Анализ ифа что это такое


ИФА что это такое? | 1ANALIZ.RU

Рубрика: анализ крови Опубликовано 12.11.2017   ·   Комментарии: Комментарии к записи ИФА анализ отключены   ·   На чтение: 7 мин   ·   Просмотры:

- 2 721

ИФА анализ — диагностика инфекционных болезней

Главная проблема при лечении инфекционных заболеваний заключается в определении их возбудителей. От этого зависит правильный выбор специфических препаратов и быстрота выздоровления пациента.

ИФА —  иммуноферментный анализ крови

Достоверным экспресс-способом диагностики является иммуноферментный анализ (ИФА) крови. Он основан на выделении специфических антител, которые всегда образуются в организме на внедрение чужеродного агента.

Какие бывают антитела

Существуют пять типов антител: иммуноглобулины (Ig) класса A, M, G, E, D. Они образуются на разных стадиях иммунного ответа, поэтому служат не только для определения вида возбудителя, но и для выявления стадии заболевания (острая, хроническая, рецидив). Для понимания сути исследования коротко остановимся на принципах работы иммунной системы.

Стадии иммунного ответа

Когда в организме появляется антиген, которым выступает любой инфекционный агент (вирус, бактерия, простейшее) или собственные клетки, распознающиеся организмом как чужеродные, запускается сложная реакция иммунной системы.

В-лимфоциты трансформируются в плазматические клетки и начинают вырабатывать антитела различных видов:

  1. Ig A — синтезируются клетками слизистых оболочек через две недели после попадания антигена. Большая часть концентрируется на слизистых дыхательных путей, пищеварительного тракта, мочеполовой системы. Только 20% циркулирует в крови и обнаруживается с помощью ИФА.
  2. Ig M — образуются с пятого дня после начала иммунной реакции. Максимума достигают через 14 дней, затем постепенно уменьшаются и исчезают через 6 недель.
  3. Ig G — основные «защитники», отвечающие за полное уничтожение антигена. Синтезируются через 2 недели и сохраняются в крови обычно на всю жизнь.
  4. Ig Е — используются для диагностики паразитарных заболеваний.
  5. Ig D — повышаются при иммунодефицитных состояниях, аутоиммунных процессах, при беременности.

Иммуноглобулины имеют свойство «склеиваться» с соответствующими антигенами, образуя комплексы Аг-Ат. Именно на выявлении таких комплексов с помощью биохимической реакции основан иммуноферментный анализ.

ИФА анализ

Трактовка ИФА (общие принципы)

В зависимости от сочетания различных типов иммуноглобулинов врачи делают выводы о стадии заболевания. Приводим характерные варианты в таблице.

Сочетание IgТрактовка
Нет никаких классов антителИммунитет к данной инфекции отсутствует
Только Ig G, Ig A и Ig M отрицательныеПеренесенная инфекция, стадия выздоровления или поствакцинальный иммунитет
Ig M положительные, Ig G, Ig A — положительные или отрицательныеОстрая стадия заболевания
Ig M отрицательные, Ig G, Ig A — положительные или отрицательныеХроническая инфекция
Ig G, Ig A и Ig M положительныеОбострение хронической патологии

Иммуноферментный анализ дает не только информацию о типе антител в крови, но и определяет их количество (титр). Для каждого заболевания есть свой титр антител, по которому судят о степени тяжести и остроте заболевания.

Как проводится ИФА

Исследование методом ИФА назначают в следующих случаях:

  • Диагностика многих вирусных инфекций (герпетических, гепатитов, ВИЧ).
  • Выявление инфекций, вызываемых бактериями (коклюш, туберкулез, дифтерия, сальмонеллез, бруцеллез, легионеллез). Все неспецифические воспалительные процессы, за которые отвечает кокковая флора (стафилококки и стрептококки) подтверждаются этим методом.
  • Диагностика половых инфекций (сифилис, трихомониаз, хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз).
  • В комплексной диагностике паразитарных инвазий (эхинококкоз, токсокароз, пневмоцистоз) и простейших (амебиаз, токсоплазмоз, криптоспоридоз).
  • При аллергических реакциях и подтверждения некоторых опухолевых процессов.
  • В эндокринологии для исследования гормонов щитовидной железы.
  • Перед плановым хирургическим вмешательством.
  • Для оценки эффективности проводимого лечения.

Чаще всего для анализа используется венозная кровь. Но существует ИФА околоплодных вод, жидкой части стекловидного тела, спинномозговой жидкости.

Подготовка к исследованию

В основе ИФА лежит биохимическая реакция, поэтому метод чувствителен ко многим факторам. Для получения достоверных результатов нужно придерживаться следующих правил:

  • Кровь сдают только натощак (последний прием пищи за 12 часов, воду запрещено пить за час до анализа).
  • За три дня прекращают прием алкоголя, курить не стоит за час до исследования.
  • За несколько недель прекращают принимать антибиотики, противовирусные, антигистаминные и некоторые другие препараты. Полный список нужно уточнять у лечащего врача.

Перед забором материала человек должен успокоиться. Стрессы и тяжелая физическая нагрузка тоже искажают результаты.

Виды ИФА

В зависимости от технологии исследования выделяют три типа ИФА:

  1. Прямой — в исследуемый биологический материал добавляют помеченные специфические антитела.
  2. Непрямой — сначала антиген адсорбируется на полистирольном планшете, затем к нему добавляют специфические антитела и исследуют полученный комплексы Аг-Ат.
  3. «Сэндвич»-тип, когда на планшете сорбируются не антигены, а антитела, а затем к ним добавляют антиген. Таким способом делают анализы на ВИЧ, гепатиты, герпес, токсоплазмоз, цитомегаловирус.

Антитела изначально помечают ферментом пероксидазой, а затем в кровь добавляют специфический хромоген. Это приводит к образованию окрашенного соединения.

Интенсивность цвета зависит от количества антител к данному возбудителю. Количественный подсчет проводят по специальным формулам.

Плюсы и минусы метода

Метод иммуноферментного анализа очень широко распространен в лабораторной диагностике различных заболеваний. Он имеет бесспорные преимущества:

  • Небольшая стоимость, что дает возможность делать ИФА неоднократно, оценивая динамику болезни и эффективность терапии.
  • Высокая точность, достигающая 90%. Для иммунологических методов это считается очень высокой чувствительностью.
  • Быстрота получения результата. Экспресс-ответ дается уже через несколько часов. Иногда это может спасти жизнь пациенту.
  • Возможность массового исследования в очагах инфекций во время эпидемий.
  • Автоматическая обработка результатов, что сводит к минимуму субъективный фактор квалификации лаборанта.
  • Малая инвазивность и полная безопасность для здоровья человека.

Эти преимущества позволяют начать специфическое лечение инфекционного заболевания на самых ранних стадиях, что значительно улучшает прогноз и скорость выздоровления.

ВАЖНО! Главный недостаток ИФА — вероятность получения ложноположительных результатов. Поэтому его никогда не используют как единственный метод подтверждения серьезных диагнозов: ВИЧ, сифилис, туберкулез и других.

ИФА на сифилис

Диагностика этого тяжелого заболевания с помощью ИФА осуществляется только на первом этапе — скрининговое исследование больших групп пациентов.

Вместе с реакцией Вассермана проводят при оформлении медицинской книжки, плановой госпитализации, беременности, диспансеризации и профилактических осмотрах.

С помощью иммуноферментного анализа выясняют время заражения и стадию болезни:

  1. Ig M положительные — первичное заражение или обострение хронического процесса.
  2. Ig A положительные — инфицирование более месяца назад, обычно острый процесс.
  3. IG G положительные — при отрицательных Ig M свидетельствуют о недавно проведенном лечении, при положительных остальных классах антител — о разгаре болезни.

Если при ИФА прокрашивание комплексов на планшете не совпадает по интенсивности с контрольным, то говорят о сомнительном результате и назначают повторную процедуру.

Окончательный диагноз ставится только на основании комплекса лабораторных и клинических исследований.

ИФА на ВИЧ

Иммуноферментный анализ на ВИЧ входит в перечень стандартных первоочередных тестов. При его проведении следует учитывать деликатность проблемы и соблюдать конфиденциальность.

Сроки проведения должны учитывать наличие инкубационного периода (антитела не обнаруживаются), который при этой патологии очень разнообразный.

Исследовать кровь на ВИЧ нужно через 45-90 дней после предполагаемого инфицирования (незащищенного полового акта, переливания крови и других инвазивных медицинских манипуляций).

Алгоритм постановки диагноза ВИЧ на основании данных ИФА.

Такая сложная система перепроверки призвана полностью исключить диагностические ошибки, которые являются сильнейшей душевной травмой для пациента и могут закончиться трагически (известны случаи суицида при постановке этого диагноза).

Обнаружение хламидий

ИФА дает возможность подтвердить наличие хламидиоза, который часто протекает бессимптомно или имеет стертые проявления:

  • Ig M выявляются уже через неделю после инфицирования.
  • Ig А говорят о том, что инфекция «живет» в организме больше месяца.
  • Ig G — хронический процесс. Так как этот класс Ат остается у человека на всю жизнь, следует различать само заболевание или постинфекционный иммунитет, сохраняющийся после успешного лечения. Для этого применяют количественную оценку результатов.

На этих же принципах основана и диагностика ЦМВИ — тяжелой герпетической инфекции, которая долгое время протекает бессимптомно, но при определенных факторах (беременность, снижение иммунитета) приводит к серьезному полиорганному поражению.

Диагностика паразитарных инфекций

В многочисленной группе инфекционных заболеваний существуют некоторые возбудители, которые относятся к труднодиагностируемым. Они вызывают стертую, неспецифическую клиническую картину.

Пациенты, имея незначительные отклонения в состоянии здоровья, не сразу обращаются за врачебной помощью. При таких инфекциях часто ставятся неверные или запоздалые диагнозы. В таких ситуациях ИФА является незаменимым методом диагностики.

По повышению уровня специфических Ig Е можно заподозрить наличие в организме следующих паразитов:

  • Круглых червей (аскарид, остриц).
  • Плоских червей из класса сосальщиков (описторхоз).
  • Лямлий (дополнительный метод подтверждения диагноза).
  • Трихинелл (круглых гельминтов, вызывающих опасное заболевание трихинеллез).
  • Возбудителей лейшманиоза.
  • Амеб (отвечают за развитие тяжелых воспалений слизистой оболочки толстой кишки, которую часто «путают» с более распространенными кишечными инфекциями).
  • Токсоплазм.

Достоверность результата ИФА составляет 90%, что фактически является подтверждением заболевания при проведении дифференциальной диагностики с похожей по симптомам патологии.

- 2 721

Анализ ИФА: что это такое? зачем он нужен? плюсы и минусы метода

Анализ ИФА – что это такое? Полное наименование этого метода диагностики называется иммуноферментный анализ крови, и он основан на определении в периферической крови антител различных классов, или иммуноглобулинов, которые вырабатывает человеческий организм.

В практике врача ИФА – анализ занимает очень важное место, когда нужно диагностировать какую – либо инфекционную патологию. Этот анализ показывает не только факт наличия инфекционного заболевания, но так же и стадии патологического процесса. Также не только в отношении возбудителя метод ИФА показан к применению: он используется для диагностики аллергических состояний. Этот тест позволяет выявить проблемы в системе иммунитета, при многих заболеваниях кроветворной системы, аутоиммунных и других расстройствах.

Зачем нужен ИФА?

Все исследователи склоняются к тому, что название «антитело» выбрано слишком неудачно. Но все-таки оно отражает одну важную особенность иммуноглобулинов: они способны связывать и нейтрализовывать вредные вещества, подходя к ним как «ключик» к «замочку». Количество антител в крови отражает не только общую способность организма к защите от инфекций, но так же и способность к образованию циркулирующих иммунных комплексов, которые могут возникнуть при различных аутоиммунных болезнях, например, при ревматоидном артрите или болезни Бехтерева.

Комплексы антител с антигеном (вредным фактором инфекционной природы) – это результат ответной реакции организма на внедрение «чужаков». Поэтому иммунитет учится распознавать их, с помощью лимфоцитов обучает иммунокомпетентные клетки, и они способны продуцировать высокоспецифичные антитела. Так, антитела к вирусу Эпштейна устроены иначе, чем антитела к вирусному гепатиту С, или к кишечной палочке, а anti-HAV, или антитела к вирусу гепатита А – иначе, чем аутоантитела к хрящевой ткани. Именно высокая специфичность, и соответствие иммуноглобулинов инфекционному возбудителю и делает высокую ценность такому лабораторному исследованию, как иммуноферментный анализ крови.

После прочной связи антител и антигенов в единый комплекс (антиген-антитело) вредные факторы утрачивают свою способность к повреждению тканей организма, и затем эти комплексы или нейтрализуются, или лизируются с помощью фагоцитоза нейтрофилами, и, «перевариваясь», покидают организм.

Анализ крови ИФА может показать, с каким определенным болезнетворным фактором сталкивается наш организм, на какой стадии находится процесс взаимодействия организма с инфекцией. После проведенного исследования врач может с высокой степенью уверенности сделать прогноз, назначить определенные виды лечения, а в некоторых случаях даже может определить продолжительность жизни пациента, особенно при хронических вирусных инфекциях, например, при вирусном гепатите С.

Но в некотором случае, в организме вообще нет никаких инфекционных агентов, и антитела по «ошибке» набрасываются на собственные органы и ткани, поскольку иммунокомпетентные клетки получили ложную информацию. Такие заболевания называют аутоиммунными, и иммуноферментный анализ крови также помогает распознать эту хроническую патологию, и помочь в диагностике.

Подробнее об иммуноглобулинах

Всего человеческий организм вырабатывает 5 известных классов антител, которые обозначаются Ig (что расшифровывается как иммуноглобулины), которые принадлежат классам A, M, G, E, и D. Все они имеют большое значение в интерпретации результатов ИФА – анализа. Конечно, комплексов значительно больше, и далеко не все они еще открыты. Но в диагностике разных болезней наиболее ценны первые три типа антител. Анализ крови на ИФА использует максимум информации: момент появления антител в крови, изменение их концентрации в зависимости от времени, срок исчезновения, а также тип специфических антител.

Так, участниками первичного, острого инфекционного процесса являются иммуноглобулины класса М, которые всегда свидетельствуют об острой фазе, даже в том случае, когда клинически болезнь протекает стерто. Характерный пример – безжелтушная форма острого вирусного гепатита В или С. Иммуноферментный анализ крови на гепатиты покажет, что у человека есть острый гепатит, и такие симптомы, как боли в подреберье, сухость во рту, ломота в суставах и другие неспецифические симптомы становятся легко понятными.

Спустя несколько недель эти антитела обнаруживаются во все более исчезающей концентрации, уступая иммуноглобулинам класса G. Они определяются в крови долгие месяцы, и даже годы, и свидетельствуют или о выздоровлении, и тогда могут оставаться пожизненно, формируя прочный иммунитет. Это свидетельствует о мощной защите от антигенов возбудителей. Так, именно антитела этого класса делают человека невосприимчивым к повторным случаям заболевания сибирской язвой и чумой. Но бывают случаи, когда эти антитела не препятствуют при наличии антигенов их вредному влиянию. В таком случае речь может идти о повышении активности хронического процесса.

Что касается IgE, то он имеет применение в диагностике различных паразитарных инвазий и аллергических состояний, а IgD выполняет вспомогательную функцию: метод иммуноферментного анализа позволяет использовать его в комплексной диагностике бронхиальной астмы и аутоиммунных состояний. Конечно, расшифровка ИФА-анализа значительно более сложная, и специалисты – иммунологи могут рассказать гораздо больше. По каким же показаниям пациент может самостоятельно обратиться в лабораторию, чтобы выполнить исследования?

Показания к анализу

Прежде всего, нужно понять, что нет такого анализа – «просто кровь на ИФА». Бывает анализ на гепатиты, бывает – на уреаплазму, или на сифилис. Таким образом, сдавать кровь на ИФА можно только прицельно, «заказав» поиск нужной инфекции. Просто так непонятно, зачем сдавать кровь из вены, не зная, что нужно искать. Вот почему метод иммуноферментного анализа – это мощный инструмент, который важен в диагностическом поиске. Только врач может назначить этот анализ, поскольку он целенаправленно ищет инфекцию, для которой характерны данные симптомы. Обычный человек, конечно, может заказать 150 анализов крови методом ИФА на «все инфекции», но это будет неразумным и затратным подходом к диагностике, сдавая анализы на все подряд.

Наиболее востребовано назначение этих анализов при следующих заболеваниях и состояниях:

Различные микробные и вирусные инфекции, симптомы инфекционных заболеваний – сыпь, лихорадка, желтуха, увеличение лимфоузлов, синдром диареи, подозрения на заболевания, передающиеся половым путем.

Помогает методика ИФА при определении уреаплазмы и микоплазмы, сифилиса и хламидиоза, туберкулеза и цитомегаловирусной инфекции, герпеса, вирусных гепатитов и вируса Эпштейн-Барра. В настоящее время около 500 различных инфекций можно верифицировать с помощью метода иммуноферментного анализа,

При подозрении на глистные инвазии, и наличии таких симптомов, как аллергия, эозинофилия в крови, кожный зуд, диспепсия и похудение,

Подробнее о данном виде исследования читайте в статье «Анализ крови на глисты и паразиты: методы исследований, ИФА, кому и как сдавать?».

При выявлении аллергенов, которые вызывают отек Квинке, крапивницу, одышку и приступы астматического удушья.

В этом случае выявляются конкретные Ig E, и существуют целые аллергопанели, которые помогут точно определить аллерген – кальмары или креветки, сухой корм для рыбок, содержащий дафнии, домашнюю пыль. При поллинозе этот метод позволяет найти точно тот злак, кустарник или дерево, который вызывает весеннее чихание и слезотечение,

  • Показан этот метод при подозрении на аутоиммунные заболевания, которые лечат врачи-ревматологи,
  • При подозрении на опухолевый рост и активность,
  • В комплексной диагностике иммунодефицитных состояний и ВИЧ – инфекции,
  • При заболеваниях крови и в трансплантологии, для комплексной оценки иммунитета, например, перед пересадкой печени или почек.

Теперь мы знаем, зачем нужно сдавать кровь на ИФА. Выясним, как проводится это исследование.

Как выполняется анализ?

Классический материал – это венозная кровь пациента. Но при необходимости, можно исследовать самую разную жидкость и ткань: слизь, слюну, цервикальный секрет, цереброспинальную жидкость, стекловидное тело глаза, содержимое пупочного канатика и околоплодные воды. Важно помнить, что прием различных лекарств, избыточная физическая активность, злоупотребление алкоголем, может сильно исказить результаты анализов.

Существуют несколько методов, которые позволяют проводить этот анализ. Чаще всего в клинических лабораториях используют фотометрический способ. При этом используют меченые краской вещества, после реакции которых, и маркировки комплекса антиген-антитело изменяется их окраска. В результате изменяется и оптическая плотность раствора, и это изменение прямо пропорционально концентрации обнаруженных антител. Лабораторные спектрофотометры успешно используются для измерения этих отклонений.

Также для проведения ИФА используется флуориметрический метод, основой которого является флуоресценция. Здесь тоже высчитывается интенсивность флуоресцирующих веществ, которые осели на исследуемых образцах.

Наконец, в иммунологическом анализе используют электрохимические способы определения активности ферментов, которые являются особыми метками для антигенов и антител. Сам иммуноферментный метод чаще всего подразумевает использование таких ферментов, как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена и галактозидаза. Эти ферменты способны связываться с антителами или антигенами и маркировать их вследствие своей активности.

Минусы метода и его плюсы

К очевидным «плюсам» можно отнести демократичную себестоимость анализа, возможность его скринингового использования у широких групп населения, например, при обследовании беременных на ВИЧ. Метод иммуноферментного анализа достаточно спецефичен, и может применяться для контроля качества лечения многих заболеваний. Немаловажно, что анализ готовится быстро, и является простым и безопасным для пациента.

Существует, однако, много «подводных камней». Так, если иммуноглобулины не выявлены, то это еще не говорит о 100% отсутствии заболевания. Ведь на фоне иммунодефицита у организма просто может не «быть сил» на синтез антител. Если у пациента тяжелая печеночная недостаточность, то печень просто не в силах синтезировать белок – строительный материал для антител. В таком случае результат называют серонегативным, и требуется подтверждение инфекции уже прямым и самым совершенным методом исследования – ПЦР, или полимеразной цепной реакцией. В отличие от иммуноферментного анализа, при этом методе выявляется не реакция организма на инфекционный процесс (которая может быть дефектной, или отсутствовать вовсе), при ПЦР определяется непосредственно наследственный материал, или находится сам возбудитель.

Метод иммуноферментного анализа может дать ошибку на фоне многих хронических болезней, на фоне иммуносупрессивной терапии. В гельминтологии же и паразитологии существует закон: только обнаружение паразита, или его яиц, является абсолютно надежным способом постановки диагноза. ИФА может давать перекрестные и ложноположительные методы, реагируя на многие нормальные события в жизни пациента.

В заключение нужно сказать, что метод иммуноферментного анализа является мощным, но вспомогательным способом лабораторной диагностики многих заболеваний. Но в любом случае, диагноз должен выставляться на основании многих факторов: жалоб и анамнеза пациента, данных осмотра, других вспомогательных и инструментальных методов диагностики.

Загрузка...

Анализ ИФА – что это такое? Что показывает ИФА (ммуноферментный анализ крови)?

Лабораторные анализы помогают врачам не только выявить заболевание, но и определить способность организма противостоять инфекциям. Кроме того, некоторые позволяют установить и стадию патологии. Примером такого исследования является ИФА, который часто используется в диагностике.

Метод ИФА – что это такое?

Иммуноферментный анализ (ИФА) – лабораторное исследование, направленное на выявление в образце крови специфических антител белковой природы к определенным антигенам. Первостепенное значение среди множества антител имеют иммуноглобулины, которые способны существовать в составе иммунокомплексов. Синтезируются они в организме в результате нейрогуморальных реакций иммунной системы после внедрения в организм патогенного агента.

На каждый вид патогенных клеток вырабатываются свои антитела – в качестве ответной реакций. Подробная их диагностика и анализ помогают определить непосредственно тип патологии, которая может присутствовать в организме человека, не проявляя себя. Твердофазный иммуноферментный анализ выявляет скрытые, вялотекущие патологические процессы, определяет их стадию.

Что показывает анализ ИФА?

Разобравшись с тем, что обозначают термином анализ ИФА, что это такое, необходимо отметить основное диагностическое значение исследования. Данный метод используется для определения присутствия в образце крови антигенов возбудителя инфекции и антител, которые являются результатом активации иммунной системы. Среди важных классов антител необходимо выделить IgA, IgM, IgG.

С помощью ИФА удается выявить такие патологии, как ВИЧ, сифилис, хламидиоз. Нередко используется иммуноферментный анализ крови на паразитов, что помогает врачам определить присутствие патогена даже в неактивной стадии, в состоянии цисты, когда токсины практически не выделяются. ИФА анализ на ВИЧ, 4 поколение определяет болезнь на начальной стадии. Кроме того, в отдельных случаях ИФА используется для контроля проведенной вакцинации, оценки ее эффективности.

Когда нужен иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ крови назначается при необходимости дифференциальной диагностики, постановки окончательного диагноза. Он помогает врачам выявить скрытые патологии. Кроме того, назначаться ИФА может и для оценки уровня иммунной реакции после проведения накануне вакцинации. В большинстве случаев анализ ИФА (что это такое, описано выше) назначается при наличии подозрений на следующие типы патологий:

Кроме того, ИФА на определенные типы иммуноглобулинов может проводиться и при:

  • ревматоидном артрите;
  • сепсисе;
  • циррозе печени;
  • хронических гнойных отитах;
  • пневмонии;
  • менингите;
  • синусите;
  • ВИЧ.

Как проводится иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ, ИФА, проводится путем исследования образца забранной крови. На поверхность предварительно подготовленной специальной планшетки помещают небольшое количество сыворотки крови и очищенного антигена. Соединяя их, наблюдают за происхождением реакции в микроскоп. Антиген и антитело одного вида образует комплекс. Для диагностики его образования проводят дополнительное окрашивание. По интенсивности произошедшего окрашивания делают выводы относительно концентрации иммуноглобулинов в образце сыворотки крови пациента.

Анализ методом ИФА (что это такое, вы уже знаете) чувствителен даже к небольшому количеству иммуноглобулинов, обладает высокой специфичностью. В результате врачи могут с его помощью проводить точную дифференциальную диагностику заболеваний со схожей клинической картиной. Сама процедура анализа длится недолго, поэтому результат исследования можно узнать в тот же день. При необходимости срочной диагностики получить ответ можно спустя 2–3 часа с момента забора крови.

Иммуноферментный анализ крови – подготовка

Метод иммуноферментного анализа перед его проведением требует от пациента некоторой подготовки. В качестве исследуемого материала выступает венозная кровь. Забор ее осуществляется исключительно в утренние часы, натощак. Перед прохождением процедуры пациенту требуется избегать эмоциональных перегрузок, стрессовых ситуаций, исключить физические нагрузки. Для получения объективных результатов исследования перед тем, как сдавать анализ ИФА на хламидии и другие инфекции необходимо:

  1. За сутки до анализа из рациона исключают жирные блюда, копчености и алкоголь.
  2. Перед исследованием не курить.
  3. Последний прием пищи должен происходить накануне анализа с интервалом не менее 8 часов до предполагаемого времени исследования.

Иммуноферментный анализ – забор материала

Анализ методом ИФА предполагает забор венозной крови в качестве биоматериала для исследования. Осуществляется процедура в условиях лаборатории. Из локтевой вены с помощью одноразового шприца забирается образец крови в объеме 5–10 мл. Нередко используют специальные вакуумные пробирки, после подсоединения к которым иглы кровь самостоятельно заполняет емкость. Полученный образец маркируется соответствующим образом и отправляется для дальнейшего обследования. Чаще результат исследования известен на следующий день.

Анализ крови ИФА – расшифровка

Расшифровка анализа ИФА проводится исключительно специалистом. При этом учитываются результаты других исследований, проведенных накануне. Стоит отметить, что ИФА имеет две модификации – качественную и количественную оценку. Положительный результат качественной оценки ИФА свидетельствует о наличии в организме антител к определенному типу возбудителя. В дальнейшем назначается количественная оценка, которая направлена на установление степени болезни, стадии. При отрицательном анализе говорят об отсутствии патогенов в организме малыша.

Анализ ИФА отрицательный

Отрицательный результат анализа не всегда указывает на отсутствие патологии. Так, анализ ИФА на сифилис может быть отрицательным в стадии ремиссии, когда патоген а организме находится в малой концентрации после проведенного курса терапии. Учитывая этот вариант, врачи проводят дополнительное исследование спустя некоторое время. Кроме того, отрицательный результат может наблюдаться и после недавнего инфицирования, когда антитела еще не выработались организмом в диагностической концентрации.

Анализ крови ИФА положительный

При положительном результате анализа проводится определение титра антител, их класса. В большинстве случаев для диагностики инфекционных процессов определяют концентрацию IgG и IgM. Образуются они в разное время.

Проводимый таким методом анализ ИФА на ВИЧ помогает определить не только наличие патологии, но и ее продолжительность:

  • повышение активности IgM при отсутствии IgG – заражение произошло недавно, процесс в острой стадии;
  • высокая активность IgG и отсутствие IgM – патология перешла в хроническую стадию (заражение произошло больше 6 месяцев назад).

 

Иммуноферментный анализ крови ИФА: что это такое? расшифровка

Анализ ИФА – что это такое? Полное наименование этого метода диагностики — иммуноферментный анализ крови и он основан на определении в периферической крови антител различных классов, или иммуноглобулинов, которые вырабатывает человеческий организм.

В практике врача ИФА – анализ занимает очень важное место, когда нужно диагностировать какую – либо инфекционную патологию. Этот анализ показывает не только факт наличия инфекционного заболевания, но так же и стадии патологического процесса. Также не только в отношении возбудителя метод ИФА показан к применению: он используется для диагностики аллергических состояний. Этот тест позволяет выявить проблемы в системе иммунитета, при многих заболеваниях кроветворной системы, аутоиммунных и других расстройствах.

Зачем нужен ИФА?

Все исследователи склоняются к тому, что название «антитело» выбрано слишком неудачно. Но все-таки оно отражает одну важную особенность иммуноглобулинов: они способны связывать и нейтрализовывать вредные вещества, подходя к ним как «ключик» к «замочку». Количество антител в крови отражает не только общую способность организма к защите от инфекций, но так же и способность к образованию циркулирующих иммунных комплексов, которые могут возникнуть при различных аутоиммунных болезнях, например, при ревматоидном артрите или болезни Бехтерева.

Комплексы антител с антигеном (вредным фактором инфекционной природы) – это результат ответной реакции организма на внедрение «чужаков». Поэтому иммунитет учится распознавать их, с помощью лимфоцитов обучает иммунокомпетентные клетки, и они способны продуцировать высокоспецифичные антитела. Так, антитела к вирусу Эпштейна устроены иначе, чем антитела к вирусному гепатиту С, или к кишечной палочке, а anti-HAV, или антитела к вирусу гепатита А – иначе, чем аутоантитела к хрящевой ткани. Именно высокая специфичность, и соответствие иммуноглобулинов инфекционному возбудителю и делает высокую ценность такому лабораторному исследованию, как иммуноферментный анализ крови.

После прочной связи антител и антигенов в единый комплекс (антиген-антитело) вредные факторы утрачивают свою способность к повреждению тканей организма, и затем эти комплексы или нейтрализуются, или лизируются с помощью фагоцитоза нейтрофилами, и, «перевариваясь», покидают организм.

Анализ крови ИФА может показать, с каким определенным болезнетворным фактором сталкивается наш организм, на какой стадии находится процесс взаимодействия организма с инфекцией. После проведенного исследования врач может с высокой степенью уверенности сделать прогноз, назначить определенные виды лечения, а в некоторых случаях даже может определить продолжительность жизни пациента, особенно при хронических вирусных инфекциях, например, при вирусном гепатите С.

Но в некотором случае, в организме вообще нет никаких инфекционных агентов, и антитела по «ошибке» набрасываются на собственные органы и ткани, поскольку иммунокомпетентные клетки получили ложную информацию. Такие заболевания называют аутоиммунными, и иммуноферментный анализ крови также помогает распознать эту хроническую патологию, и помочь в диагностике.

Подробнее об иммуноглобулинах

Всего человеческий организм вырабатывает 5 известных классов антител, которые обозначаются Ig (что расшифровывается как иммуноглобулины), которые принадлежат классам A, M, G, E, и D. Все они имеют большое значение в интерпретации результатов ИФА – анализа. Конечно, комплексов значительно больше, и далеко не все они еще открыты. Но в диагностике разных болезней наиболее ценны первые три типа антител. Анализ крови на ИФА использует максимум информации: момент появления антител в крови, изменение их концентрации в зависимости от времени, срок исчезновения, а также тип специфических антител.

Так, участниками первичного, острого инфекционного процесса являются иммуноглобулины класса М, которые всегда свидетельствуют об острой фазе, даже в том случае, когда клинически болезнь протекает стерто. Характерный пример – безжелтушная форма острого вирусного гепатита В или С. Иммуноферментный анализ крови на гепатиты покажет, что у человека есть острый гепатит, и такие симптомы, как боли в подреберье, сухость во рту, ломота в суставах и другие неспецифические симптомы становятся легко понятными.

Спустя несколько недель эти антитела обнаруживаются во все более исчезающей концентрации, уступая иммуноглобулинам класса G. Они определяются в крови долгие месяцы, и даже годы, и свидетельствуют или о выздоровлении, и тогда могут оставаться пожизненно, формируя прочный иммунитет. Это свидетельствует о мощной защите от антигенов возбудителей. Так, именно антитела этого класса делают человека невосприимчивым к повторным случаям заболевания сибирской язвой и чумой. Но бывают случаи, когда эти антитела не препятствуют при наличии антигенов их вредному влиянию. В таком случае речь может идти о повышении активности хронического процесса.

Что касается IgE, то он имеет применение в диагностике различных паразитарных инвазий и аллергических состояний, а IgD выполняет вспомогательную функцию: метод иммуноферментного анализа позволяет использовать его в комплексной диагностике бронхиальной астмы и аутоиммунных состояний. Конечно, расшифровка ИФА-анализа значительно более сложная, и специалисты – иммунологи могут рассказать гораздо больше. По каким же показаниям пациент может самостоятельно обратиться в лабораторию, чтобы выполнить исследования?

Показания к анализу

Прежде всего, нужно понять, что нет такого анализа – «просто кровь на ИФА». Бывает анализ на гепатиты, бывает – на уреаплазму, или на сифилис. Таким образом, сдавать кровь на ИФА можно только прицельно, «заказав» поиск нужной инфекции. Просто так непонятно, зачем сдавать кровь из вены, не зная, что нужно искать. Вот почему метод иммуноферментного анализа – это мощный инструмент, который важен в диагностическом поиске. Только врач может назначить этот анализ, поскольку он целенаправленно ищет инфекцию, для которой характерны данные симптомы. Обычный человек, конечно, может заказать 150 анализов крови методом ИФА на «все инфекции», но это будет неразумным и затратным подходом к диагностике, сдавая анализы на все подряд.

Наиболее востребовано назначение этих анализов при следующих заболеваниях и состояниях:

Различные микробные и вирусные инфекции, симптомы инфекционных заболеваний – сыпь, лихорадка, желтуха, увеличение лимфоузлов, синдром диареи, подозрения на заболевания, передающиеся половым путем.

Помогает методика ИФА при определении уреаплазмы и микоплазмы, сифилиса и хламидиоза, туберкулеза и цитомегаловирусной инфекции, герпеса, вирусных гепатитов и вируса Эпштейн-Барра. В настоящее время около 500 различных инфекций можно верифицировать с помощью метода иммуноферментного анализа;

При подозрении на глистные инвазии, и наличии таких симптомов, как аллергия, эозинофилия, кожный зуд, диспепсия и похудение;

Подробнее о данном виде исследования читайте в статье «Анализ крови на глисты и паразиты: методы исследований, ИФА, кому и как сдавать?».

При выявлении аллергенов, которые вызывают отек Квинке, крапивницу, одышку и приступы астматического удушья.

В этом случае выявляются конкретные Ig E, и существуют целые аллергопанели, которые помогут точно определить аллерген – кальмары или креветки, сухой корм для рыбок, содержащий дафнии, домашнюю пыль. При поллинозе этот метод позволяет найти точно тот злак, кустарник или дерево, который вызывает весеннее чихание и слезотечение;

  • Показан этот метод при подозрении на аутоиммунные заболевания, которые лечат врачи-ревматологи;
  • При подозрении на опухолевый рост и активность;
  • В комплексной диагностике иммунодефицитных состояний и ВИЧ – инфекции;
  • При заболеваниях крови и в трансплантологии, для комплексной оценки иммунитета, например, перед пересадкой печени или почек.

Теперь мы знаем, зачем нужно сдавать кровь на ИФА. Выясним, как проводится это исследование.

Как выполняется анализ?

Классический материал – это венозная кровь пациента. Но при необходимости, можно исследовать самую разную жидкость и ткань: слизь, слюну, цервикальный секрет, цереброспинальную жидкость, стекловидное тело глаза, содержимое пупочного канатика и околоплодные воды. Важно помнить, что прием различных лекарств, избыточная физическая активность, злоупотребление алкоголем, может сильно исказить результаты анализов.

Существуют несколько методов, которые позволяют проводить этот анализ. Чаще всего в клинических лабораториях используют фотометрический способ. При этом используют меченые краской вещества, после реакции которых, и маркировки комплекса антиген-антитело изменяется их окраска. В результате изменяется и оптическая плотность раствора, и это изменение прямо пропорционально концентрации обнаруженных антител. Лабораторные спектрофотометры успешно используются для измерения этих отклонений.

Также для проведения ИФА используется флуориметрический метод, основой которого является флуоресценция. Здесь тоже высчитывается интенсивность флуоресцирующих веществ, которые осели на исследуемых образцах.

Наконец, в иммунологическом анализе используют электрохимические способы определения активности ферментов, которые являются особыми метками для антигенов и антител. Сам иммуноферментный метод чаще всего подразумевает использование таких ферментов, как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена и галактозидаза. Эти ферменты способны связываться с антителами или антигенами и маркировать их вследствие своей активности.

Минусы метода и его плюсы

К очевидным «плюсам» можно отнести демократичную себестоимость анализа, возможность его скринингового использования у широких групп населения, например, при обследовании беременных на ВИЧ. Метод иммуноферментного анализа достаточно спецефичен, и может применяться для контроля качества лечения многих заболеваний. Немаловажно, что анализ готовится быстро, и является простым и безопасным для пациента.

Существует, однако, много «подводных камней». Так, если иммуноглобулины не выявлены, то это еще не говорит о 100% отсутствии заболевания. Ведь на фоне иммунодефицита у организма просто может не «быть сил» на синтез антител. Если у пациента тяжелая печеночная недостаточность, то печень просто не в силах синтезировать белок – строительный материал для антител. В таком случае результат называют серонегативным, и требуется подтверждение инфекции уже прямым и самым совершенным методом исследования – ПЦР, или полимеразной цепной реакцией. В отличие от иммуноферментного анализа, при этом методе выявляется не реакция организма на инфекционный процесс (которая может быть дефектной, или отсутствовать вовсе), при ПЦР определяется непосредственно наследственный материал, или находится сам возбудитель.

Метод иммуноферментного анализа может дать ошибку на фоне многих хронических болезней, на фоне иммуносупрессивной терапии. В гельминтологии же и паразитологии существует закон: только обнаружение паразита, или его яиц, является абсолютно надежным способом постановки диагноза. ИФА может давать перекрестные и ложноположительные методы, реагируя на многие нормальные события в жизни пациента.

В заключение нужно сказать, что метод иммуноферментного анализа является мощным, но вспомогательным способом лабораторной диагностики многих заболеваний. Но в любом случае, диагноз должен выставляться на основании многих факторов: жалоб и анамнеза пациента, данных осмотра, других вспомогательных и инструментальных методов диагностики.


Смотрите также