Кукурбитацин что это такое

Если предпочитаете пользоваться возможностями современной селекции, купите семена, искусственно лишенные генетической горечи. На упаковках обычно есть пометка «негорький гибрид».

Что делать с горькими огурцами

• Так как кукурбитацин накапливается в основном в кожуре, снизите горечь, если очистите овощи. Затем разрежьте вдоль, посолите половинки и потрите друг о друга. Такие плоды можно съесть свежими или использовать для салата.
• Горечь уходит, если ненадолго замочить огурцы в молоке с добавлением небольшого количества сахара.
• Кукурбитацин нейтрализует тепловая обработка. Вымочите горькие овощи в теплой воде. Правда, это отразится на их вкусе и упругости.
• Горькие огурцы пригодны для заготовок на зиму: маринования, салатов. Горечь уходит при стерилизации.
• Из сока горьких огурцов готовят эффективные косметические средства для ухода за проблемной и жирной кожей — спиртовые лосьоны.

Полезные свойства кукурбитацина

Мало кто знает, что кукурбитацин, делающий огурцы, баклажаны и другие бахчевые горькими, столетиями применяется в китайской и индийской медицине. Целители используют листья горьких растений в качестве рвотного и слабительного при отравлениях. Также кукурбитацин улучшает работу печени и поджелудочной железы.

Американские ученые заключили, что кукурбитацин способен блокировать сигнальные пути, используемые раковыми клетками для развития. Благодаря чему рост опухоли останавливается, в некоторых случаях погибают и уже существующие злокачественные клетки.

Взяв пример с китайцев, некоторые наши огородники стали специально выращивать горькие огурцы на отдельном участке, чтобы использовать в лечебных целях.

Надеемся, статья вам понравилась. Пожалуйста, поделитесь ею с друзьями!

Понравилось?! Поделись с друзьями!

Кукурбитацин что это такое — Паразиты человека

Вещество с названием кукурбитацин содержится в огурцах. Эти овощи, как в сыром, так и в соленом виде употребляют в пищу многие люди. А вот о пользе и вреде кукурбитацина знают далеко не все. Знать же подобную информацию необходимо, ведь это одно из основных веществ, которое содержится в огурцах.

Чем полезен кукурбитацин?

Наибольшее количество кукурбитацина содержит такой вид огурцов как корнишоны. Именно в них концентрация этого вещества наиболее велика. Но, прежде чем покупать и готовить салаты из корнишонов, давайте рассмотрим, чем полезны эти овощи и кукурбитацин.

Кукурбинацин помогает нашему организму уничтожать атипичные клетки, то есть те, которые потенциально могут привести к образованию злокачественной опухоли. Защита от онкологических заболеваний – вот главная польза от употребления кукурбитацина. Всасываясь в желудке, он защищает наш кишечник и другие органы от образования злокачественных опухолей. Поэтому, употреблять огурцы в пищу необходимо.

Наибольшее количество этого вещества содержат свежие, не подвергшиеся консервированию или термической обработке овощи. Хотя маринованные или соленые огурцы также содержат кукурбитацин, поэтому полностью исключать их не стоит.

Что еще содержат огурцы?

Кроме уже упомянутого вещества, эти овощи содержат и другие витамины. Однако назвать содержание этих витаминов высоким нельзя. В огурцах слишком много воды, так что они скорее пригодятся не как средство от авитаминоза, а скорее, как средство, выводящее лишнюю жидкость из организма.

Из-за высокого содержания воды, эти овощи помогают нам избежать обезвоживания, проблем с запорами, помогают при цистите. Главное достоинство огурцов в том, что они практически не вызывают аллергию, разрешены при любой диете, помогают очищать кишечник. Именно поэтому, их можно без опаски употреблять в пищу и тем, кто хочет похудеть, и детям.

Source: womanadvice.ru

Почитайте еще:

Волшебные огурцы! - Yul Ivanchey — ЖЖ

О сколько нам открытий чудных

Готовят просвещенья дух

И опыт, сын ошибок трудных,

И гений, парадоксов друг,

И случай, бог изобретатель…

А. С. Пушкин

Боже мой, в наших руках (скорее, наших тарелках) находятся поистине волшебные вещества, которые мы едим каждый день, совершенно не подозревая об этом.

Помните, как совсем недавно все дружно смеялись над доктором Поповым, который советовал засовывать надкушенный огурец, сами знаете куда. Но так ли он был не прав?

Несколько лет назад, учёными было обнаружено новое вещество, назвали которое кукурбитацин.

Семейство тыквенных

Трихозант змеевидный

Дикий огурец

Кукурбитацин содержится, в основном, в семействе тыквенных: переступень белый, бешенный (дикий) огурец, трихозант змеевидный, сициос угловатый, колоцинт, и ещё в некоторых других растениях — элеокарпусе (Elaeocarpus hainanensis), иберийке горькой, авране лекарственном.

И…. В обыкновенных огурцах, тех самых, которые мы едим!

О них сегодня и пойдёт речь.

Огурец – обладатель замечательных свойств, многие из которых широко известны. На 95-97% он состоит из структурированной воды, которая лучше обыкновенной, усваивается в организме. Он содержит огромное количество полезнейших веществ: полисахариды, гликозиды, витамины, аминокислоты и минералы, полифенолы (тартроновая, галловая, кумариновая, кофейная и транс-коричная кислоты). Тартроновая кислота, например, влияющая на обменные процессы, препятствует переходу углеводов в жиры.

Широко распространённые описания свойств уже достаточно обыденны — улучшает работу ЖКТ, очень полезны для кожи, волос и ногтей… Да, всё это прекрасно, но на это уже никто внимания не обращает. Однако, как оказалось, не всё так прозаично.

Огурец, как известно, достаточно капризное растение. Он не любит, чтобы слишком жарко или слишком сухо, он не любит холод и вообще резкие перепады температуры… Это для огурца стресс. И в ответ на эти стрессовые условия огурец вырабатывает защиту, «антистрессовое вещество», а именно – кукурбитацин. Именно из-за кукурбитацина огурцы становятся горькими. «Знатные» огородники пишут, что хватает одной, слишком солнечной и сухой недели, чтобы в разы увеличилось количество горьких огурцов. Основное место его концентрации — кожа и «попка» около плодоножки (как раз то, что многие выбрасывают).

То бишь, в жаркую и сухую погоду вырастают самые полезные огурцы! Жаль есть их не особо радостно…

Недавно начатые исследования, пока ещё в середине пути. Пока только закончились эксперименты на животных и начаты исследования среди больных раком людей. Но предварительные результаты уже впечатляют. И не только меня, как обывателя, но и учёных.

Фармакологи уже быстренько схватились за кукурбитацин и начали исследовать возможности создания противораковых лекарств.

Достаточно хорошо изучены флавоноиды (лютеолин, апигенин, кемпферол, кверцетин) содержащиеся в огурцах, которые улучшают кровообращение в целом, и улучшают сопротивляемость и состояние сосудов. Эти свойства часто вспоминают, говоря об огурцах. Но обнаруженные в них другие вещества, благодаря своим «волшебным» свойствам сразили учёных наповал.

Это лигнаны и тритерпены.

Тритерпены: кукурбитацин, кукурбитацин B, кукурбитацин C, кукурбитацин D.

Лигнаны: секоизоларицирезинол, пинорезинол, ларицирезинол.

Действие лигнанов тоже стали изучать не так давно. Но уже достаточно много известно об их действии. Секоизоларицирезинол, находящийся в группе полифенольных соединений, является очень мощным антиоксидантом. Секоизоларицирезинол так же, как ларицирезинол и пинорезинол предупреждают онкологические заболевания, эти вещества связывают и нейтрализуют свободные радикалы. Они ингибируют различные виды циклооксигеназ, то есть работают ещё и как противовоспалительные средства.

Исследования лигнанов, как раз и привели к открытию новых, поистине волшебных, веществ — кукурбитацинов.

Ни для кого не секрет, что в человеческом теле (даже очень здоровом) под влиянием многих факторов, постоянно появляются и живут атипичные клетки с изменённой информацией. В огромных, надо сказать, количествах (сотнями тысяч). Те самые «раковые» клетки. Однако при нормальной работе иммунной системы и обмена вешеств эти клетки успешно уничтожаются специальными лимфоцитами «убийцами» Т-супрессорами и Т-киллерами (Т-супрессоры, грубо говоря, отсеивают, сортируют и помечают вредителей, а Т-киллеры, что ясно из названия, полностью лизируют (растворяют) эти клетки).

Заумные и длинные речи о множестве белков участвующих в сложных процессах, которые происходят при взаимодействии различных веществ организма с кукурбитацином, о множестве синтезируемых организмом, вследствие взаимодействия, веществах не буду вести. Для многих это не более, чем странные буковки и циферки.

Без слишком сложных слов скажу, для усиленного развития и роста раковых клеток необходимы «специальные условия», так называемые сигнальные пути (внутриклеточная передача сигнала типов — ERK, MAPK и JAK-STAT). Так вот, «волшебное» вещество кукурбитацин блокирует данную деятельность организма. Он так же активно взаимодействует с клетками «убийцами», теми самыми Т-супрессорами и Т-киллерами.

Кукурбитацин Е показал высокую противоопухолевую активность по отношению к раковым клеткам яичников.

Совместно с лимфоцитами кукурбитацин D, приводит к апоптозу клеток гепатоцеллюлярной карциномы и лизису (растворению) многих типов раковых клеток.

Кукурбитацин С показал высокую анальгезирующую активность и мощный противовоспалительный эффект.

Кукурбитацины В и Е подавляют рост раковых клеток молочной железы. Вкупе с лимфоцитими и лигнанами кукурбитацины сначала понижают содержание белков-инициаторов митоза, после деформируют раковые клетки и подавляют их деление. И самый важный финал — риводят к тотальному апоптозу клеток рака!

* Апоптоз — регулируемый процесс программируемой клеточной гибели, в результате которого клетка фрагментируется на отдельные апоптотические тельца, ограниченные плазматической мембраной. Фрагменты погибшей клетки обычно очень быстро уничтожаются либо фагоцитами, либо соседними (здоровыми) клетками.

Сначала исследовали кукурбитацин, как убийцу только «эстрогенного» рака (рак матки, молочной железы, яичников и предстательной железы). И до сих пор эти свойства рассматриваются как основные. Но в ходе исследований так же обнаружилось, что разные типы кукурбитацина вместе с лигнанами принимают активное участие в апоптозе клеток рака поджелудочной железы, толстого кишечника, лейкоза, нейробластомы, назофарингеальной карциномы.

После обнародования в учёной среде этих открытий, итальянские учёные провели своё 2-х годичное исследование женщин здоровых и женщин, больных раком молочной железы. Результаты впечатлили. У женщин, которые употребляли большое количество огурцов (в салатах с оливковым маслом), риск заболевания раком уменьшился на 37%, и на 15% снизилось развитие уже имеющегося, а так же у 23% женщин способствовало выздоровлению на начальных стадиях.

В Греции было проведено подобное исследование и вот, что выяснилось. Ежедневное употребление женщинами салатов, с присутствием огурцов и моркови (по меньшей мере, 3 раза в неделю), данное сочетание снижает риск развития рака молочной железы и рака матки аж на 88%!

Повторюсь, исследования только начаты, и это пока только предварительные результаты. То ли ещё будет.

Вот такое вот волшебство в самых обычных огурцах! Задумаешься, а стоит ли выбрасывать горькие огурцы.

Единственное грустное заявление учёных — кукурбитацин разрушается при тепловой обработке и длительной обработке водой. Значит, что в консервированных огурцах (даже супер горьких изначально) кукурбитацина нет. Но спиртовые экстракты вполне допустимы.

И, несмотря на такие прекрасные новости от науки, «злые вампиры» промышленники во многих странах, сейчас уже успешно выпускают, популяризируют и продают генномодифицированные сорта огурцов, которые совершенно не содержат кукурбитацина, якобы для того, чтобы огурцы просто никогда не горчили.

Хм. Очень это, однако, странно. Кому выгодно лишать растения таких полезных свойств…

Юл Иванчей (Yul Ivanchey)

витамины, картинки, список, что это

Черный орех: полезные свойства и применение

По отчёту Всемирной организации здравоохранения каждый год умирает несколько десятков миллионов человек. Одна из причин — паразитарные и инфекционные заражения. Кишечные глисты, вызывающие заболевания, занимают третье место.

Многие годы пытаетесь избавиться от ПАРАЗИТОВ?

Читать далее »

Медики и народные целители ищут лекарственные средства, чтобы помочь людям избавиться от паразитов. Практика показывает, что более эффективные, безвредные это те, что изготовлены на основе растительного сырья.

Все большую популярность в нетрадиционной медицине завоевывает орех чёрный. На его основе изготавливают настойки, направленные на борьбу с вредителями в человеческом организме.

Чёрный орех — что это и чем полезен

Чёрный орех — это дерево из рода Орех, семейства Ореховые. Его уникальность в том, что листья, плоды имеют богатый набор полезных веществ. Эти вещества способны уничтожить гельминтов и десятки других микроорганизмов, поражающих кровеносную систему, желудочно-кишечный тракт и другие органы жизнедеятельности человека.

НАШИ ЧИТАТЕЛИ РЕКОМЕНДУЮТ!

Для избавления от паразитов наши читатели успешно используют Intoxic. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Состав

Если обратить внимание на состав, то можно заметить прекрасную комбинацию химических элементов, необходимых для борьбы с паразитами:

• Юглон — природный антибиотик. Губительно влияет на паразитов, оказывает противомикробное действие.
• Гликозиды: усиливают моторику желудка и перистальтику кишечника, улучшают переваривание пиши, выводят шлаки, разрушают среду обитания вредных микроорганизмов, улучшают аппетит, оказывают слабительный эффект.
• Витамины: В9, В3, В2, В1, РР восстанавливают обменные процессы, необходимые для выведения продуктов разложения.
• Витамины А, Е — антиоксиданты. Способствуют заживлению эрозий, причиненных глистными особями.
• Витамин С укрепляет иммунитет.
• Танин — дубильная кислота. Оказывает: противовоспалительное, вяжущее, бактерицидное, кровоостанавливающее действие. Создаёт защитную пленку на близлежащих тканях, защищая их от проникновения глистов.
• Микроэлементы: железо, цинк, марганец, селен, медь, йод, кремний.
• Макроэлементы: кальций, магний, калий, фосфор, натрий.

Все эти вещества в совокупности оказывают усиленное терапевтическое действие на организм человека.

Полезные свойства

На целебные свойства черного ореха обратили внимание много веков назад индейцы — коренные жители Северной Америки. Тогда его использовали для лечения многих болезней. Успешно применяли для очищения организма от шлаков. При укусах змей — как противоядие.

Веками позже, когда дерево завезли на территорию Европы, его листья с плодами заинтересовали народных целителей в этой местности.

Доказано, что в организме человека могут обитать более тысячи видов гельминтов, паразитирующих в любой части тела. Учитывая то, что не все стадии развития паразитов диагностируются, нужны лекарственные препараты широкого спектра действия.

Особенность черного о

Почему огурцы горчат - что делать, выращивание в теплице и открытом грунте

Почему огурцы бывают горькими

Горечь в огурцах обусловлена выработкой биохимического соединения – кукурбитацина (сапонин из группы гликозидов), и это особенность семейства тыквенных, выработанная генетически, как защита от поедания животными, прежде чем наступит период созревания.

В небольших количествах вещество присутствует и в не горьких плодах – отрежьте зеленую попку у огурца 1 см и интенсивно потрите ею на месте среза – выступит белая пенка – это и есть кукурбитацин. Сапонины усиленно вырабатываются с момента прорастания семян, и присутствуют во всех частях растения — стеблях и листьях, в молодых, не созревших плодах их больше, но при созревании необходимость в такой защите пропадает, и горечь не ощущается.

Ученые уже выявили девять генов, ответственных за образование этого гликозида, а поэтому совершенно точно можно сказать, что существуют сорта, не склонные к образованию горечи. Кукурбитацин – довольно токсичное соединение, но в тоже время обладает противоопухолевыми, противовоспалительными и антимикробными свойствами. Употребление горьких овощей в большом количестве может вызвать понос, урчание и спастические боли в животе. Биохимические вещества из огурца (не только кукурбитацин), проникают в грудное молоко, об этом стоит помнить кормящим матерям.

Кстати, вы знаете, что кукурбитацин в небольших количествах содержится в сладких арбузах – мякоть спелого арбуза содержит 0,5% кукурбитацина, но мы этого не чувствуем, пока не объедимся этих ягод или не съедим кусочек недозрелого арбуза.

Причины горечи в огурцах

Отчего в спелых огурцах накапливается горечь? Можно объяснить горьковатый вкус зеленцов, сеянцев (особенно горчат семядольные листочки), но горечь в спелых плодах целиком зависит от внешних факторов, если это не устойчивый гибрид. Выработка кукурбитацина – это ответная реакция на стресс. Для этой культуры – неправильный полив, температура, питание, причем не важно, выращиваете вы овощи в теплице или открытом грунте.

Огурец родом из тропических и субтропических районов Индии, мест, где влажный воздух и нет палящего солнца. Поэтому он должен выращиваться в притененном месте, на рассеянном свету. Защищать его от солнца могут ажурная тень плодовых деревьев, специально посаженные культуры, например рядок кукурузы, или полупрозрачный материал – для этих целей промышленность выпускает специальный укрывной материал – спанбонд. Очень часто садоводы используют его для защиты огурцов от холода, натягивая на дуги или каркас парника, а как только установится теплая погода – снимают. Конечно, если оставлять парник, в жаркие дни огурцы перегреваются и как следствие – горечь в плодах, но спанбонд нужно оставить, если у вас солнечная сторона, только не накидывать его над кустами овощей, а натянуть как экран, для защиты в солнечные дни.

Огурец испытывает стресс от жары и сухого воздуха. Если такая погода длится несколько дней, неделю и дольше, у огурцов быстрее желтеют и сохнут листья, плоды не успевают накопить достаточно влаги, для них характерно искривление кончиков, и конечно, они начинают горчить.

В этот период очень важно обильно поливать кусты теплой водой – оптимальное время рано утром и вечером в 17-18 часов. Именно полив дважды в день более эффективен. Однако утром добыть теплую воду сложнее – в ванных, бочках и централизованной системе она остывает, из скважины – ледяная. Поэтому садоводы поливают обычно вечером, когда вода успевает нагреться, но этого может быть недостаточно.

Чтобы снизить воздействие небывалой жары, над огурцами в открытом грунте можно сделать навес, но только из белого материала или зеркального. А для тепличных огурцов удобно использовать зеркальную пленку – её смачивают и приклеивают на стекла окон в домах, она прозрачная с одной стороны и полностью отражает с другой. Чтобы корни огурцов не пересыхали, нужно регулярно, раз в неделю – полторы мульчировать кусты свежей землей, к тому же это вызывает новый прирост корешков и продлевает плодоношение.

Не сажайте огурцы в плотную глинистую почву, а сажайте в самую рыхлую. Если же у вас суглинок, не поленитесь, привезите тележку торфа. Не песка, а именно торфа. Подходит лучше низинный, но он в чистом виде кисловат, его нужно произвесковать, например, древесной золой — 2 стакана на ведро торфа. Хотя, ориентироваться лучше не на глаз, а на лакмусовую бумажку — огурец любит кислотность рН 5,0 – 6,0.

Существует мнение, что огурцы очень хорошо отзываются на подкормки свежим навозом. На самом деле это не так и даже наоборот – свежая органика может спровоцировать выработку горечи. Эти овощи очень прожорливы и органические удобрения для них самое то, огурец, как тыквы и кабачки может прекрасно расти прямо на компостной куче, но подкармливать стоит перепревшим, а не свежим навозом. Правильнее заготовить гряды с осени, заложив свежий навоз, к весне он будет «приготовлен» самый раз. Если же вам так захотелось внести свежей органики, чтобы не было горечи, кусты надо очень обильно поливать, не давать им просыхать даже кратковременно.

У дачников, бывающих в огороде заездами, основная причина горечи – неравномерный полив. А в теплицах и парниках еще и перегрев. Огурец не любит чередование засухи и обильного полива, он исторически привык к ровным условиям. Для него стресс – резкие крайности во влажности грунта, воздуха и температуры. Поэтому иногда, когда лето выдается с переменчивой погодой, на застекленных балконах огурцы растут лучше, чем в открытом грунте – мы закрываем балкон на ночь и распахиваем утром, поливаем по мере просыхания – растут огурцы и не горчат.

К сожалению, если на кусте огурца появился один горький плод, то вся партия пойдет горчить и урожай с него годится только в переработку. Если вы заметили деформацию плодов на зеленцах – уже стоит задуматься, что не так – это один из признаков жары, недостаточного полива или избытка удобрений. Деформированные плоды чаще горькие, чем хорошо сформированные. Подведем итог всему сказанному, собственно все причины можно свести к короткой памятке для огородника. Огурцы бывают горькими потому что:

• недостаточно влаги в грунте
• чередование пересушивания и обильного полива
• избыток прямого солнца в жаркие дни
• сочетание сухости воздуха и высокой температуры
• полив холодной водой (в любую погоду)

Есть и другие ответы, которые часто приводят бывалые садоводы, например недостаток питания, особенно азота и калия. На самом деле это далеко не показатель, от недостатка питательных веществ завязывается мало плодов, огурцы медленнее растут, кусты небольшие, но на горечь это оказывает влияние только вместе с другими факторами.

Нельзя проводить подкормки огурца, если он уже испытал стресс – в сильную жару или от пересушки, подождите неделю или две, как отойдет. Кто-то не понимает, почему горечь возникает от солнца. На самом деле, не от солнца как такового, а от жары, т.е. огурцу не страшно много солнца утром, часов до 11, или вечером после 17 часов. Днем солнце опасно только в жаркие дни, когда температура в тени 27-28 градусов, а в начале лета и в конце августа, когда нет сильной жары, любое солнце огурцам полезно.

Помимо главных причин, есть такие, о которых многие забывают, а зря. Для огурцов очень важен состав воды – они не терпят избытка железа и кальция, совершенно не переносят хлор и натрий. Эти элементы угнетают любые бахчевые, но огурцы в первую очередь.

Сорта огурцов без горечи

У одних сортов склонность к накапливанию кукурбитацина сильнее, у других слабее, а есть сорта, которые ничто не заставит горчить – ни задержка с поливом, ни жара:

• Апрельский
• Бенефис
• Гинга
• Зятек
• Изумрудные сережки
• Кадриль
• Клавдия
• Колян
• Конек Горбунок
• Конни
• Коринна
• Купеческий
• Кураж
• Мадам
• Мазай
• Матрешка
• Маша
• Мурашка
• Муравей
• Отелло
• Примадонна
• Родничок
• Сантана
• Теща
• Щедрик
• Хрустик и др.

Кстати, существует мнение, что сорта огурцов для засолки практически не горчат, в отличие от салатных. Это не так, среди салатных много сортов без горечи – самые популярные, китайские сорта, которые продают в магазинах, длинные как палки с мелкими семенами. Это сорта: Китайский Жароустойчивый F1, Китайский холодоустойчивый F1, Китайский фермерский и другие. Они годятся не только для салатов, но и для консервирования, только из-за большой длинны, приходится мариновать их дольками, разрезав вдоль или поперек.

Горькие огурцы — что делать

Вы собрали урожай и обнаружили горечь, естественно такие огурцы неприятно есть в салате, остаётся три варианта:

• отрезать попки и замочить на 12-24 часов, меняя периодически воду,
• приготовить малосольные огурцы,
• замариновать огурцы на зиму.

Какие бы специи вы не добавляли в салат, если есть горький огурец, он будет ощущаться, поэтому для свежего салата – только длительное вымачивание. Но если огурец горчит не весь, а только с с хвостика, можно попробовать уменьшить горечь таким способом: отрежьте зеленую попку 1-1,5 см и сильно потрите её на месте среза, пока не перестанет выделятся пена. Теперь промойте огурец. Непонятно каким образом, но помогает. А вот мариновать можно по любому рецепту, кукурбитацин разрушается при тепловой обработке, горечи не будет. Кусту, с которого собрали горчащие огурцы, нужно уделить особое внимание:

• притенять от яркого солнца в жару,
• обильно поливать, но только теплой водой (20–22°С), ориентир такой: земля должна быть влажной на глубине около 15 см – тут основная масса корней,
• оберегать от жары или холода,
• окучивать, но не рыхлить – корни огурца образуют сплошное мочало, не нужно его рвать, просто подгребите земли.

Похожие записи

Плоды женского пола кабачков с геном горечи кукурбицином.: flavorchemist — LiveJournal

Я не мог пройти мимо этой волшебной шутки Антона Привольнова. Я посмотрел это сегодня утром и обеспечил себе заряд бодрости, который даже периодически возникающие отчеты не смогли разрядить.

Первая часть про кефир не очень интересная, можно сразу промотать до пробуждения сознания на 0:55

2. Екатерина из Екатеринбурга: "Приобрела на рынке кабачки. Дома стала их резать, почувствовала жжение на руках, но значения этому не придала. Позже попробовала само блюдо. Оно оказалось тоже сильно жгучим жгучим. Скажите, неужели я купила отравленные кабачки?"

С кабачками всe в порядке! Просто вы приобрели плоды женского пола, которые судя по всему опылились другими растениями. В данном случае, это были огурцы. Из-за этого в кабачках появляется ГЕН ГОРЕЧИ– КУКУРБИЦИН, который и стал причиной жжения и горьковатого вкуса. Однако избавиться от него можно в процессе приготовления блюда. Достаточно потушить или пожарить кабачки при температуре не менее 125 градусов. Именно в таких условиях кукурбицин разлагается, и кабачки приобретают свой привычный вкус!

Сплю и вижу. Плоды женского пола кабачков (Интересно, чем они отличаются от плодов мужского пола. Хотя да, у мужских должна видимо быть такая штучка...) опыляются огурцами, и генномодифицируются кукурбицином. Что бы от этого избавиться нужно потушить кабачки при 125С, типа надо покупать автоклав. Это лучшая шутка Привольнова на сегодняшний день. Столько прекрасной ереси в одной фразе.

На всякий случай - кукурбицин во-первых ни фига не ген а конкретное вещество (группа веществ). Во-вторых это не кукурбицин а кукурбитацин. А в-третьих, можен он и горький, но кожу не жжет, это удел совсем других веществ Может быть тов. Привольнов спутал сабж с капсаицином? Не,ну а чо, название то похожее. Может кабачок красным перцем опылился и в него вселился ген капсаицина. А потом опылился горчицей и в него вселился ген аллил изотиоцианата. А если выращивать кабачки на одном поле с какао, то можно из модифицировать геном теобромина. Ну, логический ряд можно продолжать вплоть до гена крокодила и гена чебурашки.

Ну и так, на закуску.

3. Игорь из Самары: "Купили с женой кухонный гарнитур. Уже больше недели после его установки на кухне чувствуется химический запах. Жена боится, что это может плохо повлиять на здоровье, у нас маленький ребeнок. А мне кажется, что запах просто выветрится со временем. Рассудите, кто из нас прав".

Права жена! В соответствии с требованиями мировых стандартов качества, кухонная мебель не должна иметь запаха. Скорее всего, ваш гарнитур изготовлен из низкокачественного ДСП. Такой может издавать сладковатый аромат формальдегида или формалина – вредных химических соединений. Эти вещества накапливаются в организме, и могут стать причиной токсического отравления. Не медлите! В течение двух недель у вас есть шанс вернуть гарнитур обратно в магазин. Если только он не был изготовлен под заказ по индивидуальным меркам. В этом случае, решить проблему можно будет только через суд!

Конечно, ничего хорошего о формальдегида ждать не приходится, но почему нельзя сказать это нормальными русскими словами а не теми чухонскими терминами, которыми привык выражаться поциент.
Формальдегид это конечно гадость, и может быть в ДСП, вернее может выделяться из фенолформальдегидной смолы, которой эту ДСП клеят.
Во только формалин - это ни фига не другое вещество а просто раствор того самого формальдегида и еще немного метанола (а метанол из фенолформальдегидной смолы выделиться какбе не может). И в организме формальдегид накопиться вряд ли сможет, что, конечно, не отменяет его токсичности.

Кстати, причина запаха мебели может быть например в краске, или клее, и не хрена народ сразу отравой пугать.

Но конечно, на фоне гена кукурбицина и плодов кабачка женского пола это даже не смешно.

ЗЫ Стенограмма передачи на сайте канала немного отличается от того, что Привольнов рассказывает ртом.

понижающая регуляция пути c-Myc / hTERT / Telomerase и воспрепятствование клеточному циклу — PubMed сайт на русском

Было обнаружено, что встречающиеся в природе кукурбитацины обладают противоопухолевой, противомикробной и противовоспалительной активностью. В этом исследовании мы определили влияние кукурбитацина В, выделенного из тайской травы Trichosanthes cucumerina L. на регуляцию теломеразы в трех линиях клеток рака молочной железы человека (T47D, SKBR-3 и MCF-7) и линии клеток эпителия молочной железы (HBL -100). Была оценена жизнеспособность клеток после лечения кукурбитацином В, который является активным ингредиентом этой травы. Для исследования активности теломеразы и экспрессии обратной транскриптазы теломеразы (hTERT) и c-Myc проводили текториальные анализы повторного амплификации (TRAP) и RT-PCR (качественный и в реальном времени). Уровень белка c-Myc также определяли в клетках SKBR-3 и HBL-100. Наши результаты показывают, что cucurbitacin B ингибирует активность роста и теломеразы в трех линиях клеток рака молочной железы и проявляет очевидный ингибирующий эффект в клетках SKBR-3, связанных с эстрогенным рецептором (ER) -негативным раком молочной железы SKBR-3. Экспрессия hTERT и c-Myc также ингибировалась cucurbitacin B. Кроме того, после лечения в клетках SKBR-3 наблюдалось четкое снижение белка c-Myc даже при концентрации кукурбитацина B, которая была в 10 раз ниже по сравнению с концентрация, используемая для HBL-100. Наши результаты предполагают, что cucurbitacin B оказывает противоопухолевое действие, ингибируя теломеразу, регулируя как экспрессию hTERT, так и c-Myc в клетках рака молочной железы.

Растущая заболеваемость раком молочной железы делает это заболевание главной проблемой общественного здравоохранения, и рак молочной железы является самым распространенным раком среди женщин во всем мире [1,2]. Теломераза, фермент, ответственный за поддержание теломер, высоко экспрессируется в более чем 90% опухолей рака молочной железы, но экспрессия низка в нормальной ткани груди [3,4]. Теломерные TTAGGG-тандемные повторы на концах хромосом защищают хромосомы от сквозного слияния, перегруппировки и транслокации [5,6]. В нормальных соматических клетках с низким уровнем теломеразы ДНК-полимераза не может полностью реплицировать 5′-конец отстающей цепи, что приводит к укорочению теломер с каждым делением клеток. Это укорочение теломер вызывает клеточку, которая подвергается репликативному старению, остановке клеточного цикла и сигналу повреждения ДНК [7,8]. Теломераза состоит из двух основных субъединиц, необходимых для ее активности: шаблон человеческой теломеразы РНК (hTERC) и каталитическая субъединица обратной транскриптазы теломеразы человека (hTERT) [9,10]. Теломераза играет роль в клеточной пролиферации в качестве защитного механизма против проблем с конечной репликацией, добавляя повторы TTAGGG к теломерам [11]. Теломераза очень активна только в зародышевых клетках и в тканевых стволовых клетках. Повышенная экспрессия теломеразы сильно связана с неопластическим ростом, и экспрессия теломеразы в раковых клетках может быть необходимой ступенью для прогрессирования опухоли. Поэтому развитие агентов, обладающих активностью против теломеразы, может быть продуктивным подходом к разработке новых методов лечения рака молочной железы [12-14]. Химиотерапевтические препараты довольно токсичны для пациентов и часто приводят к резистентности к лекарственным средствам через определенный период. Использование альтернативных методов лечения широко распространено во всех регионах развивающегося мира и быстро растет в промышленно развитых странах [15]. Природные кукурбитаты имеют высококислородные тетрациклические тритерпены, содержащие скелет ядра кукурбитана, и в основном встречаются в растениях семейства cucurbitaceae, члены которых уже давно используются в восточных лекарствах. Было показано, что у кукурбитацина В и дигидрокумурбатицина Б, выделенного из тайской травы Trichosanthes cucumerina L., проявляется противоопухолевая, противомикробная и противовоспалительная активность [16,17], и структуры этих очищенных форм были выяснены с использованием ЯМР-спектроскопии [18]. В предыдущем докладе показано, что кукурбитацин В и дигидрокубурбатинат В могут ингибировать рост клеточных линий рака молочной железы [19], но молекулярный механизм этого ингибирования роста остается неясным. Поэтому в настоящем докладе мы рассмотрели влияние кукурбитацина В на теломеразу и связанные гены в клеточных линиях рака молочной железы человека. Наши результаты сильно указывают на возможный эффект против рака молочной железы кукурбитацина B.

Чтобы исследовать влияние кукурбитацина В на клетки рака молочной железы человека, значения IC50 для трех экстрактов T. cucumerina L были определены на клеточных линиях рака молочной железы. Используемые экстракты включали 100% чистый кукурбитацин B и очищенное соединение cucurbitacin B, содержащее cucurbitacin B (майор) и дигидрокробурибатин B в молярном соотношении 8: 1. Все они были подготовлены, как описано в другом месте [19]. Значения IC50 этих очищенных экстрактов также сравнивали с высушенным распылением сырым экстрактом. Клетки SKBR-3, MCF-7, T47D и HBL-100 инкубировали с концентрациями трех тестовых экстрактов в диапазоне от 1 до 100 мкг / мл и оценивали жизнеспособность клеток с использованием MTT-анализа при 48-часовой инкубации. Все три экстракта показали значительное ингибирующее действие роста против клеток SKBR-3 и HBL-100, но меньшее влияние на клетки MCF-7 и T-47D (табл. 1 и рис. 1), что указывает на то, что отрицательные клетки эстрогеновых рецепторов (ER) больше чувствительных к действию этих экстрактов.

Учитывая, что очень сходные, хотя и только несколько более низкие ингибирующие эффекты наблюдались с соединением кукурбитацина В (содержащим как кукурбитацин В, так и дигидрокурубитацином В) по сравнению с очищенным кукурбитацином В, были проведены дополнительные эксперименты для исследования механизма действия с соединением кукурбитацина В.

Чтобы подтвердить потерю жизнеспособности клеток, наблюдаемых в клетках, инкубированных с кукурбитацином B, все четыре линии клеток инкубировали с экстрактом при вычисленных значениях IC50, как указано в таблице 1, в течение 48 часов параллельно с контрольной (необработанной) клетками. Изучение культур с помощью фазовой контрастной микроскопии показало морфологические изменения, включая усадку клеток и мембранное кровотечение, после обработки экстрактом. Это наблюдение согласуется с индукцией апоптоза в обработанных клетках (рис. 2) и поддерживает потерю жизнеспособности клеток, как описано в MTT-анализе.

Исследовано влияние кукурбитацина В на активность теломеразы. Линии клеток рака молочной железы человека были обработаны cucurbitacin B в различных концентрациях в течение 48 часов. Согласно значительно большей чувствительности клеток SKBR-3 к соединению cucurbitacin B, клетки SKBR-3 были, таким образом, инкубированы в 10-кратных более низких концентрациях, чем другие три клеточные линии. После инкубации активность теломеразы определяли с помощью анализа TRAP. Как показано на фиг. 3А, интенсивность полосы длительности повторения 6 п.о. (TTAGGG) снижалась после инкубации с кукурбитацином В во всех тестируемых клеточных линиях, и результаты согласуются с зависимым от дозы уменьшением активности теломеразы в четырех клеточных линиях. Чтобы подтвердить это, относительные уровни активности теломеразы были определены с использованием системы анализа TRAPEZE-ELISA, а зависимое от дозы снижение уровней теломеразы наблюдалось во всех четырех клеточных линиях (рисунок 3B). Оба анализа активности теломеразы показали больший эффект кукурбитацина В в линиях отрицательных клеток рецептора эстрогена (SKBR-3 и HBL-100) по сравнению с положительными клеточными линиями рецептора эстрогена (MCF-7 и T47D), что согласуется с результаты анализов жизнеспособности клеток. Более того, активность теломеразы, очевидно, снижалась в клетках SKBR-3 с отрицательной обратной связью ER, хотя концентрации кукурбитацина B, используемые для этого типа клеток, были в 10 раз меньше, чем не-злокачественный эпителий молочной железы HBL-100.

Для дальнейшего определения механизмов ингибирования теломеразы соединением cucurbitacin B экспрессию двух генов (hTERT и c-Myc), которые, как известно, влияют на активность теломеразы, анализировали полуколичественной и количественной RT-PCR в реальном времени. Для полуколичественной RT-PCR линии клеток инкубировали с кукурбитацином В в концентрациях 0, 20, 40, 60 и 80 мкг / мл (T47D, MCF-7 и HBL-100) или 0, 2, 4, 6 , 8 и 10 мкг / мл (СКБР-3) в течение 48 ч, и каждый эксперимент проводили в трех повторностях. Результаты после нормализации против β-актина согласуются с зависимым от дозы снижением как hTERT, так и c-Myc транскриптов во всех четырех клеточных линиях. Опять же, SKBR-3 показывает наибольшее снижение экспрессии hTERT и c-Myc после лечения cucurbitacin B (рисунок 4).

Была проведена RT-PCR в реальном времени для количественного определения уровней транскриптов. Для каждой клеточной линии только две концентрации кукурбитацина В испытывались параллельно с необработанными клетками: 50 и 100 мкг / мл (для T47D, MCF-7 и HBL-100) или 5 и 10 мкг / мл (для SKBR-3) , и инкубации проводили в течение 48 часов, как указано выше. Результаты e RT-PCR (рис. 5 (A)) подтверждают, что cucurbitacin B от T. cucumerina L. ингибирует экспрессию гена hTERT и c-Myc. Экспрессия hTERT и c-Myc в клетках SKBR-3 была снова уменьшена больше, даже при более низкой концентрации кукурбитацина B от 5 до 10 мкг / мл. Экспрессия c-Myc умеренно снижалась в эстроген-положительных клеточных линиях (T47D и MCF-7), в отличие от экспрессии hTERT, в которой очевидное снижение также наблюдалось в этих клетках. Сниженный уровень белка c-Myc в клетках SKBR-3 показан на рисунке 5 (B).

Влияние кукурбитацина B на прогрессирование клеточного цикла в ER-отрицательном SKBR3 и HBL-100 анализировали в соответствии с принципом содержания ДНК клеток в каждой фазе клеточного цикла. Клетки обрабатывали cucurbitacin B в течение 24 часов, а содержание ДНК анализировали с помощью проточной цитометрии. Эксперимент проводился в трех повторениях. Результаты показывают, что обработанные клетки были арестованы на фазе G2 / M клеточного цикла с уменьшенной популяцией клеток в G1 и S (рисунок 6), предполагая, что кукурбитацин B ингибирует рост путем блокирования цикла деления клеток на фазе G2 / M. Кроме того, трехкратное увеличение популяции клеток в фракции subG0 после обработки с низкой концентрацией cucurbitacin B наблюдалось в SKBR-3 по сравнению с необработанными клетками (10,3% против 3,4%), что подразумевало апоптозную индукцию в этих клетках.

В течение последних нескольких лет теломераза все чаще рассматривалась как жизнеспособная цель терапии рака, и как таковое было увеличение исследований, требующих ингибиторов теломеразы, а также исследований, исследующих способ действия этих ингибиторов. Ингибирование теломеразы приводит к прогрессирующему теломерному сокращению во время последовательных клеточных циклов, а затем приводит к остановке роста и гибели клеток [20].

В нескольких сообщениях показано, что активность теломеразы может ингибироваться некоторыми лекарственными растениями и их экстрактами. Лекарственными растениями являются те, в которых часть растения может использоваться для терапевтической цели, и многие из используемых сегодня препаратов получены из лекарственных растений [21]. Кроме того, многие исследования направлены на поиск новых лекарственных соединений из растений, используемых в традиционной медицине [22].

В 2005 году Чой и его коллеги сообщили, что costunolide, природное соединение сесквитерпена, полученное из коры Magnolia sieboldii (член семейства Magnoliaceae, которые обычно используются в восточной традиционной медицине [23]), ингибирует рост рака молочной железы человека клеточной линии путем снижения активности теломеразы [24]. Аналогичным образом, Рамачандран и его коллеги сообщили, что куркумин, полученный из корневищ куркумы (Curcuma longa L.) — растение с длинной историей естественного лекарственного применения — может ингибировать активность теломеразы с помощью понижающей регуляции экспрессии hTERT в раке молочной железы MCF-7 клеток [25].

Совсем недавно Mittal et al. сообщили о понижающей регуляции теломеразы (-) — эпигаллокатехин-3-галлатом (EGCG), составляющей зеленого чая, в клетках MCF-7, что привело к подавленной жизнеспособности клетки и индукции апоптоза [26]. Поэтому ингибирование теломеразы является привлекательным подходом к терапевтической цели рака молочной железы, а лекарственные растения, по-видимому, предлагают множество потенциальных соединений-кандидатов.

В этой работе мы сообщаем о антипролиферативном эффекте экстракта кукурбитацина, полученного из Trichosanthes cucumerina L. Это растение широко культивируется в Азии и на индийском субконтиненте, где оно имеет долгую историю лекарственного применения для различных расстройств, включая злокачественные рост [27,28]. Было показано, что экстракт, состоящий из cucurbitacin B и дигидрокумубибатина B, оказывает значительное антипролиферативное действие на тестируемые клеточные линии рака молочной железы человека (T47D, MCF-7, SKBR-3), а также клетки HBL-100. Блокировки клеточного цикла на фазе G2 / M, а также определенная степень апоптоза были замечены в этих клеточных линиях, особенно в клетках SKBR-3 с отрицательным СКК рака молочной железы. Интересно, что ER-отрицательные клетки SKBR-3 были наиболее чувствительными к кукурбитацину B по сравнению с незлокачественными клетками HBL-100 и другими двумя клетками рака молочной железы MCF-7 и T47D. Таким образом, различная чувствительность к соединению cucurbitacin B, по-видимому, напрямую связана с статусом рецептора эстрогена, что может быть важным для применения кукурбитацинов в клинической практике.

Сообщалось о том, что кукурбитацин В влияет на активность теломеразы, а также на экспрессию генов, связанных с регуляцией этого фермента во всех изученных типах клеток. Экспрессия гена hTERT прямо коррелирует с активностью теломеразы, поскольку белок hTERT является каталитической ограничивающей скорость детерминантой субъединицы теломеразы [29]. hTERT — это нижняя мишень фактора c-Myc, которая связывается с E-box (CACGTG) и способствует экспрессии гена hTERT [30]. Следовательно, c-Myc усиливает теломеразу, усиливая экспрессию hTERT [31,32]. Однако в эстроген-положительных клеточных линиях T47D и MCF-7 ПЦР в реальном времени проявляла некоторое несоответствие между уменьшением экспрессии hTERT и c-Myc. Это наблюдение позволяет предположить, что cucurbitacin B может оказывать антипролиферативное действие в ER-позитивных и ER-отрицательных клетках рака молочной железы через различные биологические пути. Поддержка этого исходит из исследований в клетках рака молочной железы человека, которые показали, что эстрадиол в основном регулирует c-Myc на уровне транскрипции в ER-позитивных клетках, но на посттранскрипционном уровне в ER-отрицательных клетках [33]. В ER-позитивных клетках известно, что рецептор эстрогена активирует ряд путей клеточной передачи сигнала, включая путь ERK / MAPK [34], и активация этого пути приводит к транслокации активированной MAP-киназы в ядро, где она регулирует экспрессию из ряда транскрипционных факторов, в том числе уместно, c-Myc [35]. Следовательно, в ER-позитивных клетках возможно, что кукурбитацин B непосредственно модулирует либо рецептор эстрогена, либо последующий сигнальный путь, как это предложено исследованиями, которые показали понижающую регуляцию пути JAK / STAT кукурбитацином в клетках поджелудочной железы [36]. В ER-отрицательных клетках, где c-Myc контролируется в первую очередь на уровне стабильности РНК [33], возможно, что cucurbitacin B уменьшает период полувыведения РНК, что приводит к потере активации hTERT. В обоих случаях кукурбитацин В мог действовать прямо или косвенно через c-Myc, что приводило к уменьшению активности теломеразы и последующей потере клеточной пролиферации, что подтверждается обнаружением блокады G2 / M клеточного цикла после лечения кукурбитацином В.

Выделение кукурбитацинов из плода T. cucurmerina L. проводилось, как описано ранее [19]. В этом исследовании использовались три экстракта; сырой высушенный распылением экстракт фруктового сока T. cucurmerina L, экстракт кукурбитацина, содержащий cucurbititacin B и дигидроциркубибатин B в молярном соотношении 8: 1 и очищенный кукурбититацин B [19]. Соединения и смешанные смеси растворяли в 10% диметилсульфоксиде (ДМСО) и разбавляли средой DMEM / F12 (DMEM / F12, Gibco, Grand Island, NY, США) до желаемых концентраций перед использованием.

Линии клеток рака молочной железы человека T47D, SKBR-3, MCF-7 и нормальная линия клеток эпителия молочной железы HBL-100 были приобретены в Американской коллекции типовых культур (ATCC, Manassas, VA, США) и были культивированы в среде модифицированного орла Дульбекко (DMEM / F12, Gibco, Grand Island, NY, USA) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS, Gibco, Grand Island, NY, США), 1% стрептомицина пенициллина (Gibco, Grand Island, NY, USA) при 37 ° C в инкубаторе с 5% CO2.

Жизнеспособность клеток оценивали с помощью анализа 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолиума (МТТ), который основан на превращении МТТ в МТТ-формазан митохондриальными ферментами, как описано в другом месте [ 37]. Клетки (1 × 104 клеток / лунку) высевали в 96-луночный планшет и оставляли прикрепляться к лунке в течение ночи. Соединения добавляли к указанной конечной концентрации (1, 10, 20, 40, 60, 80 или 100 мкг / мл) и клетки инкубировали еще 48 часов. После инкубации к клеткам в течение 4 ч добавляли 10 мкл 5 мг / мл 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолия бромида (МТТ, Millipore, Billerica, MA, США) при 37 ° С с последующим добавлением 100 мкл изопропанола в 0,04 Н HCl в качестве солюбилизирующего агента. Абсорбцию при 570 нм считывали с использованием считывателя микропланшетов (сошник Beckman, Mississauga, ON, Canada), и процент выживаемости клеток рассчитывали путем деления средней абсорбции обработанных клеток на среднее количество необработанных клеток. Все эксперименты проводили в трех повторностях.

Активность теломеразы измеряли с помощью анализа на основе ПЦР на основе телячкового повторного амплификации (TRAP) [38,39] с использованием набора для обнаружения теломеразы TRAPEZE ELISA (Millipore, Billerica, MA, USA). Анализ проводили в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, 5 × 105 клеток на лунку высевали в 6-луночные планшеты и инкубировали с изолятами кукурбитацина при указанной концентрации в течение 48 часов. Затем гранулы клеток охлаждали на льду, лизировали буфером для лизиса CHAPS в течение 30 мин и центрифугировали при 12000 × g при 4 ° С в течение 20 мин. Реакционная смесь ППР TRAP содержала 1 мкг белка из каждой экстракции клеток, 1 мкл биотинилированного TS-праймера, 1 мкл RP-праймера, 1 мкл внутреннего контроля (праймер K1 и шаблон TSK1), 2,5 мМ dNTP и 2 единицы ДНК-полимеразы Taq , ПЦР проводили в течение 33 циклов при 94 ° С в течение 30 с, 55 ° С в течение 30 с, 72 ° С в течение 30 с и с последующим окончательным растяжением при 72 ° С в течение 10 мин. Продукты ПЦР разделяли электрофорезом через 10% неденатурирующих полиакриламидных гелей для определения степени теломерных повторов и количественно определяли методом ELISA для количественного определения активности теломеразы.

Для ELISA 5 мкл продукта ПЦР смешивали с 100 мкл блокирующего буфера в лунке планшета для микротитрата со стрептавидином и образцы инкубировали при 37 ° С в течение 1 часа. Блокирующий раствор полностью удаляли и лунку промывали 5 раз 250 мкл промывочного буфера. Затем в каждую лунку добавляли 100 мкл конъюгированного с пероксидазой хрена антидинитрофенила (DNP). Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин в темной камере. Раствор антитела удаляли и лунки промывали 5 раз 250 мкл промывочного буфера перед добавлением 100 мкл тетраметилбензидина (TMB). Образцы инкубировали в течение 10 мин при комнатной температуре перед добавлением 100 мкл стоп-раствора. Используя считыватель микропланшетов, количество продукта TRAP определяли путем измерения коэффициента поглощения при 450 и 690 нм (эталонная длина волны) в течение 30 минут после прекращения реакции.

Клетки (5 × 105 клеток / лунку) высевали в 6-луночные планшеты и обрабатывали кукурбитацином при различных концентрациях в течение 48 часов. Общая РНК была выделена из клеточных гранул с использованием набора RNeasy Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Германия) в соответствии с протоколом производителя. После обратной транскрипции кДНК затем амплифицировали с помощью ПЦР с помощью праймеров, показанных в таблице 2. Условия ПЦР были следующими: для hTERT и β-актина 35 циклов денатурации при 95 ° C в течение 30 с, отжиг при 59,2 ° C для 30 с и удлинение при 72 ° С в течение 30 с. Для c-Myc и β-актина 30 циклов денатурации при 95 ° C в течение 30 секунд, отжиг при 59,8 ° C в течение 30 с и растяжение при 72 ° C в течение 30 с. Продукты ПЦР разделяли электрофорезом через 0,8% агарозные гели, содержащие бромид этидия, и продукты ПЦР рассматривались под УФ-освещением. Полосы продуктов ПЦР анализировали с использованием программного обеспечения GeneSnap (SYNGENE, Frederic, MD, USA), и относительная интенсивность была рассчитана после нормализации против β-актина.

Клетки (5 × 105 клеток / лунку) высевали в 6-луночные планшеты и обрабатывали кукурбитацинами в различных концентрациях в течение 48 часов. Общая РНК была выделена из клеточных гранул с использованием набора RNeasy Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Германия) в соответствии с протоколом производителя. После обратной транскрипции кДНК затем амплифицировали с помощью ПЦР в реальном времени с использованием SYBR-зеленого цвета в сочетании с праймерами, показанными в таблице 2. ПЦР анализировали с использованием iCycler iQ Многоцветной системы обнаружения ПЦР в реальном времени (Bio-rad, Hercules, CA, USA). GAPDH использовался как внутренний контроль. Все разностные разности в выражении выражаются относительно выражения GAPDH в соответствующих образцах.

Клетки обрабатывали кукурбитацинами в различных концентрациях в течение 24 часов и собирали. Клетки промывали 1 мл холодного DPBS и фиксировали 1 мл 75% ледяного этанола. После фиксации клетки окрашивали 0,5 мл PI / РНКазы, окрашивая раствор в течение 15 мин в темноте. Окрашенные клетки подвергали анализу содержания ДНК / клеточного цикла с использованием системы цитометров FACSCaliber Flow.

Статистический анализ проводился с использованием однонаправленного ANOVA для сравнения между контрольными и обработанными клетками. Значения P

Cucurbitacin B от Trichosanthes cucumerina L оказывает ингибирующее действие на рост в клетках рака молочной железы. Наибольшее ингибирование роста наблюдалось на линии СКБР-3 с отрицательным раком молочной железы. Был рассмотрен механизм действия противоопухолевых эффектов, индуцированных cucurbitacin B. В SKBR-3, cucurbitacin B блокирует клеточный цикл при G2 / M даже при низких концентрациях. Апоптотическая индукция также предлагалась в этой линии клеток в соответствии с увеличенной фракцией subG0 после лечения. Кукурбитацин B ингибирует активность теломеразы в трех линиях клеток рака молочной железы, и очевидный ингибирующий эффект наблюдается в клетках SKBR-3, а не ER-позитивных клетках MCF-7 и T47D. Выражения hTERT и c-Myc также ингибировались cucurbitacin B в этих клетках, и снижение белка c-Myc было четко отмечено в SKBR-3. Таким образом, противоопухолевая биоактивность кукурбитацина В обнаруживается путем ингибирования теломеразы посредством регуляции как hTERT, так и c-Myc в клетках рака молочной железы.

Эта работа была поддержана Фондом исследований университета Махидола (Национальный бюджет), грантом проекта № 49439 для ПП. S.Du. поддерживается Комиссией по высшему образованию в Таиланде через стратегические стипендии для сети пограничных исследований для совместной кандидатуры доктора философии. Программа.

Влияние кукурбитацина В на рост клеток рака молочной железы человека. SKBR-3, MCF-7 и HBL-100 обрабатывали кукурбитацином B при конечных концентрациях 1, 10, 20, 40, 60, 80 и 100 мкг / мл. Жизнеспособность клеток определяли методом МТТ. Процент жизнеспособных клеток рассчитывали, определяя поглощение клеток без лечения кукурбитацином В как 100%. Результаты являются средними из трех независимых экспериментов.

Морфологические изменения в клетках рака молочной железы, индуцированные cucurbitacin B. Upper (1, 2, 3, и 4): фазово-контрастные микрофотографии необработанных клеток SKBR-3, HBL-100, MCF-7 и T47D. Нижние (5, 6, 7 и 8): клетки SKBR3, HBL-100, MCF-7 и T47D, обработанные cucurbitacin B на IC50 в течение 48 часов.

Влияние кукурбитацина В на активность теломеразы в клетках рака молочной железы. (A) клетки SKBR-3 обрабатывали cucurbitacin B при конечных концентрациях 0, 2, 4, 6, 8 и 10 мкг / мл, в то время как клетки T47D, MCF-7 и HBL-100 обрабатывали cucurbitacin B в конечных концентрациях 0, 20, 40, 60, 80 и 100 мкг / мл. Активность теломеразы анализировали с помощью анализа TRAP, а уменьшение активности теломеразы интерпретировалось с помощью уменьшенных интенсивностей полос (ступенчатые полоски с шагом 6 bp (TTAGGG)). (B) Относительную активность теломеразы клеток после лечения кукурбитацином В определяли с помощью анализа TRAPEZE-ELISA, а относительные уровни теломеразы выражали как% относительной активности. * P

Выражение hTERT и c-Myc RT-PCR. Клетки T47D, HBL-100, MCF-7 и SKBR-3 инкубировали в течение 48 ч с указанными концентрациями кукурбитацина В и РНК экстрагировали для ОТ-ПЦР. Были проанализированы уровни экспрессии hTERT и c-Myc. Полосы, представляющие hTERT и c-Myc, показаны (A) и количественными интенсивностями каждой полосы после нормализации с β-актином (B). * P

Выражение hTERT и c-Myc. (A) клетки T47D, HBL-100, MCF-7 и SKBR-3 инкубировали с указанными концентрациями cucurbitacin B в течение 48 часов, а количественные уровни экспрессии hTERT и c-Myc анализировали с помощью RT-PCR в реальном времени, как описано в текст. Показанные результаты представляют собой среднее значение трех независимых экспериментов. (B) экспрессию белка c-Myc. SKBR-3 и HBL-100 обрабатывали cucurbitacin B в течение 24 часов. Лизаты клеток разделяли SDS-PAGE и анализировали с помощью Вестерн-блоттинга.

Влияние кукурбитацина В на клеточный цикл в клетках рака молочной железы человека. Клетки SKBR3 и HBL-100 инкубировали с кукурбитацином В в течение 24 часов. Распределение стадий клеточного цикла было обнаружено окрашиванием пропидиум иодидом (PI). Показанные результаты представляют собой среднее значение трех независимых экспериментов (А). Процентные клетки в каждой фазе клеточного цикла представлены в виде бар-графов (B). Блокада при G2 / M и апоптотическая индукция наблюдались в SKBR-3 после инкубации с низкой концентрацией (5, 10 мкг / мл) кукурбитацина B.

Полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC50) трех кукурбитацинов, экстрагированных из T. cucumerina L. (спрей сушат, крупное соединение cucurbitacin B и чистый кукурбитацин B) в клеточных линиях рака молочной железы.

Последовательности праймеров для RT-PCR и PCR в реальном времени.

Смотрите также

• 
  Дистальный рефлюкс эзофагит что это такое
• 
  Гуинплен что это такое
• 
  Шпунтованная доска для пола что это такое
• 
  Кинезитерапия что это такое упражнения
• 
  Аппаратный лимфодренажный массаж что это такое
• 
  Эркерные окна что это такое
• 
  Фотокаталитический фильтр что это такое
• 
  Технология триз в доу что это такое
• 
  Женские слиперы что это такое
• 
  Рамп стейк что это такое
• 
  Гидрогелевая маска для лица что это такое