПЦР для диагностики туберкулёза

Инновационный метод выявления микроорганизмов, в конце прошлого столетия изобретенный ученым Кэри Муллисом – анализ ПЦР. Он получил за свои труды Нобелевскую премию. Полностью этот процесс имеет название полимеразой цепной реакции. Он заключается в восстановлении типа микроорганизма в предоставленном биоматериале по коротким фрагментам ДНК. Это позволяет выявить инфицирование на ранней стадии и сразу начать лечение, не доводя до появления серьезных симптомов и осложнений.

В чем заключается анализ

Диагностика методом ПЦР заключается в получении сегментов патогенной ДНК из биологического материала и выстраивание их в правильную цепочку. Это позволяет идентифицировать микроорганизм, которому принадлежат клетки.

Процедура проводится в три этапа:

  1. Сбор биологического материала.
  2. Выявление и выстраивание ДНК.
  3. Распознавание инфекции.

Для этого исследования требуется специальное медицинское оборудование – амплификатор. Он оснащен камерой, где исследуемый материал взаимодействует с высокой температурой и химическими ферментами. На выходе лаборант имеет длинную цепочку ДНК возбудителя болезни, если таковой имеется в организме человека.

Как подготовиться к диагностике

Анализ ПЦР – это сложный генно-инженерный процесс, требующий аккуратности и серьезного отношения, как от лаборантов, так и от пациентов. Большую роль в корректности результатов анализа играет подготовка к процедуре, то есть правильный сбор материала.

Основными источниками для получения информации о болезни являются:

  • кровь,
  • мокрота,
  • моча.

Могут использоваться и другие варианты, жидкости при необходимости берутся на анализ из разных органов.

Для пациента предусмотрены определенные правила, которые нужно выполнять перед процедурой. Если предстоит анализ крови, то запрещается за 8 часов до сбора:

  • употреблять пищу,
  • курить,
  • пить алкогольные напитки,
  • принимать внутрь лекарственные средства.

Вечером перед сбором мокроты выпивается препарат для ее разжижения и облегчения отхаркивания. Утром собрать материал после тщательных гигиенических процедур полости рта.

Моча собирается в стерильную баночку утром натощак, после подмывания, до приема каких-либо медикаментов.

Если человек принимает антибиотики, то проведение анализа полимеразной цепной реакции следует отложить, иначе результат ПЦР не является достоверным. Сдавать мокроту или кровь следует спустя две недели после окончания курса лечения.

Как происходит процесс выявления бактерий

Если описать кратко, то процесс заключается в выделении части ДНК. Применение современных методов генной инженерии позволяет определить вид микроорганизма. Причем материала для анализа нужно небольшое количество.

Технически это очень сложная процедура, но она занимает меньше времени, чем классические бактериологические исследования. Возбудителей не нужно выделять из биоматериала, нет нужды растить их в течение нескольких недель. В день сдачи пациент уже может узнать результат своего анализа.

Весь процесс ПЦР протекает поэтапно:

  1. Ведется работа с первичной формой ДНК, которая при высокой температуре, близкой к 100 градусам, делится на две цепочки.
  2. Температура понижается, нити соединяются с фрагментами нуклеиновой кислоты – праймером.
  3. Происходит элонгация – синтез молекулярной структуры.

Весь сеанс состоит примерно из тридцати таких процедур, повторяющихся циклом как цепная реакция. Это необходимо для создания того количества клеток, при котором полученные бактерии станут распознаваемы.

Заключение по итогам исследования

Описание результата ПЦР (полимеразной цепной реакции) дает фтизиатр, она бывает простой или развернутой. В первом случае описание будет содержать только информацию о наличии или отсутствии палочки Коха. Если расшифровка подробная, из нее можно узнать степень распространения болезни, ее очаг. По этим критериям можно определить наиболее подходящее лечение туберкулеза в каждом случае.

Анализ полимеразой цепной реакции не различает живых и мертвых возбудителей, а говорит только об их наличии. Поэтому имеет смысл сдавать повторный тест на туберкулез только через 3-4 недели после прохождения назначенной врачом терапии.

Если результат положительный, на заключении ставится надпись «Mycobacterium tuberculosis». При отрицательном результате, рядом с биологическим названием бактерии есть пометка «не обнаружены». Анализы могут оказаться ложноположительными. Такое происходит редко – при нарушении техники выполнения исследований ПЦР или при наличии нежизнеспособных микроорганизмов. Окончательный вывод о заболевании может сделать только врач-фтизиатр.

Преимущества метода

ПЦР-диагностика туберкулеза завоевала популярность по многим причинам. Она имеет массу достоинств, среди которых:

  1. Точность исследования. При проведении анализа с соблюдением технологии удается выявить бактерии, даже если они присутствуют в малом количестве.
  2. Быстрый результат. Весь процесс от сбора материала до готового заключения занимает около 5 часов. Если сравнить с посевом, его приходится ждать до нескольких недель.
  3. Полная безопасность для человека, в отличие от флюорографии с ее облучением.
  4. Используется любой жидкий биоматериал. Для осуществления ПЦР при туберкулезе легких наиболее точную информацию дает мокрота, при туберкулезном менингите берется образец из спинного мозга. Анализ крови помогает выявить местные очаги инфекции.
  5. Проверяется чувствительность бактерий к антибиотикам. Это позволяет назначить правильное лечение.
  6. Ранняя диагностика. Узнать о наличии заболевания можно до появления ее симптомов.

Кроме положительных моментов есть и недостатки. Главный из них – это цена. Анализ ПЦР не из дешевых, что связано с использованием дорогого оборудования. Еще один минус – необходимость выжидать время для проведения повторного теста после курса лечения от туберкулеза. Иногда результат проверки получается ложноположительным. Такое бывает из-за мутации бактерий.

В каких случаях ПЦР необходим

ПЦР на туберкулез легких не имеет противопоказаний и абсолютно безопасен. Поэтому есть определенные ситуации и заболевания, когда это единственная возможность исследования.

К ним относятся:

  • беременность,
  • контакт с туберкулезным больным,
  • трудности в определении диагноза при заболевании легких,
  • обследование перед операцией,
  • аллергическая реакция,
  • ВИЧ-инфекция,
  • малолетний возраст.

Воспользоваться методом ПЦР можно по направлению, которое выдается в фтизиатрии, а также педиатром, терапевтом или пульмонологом.

Чем можно заменить ПЦР-диагностику туберкулеза

Другие виды обследования не изжили себя, а продолжают использоваться. Их применяют в тех случаях, когда нет возможности выполнить ПЦР на туберкулез. К тому же современный метод неидеален, иногда его показатели подвергаются сомнению и требуют перепроверки.

Определить наличие туберкулеза у человека помогают следующие способы:

  • туберкулинодиагностика (Манту),
  • флюорография,
  • тестирование биологического материала на флору,
  • рентген легких.

Эти исследования являются бесплатными и доступными для каждого. Но у них есть свои недостатки:

  • Тест на туберкулез вызывает аллергию. Противопоказан при заболеваниях кожи.
  • Рентгенологические исследования сопровождаются облучением, что неприменимо к детям, людям с иммунодефицитом и беременным женщинам.
  • Бактериологические анализы занимают гораздо большее количество времени, результата можно ждать до месяца.

Альтернативные варианты не являются гарантией стопроцентно правильного заключения. Они чаще всего используются в профилактических целях. Диагностирование туберкулеза методом ПЦР дает наиболее достоверную информацию. Если есть возможность, то лучше воспользоваться именно им.

Особенности туберкулеза у детей и необходимость ПЦР

Ребенка следует особенно оберегать от заболевания – туберкулезная инфекция может нанести серьезный вред организму с еще не совсем сформировавшимся иммунитетом.

После попадания палочки Коха в детский организм развитие заболевания проходит такие стадии:

  • Латентная. Продолжается до года, не выдавая себя никакими симптомами.
  • Интоксикация. Сказывается на общем состоянии здоровья. Появляется слабость, апатия, отсутствие аппетита, сонливость и снижение работоспособности. Постоянно немного повышена температура.
  • Первичная форма заболевания. Туберкулез локализуется, образуя очаг заболевания. У ребенка возникает кашель, одышка, головная боль, увеличение лимфоузлов.
  • Туберкулезный бронхоаденит. Симптомами являются боль в лопатках, кашель с разной тональностью звука, хрипы.

Обычно для выявления инфекции под кожу ребенка вводится туберкулин. Если к этому виду обследования имеются противопоказания, то ПЦР на туберкулез – незаменимый вариант для диагностики. Дети обычно сдают анализ крови, но при необходимости собирается и мокрота. При малейшем подозрении на наличие туберкулез проводятся дополнительные исследования, чтобы убедиться в положительном результате и сразу начать лечение на ранней стадии, не допуская развития болезни.

Современные методы исследования всегда быстрее и надежнее. Жаль, что из-за дорого оборудования сделать такие анализы есть возможность не во всех медицинских учреждениях и населенных пунктах. Каким способом провести обследование обычно выбирает врач, но и у пациента есть право выбора. Если вам приходилось сдавать анализ ПЦР, расскажите об этом в комментариях. Если статья оказалась для вас полезной, поделитесь ей в соцсетях – возможно, она поможет вашим друзьям.

что это такое за диагностика, возможно ли такое исследование крови, мочи и мокроты вместо Манту, расшифровка результатов теста

Редактор

Мария Богатырева

Врач высшей категории, преподаватель

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это молекулярно-генетическое исследование биологического материала, которое позволяет выявить ДНК возбудителя в образце.

ПЦР диагностика туберкулеза является одним из самых точных методов верификации заболевания. С его помощью можно не только выявить наличие в организме возбудителя, но и определить его типовую принадлежность. Также метод ценен для определения латентных форм болезни.

Данная статья содержит информацию о сути методики, показаниях, подготовке к исследованию и расшифровке результатов.

Показания для диагностики

Несмотря на свои очевидные преимущества (быстрота выполнения, точность) ПЦР анализ крови и других биологических жидкостей не является скрининговым методом. Причина этого – высокая стоимость исследования. Кроме того, некоторые лаборатории не имеют необходимых для проведения теста реактивов и оборудования. Поэтому проводить ПЦР на туберкулез вместо пробы Манту или рентгенографии органов грудной клетки нецелесообразно.

Выделяют следующие показания для проведения исследования:

  • длительный контакт с лицом, у которого достоверно выявлен туберкулез;
  • беременность;
  • аллергические реакции на туберкулин;
  • ВИЧ-инфекция или СПИД;
  • невозможность верифицировать заболевание другими лабораторными способами (при наличии клинических признаков туберкулеза).

ПЦР является информативным, точным и безопасным методом. Особенно это актуально в случае, когда проведение стандартной диагностики противопоказано (беременность, повышенная чувствительность к туберкулину).

Помимо прочего, исследование помогает дифференцировать туберкулезные и нетуберкулезные микобактерии. Также ПЦР определяет устойчивость возбудителя болезни к различным лекарственным препаратам. В процессе исследования оценивается структура ДНК, определяются мутации, ответственные за возникновение резистентности к лечению.

Материалы, используемые для исследования

Для ПЦР диагностики могут быть использованы любые биологические жидкости.

Чаще всего исследуются:

  • кровь;
  • слюна;
  • мокрота;
  • моча;
  • спинномозговая жидкость;
  • выделения из половых путей;
  • промывные воды желудка или бронхов.

Выбор материала зависит от формы заболевания. При подозрении на легочный туберкулез  проводится ПЦР-исследование мокроты или крови. Плевральный выпот используют для установления микобактериальной природы плевритов. Для верификации менингита, вызванного палочками Коха, применяют исследование спинномозговой жидкости. При наличии признаков поражения мочеполовой системы проводится ПЦР мочи на туберкулез.

Объем биологической жидкости зависит от ее вида. Крови требуется 8-10 мл. Для исследования мочи необходимо 50-70 мл жидкости. Для анализа мокроты берется от 10 до 20 мл бронхиальных выделений.

Проблемой ПЦР диагностики является большое количество ложноположительных результатов. Это связано с нарушением правил сбора материала и доставки его в лабораторию. Микобактерии распространены повсеместно, поэтому при нарушении санитарных норм возможна контаминация (смешение, загрязнение) образцов флоры.

Материал должен собираться в стерильную тару. Делать это нужно в специальном помещении. Важно исключить контакт контейнера или пробирки с окружающими предметами. Сразу после завершения сбора материала необходимо герметично закрыть емкость и поместить ее в холодильную установку.

Транспортировка образцов осуществляется в течение нескольких часов. Для улучшения условий хранения и доставки допустимо использование консервантов и антикоагулянтов (для крови).

Подготовка пациента

Для получения достоверных данных важна правильная подготовка к исследованию. Анализ крови сдается утром, натощак. Моча также должна быть собрана утром, в стерильный контейнер, после гигиенических процедур.

Для проведения исследования мокроты необходимо достаточное ее количество. Поэтому допустимо назначение отхаркивающих препаратов.

Памятка по сбору мокроты

Перед исследованием выделений из половых путей необходимо несколько дней воздерживаться от половых контактов. Недопустимо проведение спринцевания в этот период.

Имеют значение и медикаменты, которые употребляет пациент. Некоторые из них могут исказить результаты анализа. Перед проведением исследования необходимо обсудить правила приема и режим дозирования лекарств с врачом.

Расшифровка результатов теста

Расшифровка результатов ПЦР исследования осуществляется в течение нескольких часов. Обнаружение ДНК возбудителя в материале говорит о наличии инфекции в организме. Однако судить об активности процесса, исходя из этих данных, нельзя (исключение составляет проведение количественной ПЦР).

Если следы микобактерий в образце не обнаруживаются, можно говорить об отсутствии инфекции. В отличии от положительного, отрицательный результат следует считать надежным.

Высокая чувствительность и специфичность метода позволяет обнаружить генетический материал микобактерий даже при его низком содержании в образце.

ПЦР анализ расшифровывается автоматически. Это стало возможным благодаря введению в практику ПЦР-анализаторов. С их помощью проводится большое количество исследований в короткие сроки.

Полезное видео

ПЦР: что это такое и как устроено в этом видео:

Заключение

На сегодняшний день ПЦР является самым достоверным способом установления инфицирования туберкулезом. Исследование помогает не только выявить заболевание и провести дифференциальную диагностику, но и подобрать эффективную схему лечения. Недостаточная распространенность метода объясняется его дороговизной, необходимостью специфического оснащения и высокой долей ложноположительных результатов.


Смотрите также