Игх исследование что это такое при раке


что это такое? Анализ на иммуногистохимию, сколько делают и для чего

Иммуногистохимия, или иммуногистохимический анализ — исследование, во время которого в образцах ткани с помощью антител выявляют определенные молекулы. Этот метод диагностики нашел широкое применение в онкологии.

Немного теории и истории. Для того чтобы обнаруживать и уничтожать чужеродные вещества, иммунная система использует особые молекулы — антитела. Они отличаются специфичностью: каждое антитело может связываться строго с определенным антигеном.

В 1941 году американский иммунолог Альберт Кунс впервые решил использовать антитела в лаборатории, чтобы «распознавать» с помощью них белки бактерий. В 1984 году биохимик из Аргентины Сезар Мильштейн получил Нобелевскую премию за то, что создал гибрид опухолевой клетки с лимфоцитом, которая могла синтезировать моноклональные антитела. После этого началось производство моноклональных антител для диагностических и лечебных целей.

В 1994 г. С. Тэйлор применил иммуногистохимический анализ, чтобы проверить 20 000 опухолей, и обнаружил, что диагнозы в половине случаев были ошибочными. Иммуногистохимия зарекомендовала себя как эффективный метод диагностики.

Какие задачи в онкологии помогает решать иммуногистохимия?

Иммуногистохимический анализ помогает врачам-онкологам:

  • Отнести злокачественную опухоль к тому или иному типу.
  • Выяснить, в каких генах опухолевых клеток произошли мутации, какие белки способствуют прогрессированию рака.
  • Выявить первичную опухоль и ее метастазы.
  • Определить, произошла ли злокачественная трансформация клеток.
  • Определить прогноз для пациента.
  • Разобраться, поможет ли в данном случае таргетная терапия.
  • Определить, чувствительны ли опухолевые клетки к химиотерапии, лучевой терапии.

Как это работает?

Иммуногистохимия бывает прямой и непрямой. В первом случае используют один вид антител, которые должны вступить в связь с определенной молекулой-мишенью. Если молекула-мишень присутствует в ткани, и реакция произошла, опухолевая ткань окрашивается:

  • Чаще всего к антителу присоединяют фермент, например, пероксидазу. Этот фермент катализирует химическую реакцию, которая приводит к изменению цвета.
  • Иногда к антителу присоединяют флюоресцин или родамин, при этом окрашивание выявляют с помощью флюоресцентной микроскопии.
  • всего применяют непрямую иммуногистохимию. При этом используют два антитела. Одно соединяется с антигеном, второе — с полученным комплексом антиген-антитело. Маркер, который вызовет изменение цвета, связывают со вторым антителом.

Непрямой метод имеет некоторые преимущества:

  • Он обладает более высокой чувствительностью, потому что с одним первичным антителом (тем, которое связывается с белком-мишенью) может связаться несколько вторичных антител.
  • Исследование занимает немного времени: для того, чтобы произошла реакция, нужно примерно 3 часа.
  • Непрямая иммуногистохимия требует небольшого количества антител. Например, вторичное антитело, направленное на иммуноглобулины кролика, будет реагировать на любое первичное антитело «кроличьего» происхождения. Не нужно создавать много разных видов вторичных антител с окрашивающей или флуоресцентной меткой.

Как проводят исследование?

Для того чтобы выполнить иммуногистохимический анализ, нужно получить опухолевую ткань, то есть провести биопсию. В качестве материала можно использовать столбик ткани, полученный во время трепан-биопсии, фрагмент тканей или даже целый орган, удаленный во время операции.

Образец ткани фиксируют с помощью формальдегида (иногда используют метанол, ацетон и другие фиксаторы — это зависит от того, какой антиген нужно выявить, и реагирует ли он с теми или иными фиксаторами) и погружают в парафин. Парафинизация помогает законсервировать ткань, сохранить ее структуру на длительное время.

Затем ткань, помещенную в парафин, нарезают с помощью специального инструмента — микротома — на слои толщиной 3–5 мкм. Эти тонкие срезы помещают на стекло, покрытое, специальным клеем.

Некоторые образцы слишком чувствительны к реагентам, которые применяют во время вышеописанной процедуры. Их нельзя помещать в парафин. Такие ткани замораживают жидким азотом. Этим альтернативным методом пользуются редко, только в случае необходимости, так как у заморозки есть некоторые недостатки: она делает изображение под микроскопом не таким четким, требует специальных условий хранения образцов. Фиксацию ткани в таких случаях проводят уже после нанесения на стекло и размораживания, ацетоном или формальдегидом.

После того как срезы нанесены на стекло, из них нужно удалить весь парафин, иначе антитела не прореагируют с антигеном. Эта процедура называется депарафинизацией. Ее проводят с помощью ксилола. Затем выполняют еще некоторые подготовительные процедуры, чтобы антитела могли успешно прореагировать с нужными антигенами, и, наконец, проводят непосредственно иммуногистохимический анализ. Обработанную антителами ткань рассматривают под микроскопом, чтобы проверить, окрасилась ли она.

Какие молекулы-мишени выявляют во время иммуногистохимии?

Количество возможных мишеней измеряется сотнями. Перед исследованием врач должен понимать, что он ищет, и использовать соответствующие антитела. В онкологии мишенями являются опухолевые маркеры — вещества, которые в здоровых клетках отсутствуют вообще или присутствуют в значительно меньшем количестве. Вот некоторые примеры:

  • Рецепторы к эстрогенам и прогестерону помогают идентифицировать гормонально-позитивный рак молочной железы и разобраться, помогут ли женщине гормональные препараты.
  • Простатспецифический антиген (ПСА) имеет значение в диагностике рака простаты.
  • Альфа-фетопротеин — присутствует в гепатоцеллюлярной карциноме (рак печени).
  • Цитокератины помогают в диагностике рака и некоторых сарком (злокачественных опухолей соединительной ткани).
  • Фермент CD10 (CALLA) связан с карциномой почек, лимфобластным лейкозом.

Какова роль иммуногистохимии в современной онкологии?

Иммуногистохимический анализ помогает изучить характеристики злокачественной опухоли, которые не могут выявить другие методы диагностики. Зачастую это играет важную роль в уточнении диагноза и назначении правильного лечения. Врач может определить, какие комбинации препаратов будут наиболее эффективны для конкретного больного, иными словами, реализуется принцип персонализированного лечения. Зачастую это помогает улучшить результаты, подобрать эффективное лечение для пациентов, которым не помогает стандартная терапия.

Запись на консультацию круглосуточно

Иммуногистохимическое исследование

06.03.2016 15:47:43

528729

Иммуногистохимическое исследование в онкологии – это разновидность исследования ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело.

При иммуногистохимическом исследовании используются реактивы, которые содержат антитела, отмеченные специальными веществами.

Антитело – это белок, который связывается в тканях с определенными молекулами - антигенами, после чего возникает реакция. Если же таких молекул нет, то и реакции не будет.

По этому признаку можно судить, присутствует в ткани интересная нам молекула или нет. Это похоже на то, если нанести на белый стол бесцветный клей. Невооруженным глазом на белом фоне он практически незаметен, но стоит насыпать на стол мелкого песка, как клей становится виден за счет прилипших песчинок.

    

По правилам иммуногистохимическое исследование при раке всегда проводится в специализированной лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, полученная в результате биопсии или операции.

Иммуногистохимическое исследование проводится для определения наличия в опухолевых клетках различных точек приложения, например, наличие рецепторов эстрогенов (ER) и прогестеронов (PR). Также иммуногистохимия выполняется для определения показателя Ki-67 (индекс пролиферативной активности опухолевых клеток), гиперэкспрессии белка Her2neu, VEGF (сосудистый фактор роста), р53.

Иммуногистохимическое исследование при раке выполняется для того, чтобы понять, какими препаратами можно лечить злокачественную опухоль, и к каким видам препаратов она чувствительна.

Самый распространённый анализ, определяемый при иммуногистохимическом исследовании, это наличие рецепторной чувствительности к гормонам у опухоли.

1. ER / PR (Эстрогеновые и прогестероновые рецепторы, ER- еstrogen receptor, PR-progesterone receptor)

    ER и PR - протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток. 

    В организме человека постоянно вырабатываются гормоны - эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

    Определение Эстрогеновых и Прогетестероновых рецепторов является одним из важнейших моментов, определяющих чувствительность опухоли к терапии гормональными препаратами.

    Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при раке молочной железы. Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию.

    При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким метастазированием.

    Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от 0 до 10. Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

    2. Her2Neu (от англ. Human Epidermal Growth Factor Receptor 2)

    Her2Neu  - это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это - ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

    В некоторых опухолях (чаще всего рак молочной железы, рак пищевода, рак желудка) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu, что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

    Также снижается эффективность химиотерапии, лучевой терапии, гормональной терапии. Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

    Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

    1. Иммуногистохимическое исследование

    Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

    • 0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
    • 3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

    2. Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)

    В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu.

    Определение гиперэкспрессии рецептора Her2neu в опухоли молочной железы является очень важным для дальнейшего назначения лечения.

    В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu. Для лечения опухолей с гиперэкспрессией рецептора Her2Neu активно и успешно используются таргетные препараты Трастузумаб (Герцептин), Пертузумаб (Перьета), Трастузумаб-эмтанзин (Кадсила), Бейодайм (Трастузумаб+Пертузумаб). Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам. Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.


    3. Ki-67

    Ki-67 - это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

    Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

    Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение. И наоборот - чем выше показатель Ki-67, тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

    4. Белок p53

    Белок p53 - это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности. 

    Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке - активируется. 

    Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными. Это называется - индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки. 

    При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание  белка p53 обнаруживается в  50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

    Количество белка p53, определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни. Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту. Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию.

     

    5. VEGF (Фактор роста эндотелия сосудов)

    VEGF  – это сигнальный белок, вырабатываемый клетками для активного роста новых сосудов в уже существующей сосудистой системе.

    Есть несколько видов белка VEGF, и каждый воздействует на определенный рецептор VEGFR (Vascular endothelial growth factor receptor). Для того чтобы активно делиться, опухоли нужно питание, а для этого нужны сосуды, по которым это питание будет поступать. Именно по этой причине в опухолевых клетках содержится повышенное содержание белка VEGF - для того, чтобы в короткие сроки строить сосудистые сети.

    Наличие белка VEGF в опухоли говорит о возможности применения таргетной терапии такими препаратами, как Бевацизумаб (Авастин), Рамуцирумаб (Цирамза), Афлиберцепт (Залтрап). Они перестраивают сосудистую сеть опухоли, тем самым лишая её питания.

    6. Определение экспрессии белков PD-1, PDL-1 и PDL-2

    Иммунотерапия в онкологии появилась сравнительно недавно, но уже успела показать удивительные результаты в лечении опухолей. Механизм иммунотерапии рака заключается в том, что препарат позволяет иммунитету увидеть опухоль и уничтожить её. Ответственные за «видимость» опухоли белки PD-1, PDL-1 и PDL-2 в достаточном количестве присутствуют не во всех опухолях. Именно поэтому одним пациентам иммунотерапия помогает, а другим нет.

    Чаще всего определение гиперэкспрессии белка PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2 необходимо при меланоме, немелкоклеточном раке легкого, раке желудка и раке почки.

    Для того чтобы отобрать пациентов, которым показана иммунотерапия, проводится определение наличия экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, при помощи флюоресцентной гибридизации in situ  (FISH). При наличии экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, показано применение иммунотерапии препаратами Пембролизумаб (Кейтруда), Ниволумаб (Опдиво), Атезолизумаб (Тецентрик).

    В современной онкологии иммуногистохимическое исследование играет очень важную роль, так как при помощи этого исследования онкологи определяют наличие тех или иных факторов в опухоли, которые позволяют грамотно и адекватно составить дальнейшее лечение пациента и говорить о прогнозах заболевания.


    Подпишитесь на нашу еженедельную рассылку

    исследование ИГХ при онкологии молочной железы, типы рака молочной железы по ИГХ

    ИГХ при раке молочной железы — необходимость современной онкологии. Его результаты позволяют подобрать максимально подходящее женщине противоопухолевое лечение.

    Что такое иммуногистохимия при РМЖ?

    Иммуногистохимический анализ или коротко ИГХ основан на способности иммунитета синтезировать вещества, нейтрализующие инородные агенты — бактерии, вирусы, грибы и выделяемые ими токсины. Инородные агенты — это антигены, в их присутствии иммунные клетки вырабатывают определённое антитело, на каждое антитело имеется свой антиген.

    Рак молочной железы умело скрывается от санкций иммунитета, тем не менее раковые клетки и их структурные элементы — антитела, иммунитет их не видит, но ИГХ выявляет эти антитела.

    При ИГХ кусочек опухоли обрабатывают реагентами с антигенами, которые находят своё антитело и соединяются с ним, изменяя окраску исследуемого кусочка злокачественной ткани.

    Для чего проводят иммуногистохимию при РМЖ?

    Иммуногистохимия нужна не для научной работы, а для практического использования:

    1. Обнаружение в клетках рецептора половых гормонов, чувствительного к эстрогену (ЭР) или прогестерону (ПР), прогнозирует чуть более плавное течение рака с меньшей вероятностью метастазирования, с преимущественной локализацией метастазов в костях, большую продолжительность жизни даже при генерализации процесса;
    2. Разная концентрация ЭР и ПР позволяет выбрать для конкретной женщины оптимальное лечение, так при высоком уровне ЭР в сочетании с ПР и даже без них можно рассчитывать на хороший результат гормональной терапии, без рецепторов обязательна химиотерапия;
    3. Наличие в клетке НЕR2 в высокой концентрации указывает на агрессивность рака, что требует химиотерапии и специфического нейтрализатора НЕR2;
    4. Сочетание позитивного гормонального статуса с НЕR2 вызывает сомнения в результативности гормонотерапии, поэтому в программу лечения включается химиотерапия;
    5. Высокая концентрация Ki-67 — свидетельство высокой степени злокачественности и, опять-таки, не позволяет избежать химиотерапии.

    Показания к иммуногистохимии при РМЖ

    При раке молочной железы для ИГХ только одно показания — определение степени агрессивности рака по его структурным компонентам для подбора оптимальной программы лечения.

    Обычный морфологический анализ — гистология показывает степень злокачественности опухоли и её клеточный состав, часто неоднородный, но не позволяет определить белковые структуры:

    • Чувствительность каждой клетки к лекарствам определяется наличием у нее рецепторов половых гормонов;
    • Активность клеточного размножение и скорость роста ракового узла контролирует белок НЕR2, если его слишком много, то рак будет расти быстрее и формировать защиту клетки от лекарств вплоть до полной устойчивости;
    • Способность быстро воспроизводить замену погибшим клеткам, захватывая при этом новые территории, определяет маркер пролиферации Ki-67.

    Концентрацию всех этих клеточный субстанций и определяет ИГХ.

    Подготовка к исследованию

    ИГХ при раке молочной железы проводится вне организма больной, но с кусочком её опухоли. Сегодня всем женщинам с впервые обнаруженным новообразованием в железе на этапе диагностики специальной иглой выполняется биопсия — кор-биопсия.

    Взятый небольшой столбик раковой ткани подвергается гистологическому исследованию и ИГХ, что позволяет верифицировать, то есть доказать наличие рака, и планировать первичное лечение. Удалённую во время операции на молочной железе опухоль тоже подвергают гистологическому и ИГХ исследованиям для уточнения плана лечения.

    Женщине перед биопсией надо только успокоиться, никакой определенной подготовки от неё не требуется.

    Проведение исследования

    Взятый при биопсии или из удалённых при операции тканей молочной железы кусочек рака в пробирке с формалином (для консервации) отправляется в патоморфологическую лабораторию. Кусочек разрезается на тончайшие пластинки, которые консервируются на очень длительный срок — несколько десятилетий, чтобы при необходимости имелся материал для анализа. Пластинки также подвергают иммуногистохимии.

    ИГХ делается двумя способами: внесённые с реактивом антигены напрямую контактируют с антителами или через антиген-посредник, который сначала ищет свое антителом, а затем этот дуэт находится вторым антигеном, концентрация которого и измеряется.

    О чем говорят результаты?

    Обнаружение в раке молочной железы рецепторов ЭР и ПР предсказывает относительно доброкачественное течение при эффективности гормональных препаратов, но в реальной жизни опухоль может не среагировать на эндокринную терапию, правда процент устойчивости невысок.

    Обнаружение Ki-67 прогнозирует неспокойную жизнь и интенсивное лечение с использованием максимальных возможностей химиотерапии для изменения негативного прогноза болезни.

    Рецептор НЕR2 — прогностический фактор, предлагающий сосредоточение на химиотерапии без особых надежд на антигормональное воздействие, но с другой стороны, предсказывает необходимость использование таргетного препарата, связывающего патологический белок.

    Расшифровка исследования

    Формально считается, что 1% ЭР уже положительно, но до 10% ЭР сомнительна надежда на значимый результат эндокринной терапии. Иммуногистохимический анализ рецепторного статуса рака молочной железы предполагает следующие ответы:

    • от 0 до 2 баллов — нет гормональной зависимости;
    • при 3 — 8 баллах — возможна зависимость от эндокринного воздействия, чем больше баллов, тем выше уровень рецепторов, тогда как при 3 баллах только десятая часть раковых клеток имеет рецептор.

    Градации ответов при определении НЕR2:

    • 0 и 1+ — нормальное содержание белка, аналогичное здоровым клеткам молочной железы и никаких мер не требует;
    • 2+ — сомнительный анализ, чуть больше нормы и необходима перепроверка более точным способом, в качестве которого прибегают к FISH, дающей два варианта ответов — «есть» или «нет»;
    • 3+ — явное превышение, необходима таргетная терапия для подавления излишней активности.

    Белок Ki-67 констатирует:

    • меньше 15% — невысокая активность пролиферации;
    • 16% — 30% — умеренная агрессивность;
    • выше 30% — высокая агрессия.

    Определяемые при иммуногистохимии структурные элементы не гарантируют исполнения предначертанного — в процессе лечения рак изменяет свои характеристики. В нашей клинике определяют реальные характеристики злокачественного процесса в конкретный момент времени и подбирают оптимальное лечение по панели из множества генов.

    Запись на консультацию круглосуточно

    Список литературы:

    1. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство/ Под ред. Долгова В. В., Меньшикова В. В.// — М.: ГЭОТАР-Медиа; 2012.
    2. Стенина М.Б., Жукова Л.Г., Королева И.А., с соавт./ Практические рекомендации по лекарственному лечению инвазивного рака молочной железы// Злокач. Опухоли; 2016. — № 4; Спецвыпуск 2.
    3. Эндокринно-чувствительные опухоли репродуктивной системы: руководство для врачей/- М: СИМК, 2014.
    4. Zaha D.C. /Significance of immunohistochemistry in breast cancer// World J of Clin. Oncol.; 2014; 5(3).

    Иммуногистохимическое исследование — Википедия

    Материал из Википедии — свободной энциклопедии

    Иммуногистохими́ческое иссле́дование — метод микроскопического исследования тканей, обеспечивающий наиболее специфическое выявление в них искомых веществ и основанный на обработке срезов маркированными специфическими антителами к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном. Впервые способ окрашивания клеточных и тканевых компонентов с помощью специфических антител для микроскопического исследования был предложен A. Coons и соавторами в 1941 году; позднее были разработаны антитела, помеченные не флуоресцентными красителями, а ферментами.

    Рис. 1. Схематическое изображение прямого иммуногистохимического метода Рис. 2. Схематическое изображение непрямого иммуногистохимического метода

    Прямой иммуногистохимический метод основан на реакции специфического связывания маркированных антител непосредственно с выявляемым веществом (рис. 1).

    Непрямой иммуногистохимический метод[править | править код]

    Непрямой иммуногистохимический метод является более чувствительным, основан на том, что немаркированные первичные антитела связываются с искомым антигеном (выявляемым веществом), а далее уже их выявляют при помощи вторичных меченых антител, при этом первичные антитела служат для вторичных антигенами (рис. 2).

    Маркировка антител производится путём их связывания с одной из следующих групп веществ:

    • Быков В. Л. Цитология и общая гистология. — СПб.: СОТИС, 1999. — С. 18-19. — ISBN 5-85503-080-6.

    Иммуногистохимическое исследование при раке :: SYL.ru

    Поставить точно диагноз "онкология" без проведения специальных исследований практически невозможно. В настоящее время медицина обладает такими возможностями. Поэтому если имеется подозрение на рак, то проводится иммуногистохимическое исследование. Рассмотрим, что собой представляет данный анализ, в каких случаях назначается и что позволяет выявить.

    Сущность исследования

    Под данным исследованием подразумевается изучение образца тканей под микроскопом. Их получают при помощи биопсии и предварительно обрабатывают специфическими антителами.

    Онкологические заболевания давно находятся в поле зрения врачей и ученых. В ходе многочисленных исследований было установлено, что злокачественные клетки в процессе жизнедеятельности продуцируют специфические белки, которые называют антигенами. Они связываются с антителами, именно на этом основано иммуногистохимическое исследование, когда ткань пациента, взятая для изучения, после обработки тщательно изучается при помощи микроскопии.

    Когда антитела взаимодействуют с раковыми клетками, то можно наблюдать явление флуоресценции. Это дает основания практически на 100 % быть уверенным, что имеет место онкология.

    Сейчас уже разработаны и активно внедрены в медицинскую практику антитела практически ко всем новообразованиям.

    Возможности исследования

    Иммуногистохимическое исследование при раке позволяет:

    • Распознать новообразование и определить его разновидность.
    • Выяснить распространенность первичного очага по организму.
    • При взятии биологического материала из вторичных очагов можно определить источник распространения метастазов.
    • Исследование позволяет оценить эффективность терапии.
    • При помощи анализа можно выяснить, на какой стадии развития находится раковая опухоль.
    • Иммуногистохимическое исследование позволяет также выяснить скорость роста новообразований.

    Данный метод исследования считается более информативным по сравнению с обычным гистологическим. Если использовать оба метода исследования, то можно получить полнейшую картину, поэтому на практике чаще всего врачи так и поступают.

    Показания к проведению исследования

    Исследовать при помощи этого метода можно практически все ткани человеческого организма, но чаще всего такой анализ назначают при подозрении на онкологию.

    Исследование применяют:

    1. Для определения первичных новообразований.
    2. Для выявления метастазов.
    3. Данный анализ помогает определить прогноз развития и протекания патологии.
    4. Анализ служит одним из методов исследования рецепторов к ряду гормонов.
    5. ИГХ-исследование позволяет обнаружить микроорганизмы.
    6. Метод исследования применяют для выяснения чувствительности раковых клеток к химиотерапии и радиотерапии.
    Преимуществом такого метода исследования является также отсутствие противопоказаний. Сложность может возникнуть только в том случае, если раковое образование расположено в труднодоступном месте.

    Методика проведения анализа

    Иммуногистохимическое исследование проводится в несколько этапов, первым из них является сбор биологического материала. Его получают путем биопсии или изъятия материала во время проведения операции.

    Кусочек ткани помещают в формалин и направляют в лабораторию, где его подвергают изменениям:

    1. Материал обезжиривают специальными составами и заливают парафином. В таком состоянии он может храниться практически вечно, поэтому при необходимости исследование можно повторять.
    2. На следующем этапе получают тончайшие срезы — проводят микротомирование. Их размещают на специальных стеклах.
    3. Приготовленные срезы обрабатывают растворами антител определенной концентрации. Использовать для обработки могут составы, содержащие разное количество антител. Какие из них вступят во взаимодействие с раковыми клетками, будет зависеть от разновидности опухоли.
    Результаты исследования будут готовы только через одну или две недели.

    Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы

    Такой анализ просто незаменим, если есть подозрение на наличие раковых клеток в груди. Обязательно определение количества рецепторов эстрогена и прогестерона. При их повышении активизируется процесс роста злокачественных клеток.

    ИГХ-исследование позволяет не только распознать онкологическое заболевание, но и определить его стадию. При помощи исследования врачи выясняют, показана ли гормональная терапия.

    Опухоли, имеющие большую концентрацию гормонов, чаще всего вполне эффективно лечатся антигормональными препаратами.

    Во время проведения анализа обязательно определяют показатель Ki-67, он помогает определить злокачественность процесса. Если иммуногистохимическое исследование молочной железы показывает Ki-67 до 15 %, то исход заболевания считается благоприятным. Если показатель доходит до 30 %, то без химиотерапии не обойтись, потому что опухоль растет довольно быстро. Отметка в 90 % чаще всего свидетельствует о неизбежности летального исхода.

    Данный анализ назначается не только при подозрении на онкологию груди, но еще он оказывается довольно информативным, если:

    • Имеется бесплодие.
    • Обнаружены злокачественные образования матки.
    • Наблюдаются патологические изменения в репродуктивной системе.

    Иммуногистохимическое исследование эндометрия

    Такой анализ проводится, если:

    • Часто наблюдаются выкидыши.
    • У женщины было несколько неудачных попыток ЭКО.
    • Диагностирована хроническая форма эндометрита.

    Данное исследование помогает выяснить, имеются ли клетки, мешающие зачатию естественным путем.

    ИГХ-исследование тканей эндометрия назначается женщинам, у которых уже было несколько неудачных попыток искусственного оплодотворения.

    Взятие тканей эндометрия проводится в разные дни цикла, которые назначает врач.

    Интерпретация результатов анализа

    Необходимо иметь в виду, что исследовать подготовленные образцы тканей имеет право только врач, имеющий сертификат, подтверждающий специальную подготовку по проведению анализов по методу ИГХ.

    В заключении должно быть указано:

    1. Показатели антител, к которым определена тропность исследуемой ткани.
    2. Указывается разновидность раковых клеток и их количество.
    3. Указываются выявленные антигены, которые помогают установить вид онкологии.

    По результатам исследования нельзя ставить окончательный диагноз. Врач-онколог имеет право это сделать только после получения интерпретации всех диагностических процедур.

    Таким образом, можно сделать вывод, что эффективно иммуногистохимическое исследование при раке молочной или других желез и других видах онкологии. Анализ дает исчерпывающую информацию и позволяет распознать начинающийся патологический процесс на клеточном уровне.

    ИГХ при раке молочной железы: результаты, подготовка

    Анализ ИГХ при раке молочной железы означает иммуногистохимическое исследование биоптатов пораженного участка груди. Этот метод исследования представляет собой сложные взаимодействия раковых антигенов с антителами. Необходимость выполнения обследования объясняется высокой информативностью и возможностью подобрать правильный метод терапии. Врачи рассказывают, как выполняется анализ и какие данные можно узнать.

    Что собой представляет?

    Иммуногистохимический анализ выполняется с использованием специфических маркеров для определения раковых очагов, их агрессивности, деятельности и типа клеток. Это лабораторный микроскопический метод исследования, требующий применения антител к раковым антигенам, концентрация которых повышается в случае активного злокачественного процесса.

    Выявляют следующие факторы, выявляющиеся ИГХ анализом:

    • Her-2-neu — в нормальных клетках этот белок контролирует процесс деления, поэтому при карциноме его концентрация значительно возрастает.
    • Ki 67 при раке молочной железы является главным веществом, отображающие процессы пролиферации в клетках. Опухолевая ткань развивается неконтролируемо, что можно увидеть по концентрации КИ 67.
    • VEGF — фактор, отвечающий за развитие кровеносной сети. Злокачественное перерождение характеризуется формированием новых капилляров, что отображается на изменении этого показателя.
    • Определение чувствительности клеток к женским половым гормонам — имеет важное значение в лечении карциномы молочной железы.

    В журнале «Современная онкология» 2017 года опубликованы сведения о полном излечении рака груди антиэстрогенными препаратами при наличии на поверхности атипических тканей специфических рецепторов к гормонам.

    Вернуться к оглавлению

    Когда нужно делать?

    Если симптоматика указывает на развитие злокачественного процесса в молочных железах необходимо сделать иммуногистохимическию процедуру.

    Иммуногистохимический анализ показан в следующих случаях:

    • подозрение на рак молочной железы;
    • определение стадии злокачественного процесса;
    • выявление локализации карциномы;
    • постановка степени распространения опухолевых очагов;
    • определение разновидности патологического образования;
    • установление глубины атипии и уровень дифференциации;
    • выбор метода лечения;
    • мониторинг эффективности противораковой терапии.
    Вернуться к оглавлению

    Подготовка

    Иммуногистохимическое обследование не имеет особенных ограничений перед проведением. Необходимый материал для анализа — частичка патологической ткани. Ее берут во время тонкоигольной биопсии из предполагаемого места опухоли. При невозможности это сделать, забор осуществляют непосредственно при выполнении операции по резекции молочной железы или карциномы в границах здоровых тканей. Ткань помещают в стерильную емкость.

    Вернуться к оглавлению

    Проведение

    Иммуногистохимия выполняется с придерживанием четких шагов, чтобы свести к минимуму вероятность ошибочных результатов. Главное, что должен сделать врач-лаборант — выделить ту ткань, где есть раковые компоненты. Анализ состоит из следующих этапов:

    При проведении исследования необходимо отделить часть ткани с раковыми клетками, которые и будут подвергаться анализу.
    1. При попадании материала в лабораторию, его помещают в раствор формалина для обезжиривания.
    2. Далее обрабатывают жидким парафином, что дает возможность оценить изменения каждого участка и выбрать те, к которым будут применены специфические маркеры.
    3. Выборку разделяют на одинаковые участки в зависимости от количества применяемых реактивов.
    4. Делают срезы толщиной 1 мм и фиксируют на стекле.
    5. Проводят окрашивание материала.
    6. В каждый участок добавляют необходимые реактивы.

    Длительность проведения иммуногистохимического исследования составляет 10—14 дней. Чем больше факторов необходимо, тем дольше выполняется анализ. Ki67 при раке молочной железы очень чувствительный, поэтому требует аккуратного и тщательного подхода. Определение этого показателя имеет наиболее важное значение для дальнейшего лечения и прогноза, потому рекомендуется его делать несколько раз на протяжении применения противораковой терапии.

    Вернуться к оглавлению

    Результаты

    Какая норма?

    Фактор Her-2-neu в иммуногистохимическом обследовании здорового пациента определяется, как «отрицательный». Это значит, что в тканях молочной железы отсутствует патологическое неконтролируемое деление. Такой результат имеет благоприятный прогноз, поскольку если он определяется впервые — раковый процесс отсутствует. Определение «отрицательного» Her-2 в процессе лечения обозначает прекращение размножения опухолевых тканей и остановку прогрессирования карциномы.

    Показатели Ki 67 в нормальных условиях равны нулю, при отклонении от нормы необходимо назначить дополнительное обследование.

    Расшифровка нормы Ki 67 включает его полное отсутствие. Появление его в молочной железе даже в незначительной концентрации требует дополнительного обследования для подтверждения или опровержения диагноза рака. VEGF в норме составляет до 200 нмоль/л. Определение чувствительности к эстрогенам выполняется в случае подтверждения рака молочной железы.

    Доктор-онколог Н. А. Савелов в своем докладе описывает основные проблемы диагностики при ИГХ рака молочной железы и предлагает методы их устранения (https://www.youtube.com/watch?time_continue=1188&v=zrxNYaQquMI)

    Вернуться к оглавлению

    Отклонение от нормы

    Индекс изменения фактора Ki 67 определяется следующим:

    Показатель (%)Характеристика
    5—11Подтверждение рака молочной железы
    Высокая вероятность выздоровления
    Низкая агрессивность опухоли
    11—21Прогрессирование патологического деления
    Активная пролиферация раковой ткани
    Возможность выздоровления составляет 50%
    21—90Высокая агрессивность
    Неблагоприятный прогноз
    Тяжелая стадия карциномы
    Более 90Терминальная стадия заболевания
    Опухоль распространяется в другие органы и структуры
    Пятилетняя выживаемость менее 20%

    «Положительный» Her-2-neu иммуногистохимического обследования определяется в «+». 3 плюса означает подтверждение наличия опухоли в молочной железе, 2 — требует применения дополнительных методов диагностики для постановки диагноза. Показатель VEGF от 220 до 1060 нмоль/л говорит об активном кровоснабжении опухоли, сильно развитой капиллярной сети. Если рак не имеет рецепторов к эстрогену, это свидетельствует о значительной атипичности тканей и требует применения агрессивных методов терапии.

    ИГХ при раке молочной железы: нормы и расшифровка

    Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – это анализ, который позволяет определить чувствительность новообразования злокачественного характера к некоторым веществам. С его помощью диагностируют стадию патологии и узнают, правильно ли было назначено лечение.

    Что такое ИГХ?

    Если говорить о том, что такое ИГХ онкологии, то это исследование, позволяющее выявить взаимодействие между белками и антигенами. Дело том, что клетки, пораженные онкологией, синтезируют белок. Он имеет связь с антителами. Учитывая это, специалисты с помощью анализа определяют форму и структуру опухоли.

    Зачем проводят ИГХ?

    ИГХ при раке молочной железы проводят с целью:

    • определения вида заболевания для назначения терапии;
    • раскрытия наличие метастаз, идущих от опухоли, и их границы;
    • обнаружения источника метастаз;
    • диагностирования стадии патологии при ее выявлении;
    • оценки эффективности терапии;
    • установления скорости развития метастаз при наличии таковых;
    • выявления чувствительности клеток крови к тем или иным препаратам и методам лечения, чтобы оставить эффективные средства и исключить те медикаменты и способы терапии, которые не влияют на опухоль.

    Как делается анализ?

    Иммуногистохимия рака молочной железы проводится путем забора ткани, пораженной онкологией. Биоматериал добывается с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства. После этого выполняется анализ по следующим этапам:

    • биоматериал помещается в формалин, после чего переправляется в лабораторию для проведения дальнейших манипуляций;
    • специалисты обезжиривают ткань;
    • в материал добавляется специальный жидкий парафин, который помогает выявить структуру клеток опухоли;
    • выполняется микротравмирование – процедура срезания тонкого слоя парафина, толщиной в 1 мм;
    • взятые образцы размещаются на специальных стеклах;
    • выполняется окрашивание материала с помощью реактивов;
    • образцы оставляют на 12 дней, после чего оценивают результат.

    Для проведения анализа используют несколько видов маркеров. Если в ходе исследования в биоматериале обнаружена повышенная концентрация эстрогенов и прогестеронов, делают заключение о развитии опухоли. Это также говорит о появлении метастазов от новообразования. Если анализ показал средние результаты, то говорят о слабом росте опухоли. Это говорит о том, что больной после соответствующей терапии имеет все шансы на выздоровление.

    Чисто рецепторов HER2 влияют на цветовую гамму реакторов с клетками, которые поражены раком. Чем их больше, тем ярче тон. В этом случае гистология проявляется себя, как неточная наука, поскольку восприятие оттенков образцов субъективное и зависит только от ощущений специалиста, выполняющего анализ.

    Расшифровка результатов

    При расшифровке результатов учитывают рецепторы к прогестерону – PR и эстрогену – ER. ИГХ в онкологии также показывает содержание рецептора человека эпидермального фактора роста (HER2-белка) в биоматериале, который взят как образец для проведения исследования. У женщин с карциномой молочной железы наблюдается повышенный HER2.

    Расшифровка результатов по эстрогену и прогестерону – если в опухоли обнаружены рецепторы к мужским и женским гормонам, то рост образования происходит под их воздействием, если PR и ER в организме присутствуют в норме или их концентрация увеличена. При своевременном квалифицированном лечении пациент может рассчитывать на благоприятном исходе.

    Расшифровка результатов ИГХ выполняется в зависимости от оттенка образцов по специальной шкале:

    • 0-1+. Такой результат говорит о том, что концентрация белка не превышена. Терапия патологии не требуется.
    • 2+. Значение указывается на среднюю концентрацию белка. Это говорит о наличии отрицательной опухоли (карциномы) груди. В этом случае рекомендуется выполнить еще один анализ, поскольку первое исследование не всегда дает точный результат. Для уточнения диагностики выполняют тест FISH. Такое исследование определяет концентрацию белка в каждой клетке. При нормальном содержании HER2 анализ покажет положительный результат, а при повышенном – отрицательный.
    • 3+. Белок превышает нормальное значение. Диагностируется положительная опухоль груди.

    Если анализ показал положительную опухоль, значит, патология имеет агрессивный характер развития. Она растет в несколько раз быстрее, чем при отрицательном значении.

    После изучения исследования, расшифровывается результат, исходя из показателя маркера Ki67. Если его значение находится в пределах нормы, то есть 15-17%. При повышении его уровня до 35% опухоль начинает быстро расти. Замедлить процесс помогает химиотерапия. Если анализ показал 85%, врачи отказываются от лечения пациента, поскольку снизить маркер в таком случае невозможно и смертельного исхода не избежать.

    Выделяют 4 типа рака:

    • люминальный А – рецепторы к ER положительные, к белку отрицательные, Ki67 менее 14%;
    • люминальный Б – рецепторы к ER, к HER2 – отрицательные, Ki67 более 15%;
    • Erb В2 сверхэкспрессирующий — PR и ER – отрицательный, белок – положительный;
    • Базальноподобный – отрицательное значение к прогестерону и остальным факторам.

    Прогностические факторы

    Такие факторы демонстрируют возможное поведение опухоли на момент анализа. Лечение не оказывает влияние на исследование. Врач благодаря ИГХ видит, как ведет себя опухоль. Прогнозом специалист пользуется для определения подходящей терапии для каждого пациента.

    Предсказывающие факторы

    Исследования ИГХ рака молочной железы позволяют определить эффективность лечения. Если анализ показал положительный рак, то назначают химиотерапию. При отрицательном значении – прием медикаментозных препаратов.

    ИГХ – это исследование, которое позволяет определить вид рака молочной железы и назначить адекватное лечение, что позволяет спасти пациентке жизнь, а в некоторых случаях – избавиться от патологии.

    Загрузка...

    Сделать иммуногистохимическое исследование рака желудка в медицинской лаборатории Оптимум в Сочи (Адлер)

    Иммуногистохимическое исследование рака желудка

    Патологоанатомическое исследование биопсийного материала желудка, полученного во время операции, которое выполняют с применением иммуногистохимических методов – определения НER2/neu –статуса и пролиферативной активности Ki-67, проводится для диагностирования рака желудка.


    Злокачественная опухоль желудка является крайне опасным патологическим процессом – его обнаружение на ранних этапах развития крайне проблематично. Тошнота и болезненные ощущения в животе являются симптомами гастрита или язвенной болезни. Пациенты, страдающие этими недугами, не всегда могут предположить, что развивается рак желудка. К тому же во многих случаях онкопатология может начинаться и вовсе без выраженных клинических признаков.

    Современная онкоморфологическая отрасль, занимающая ранней диагностикой новообразований, ведет активный поиск критериев, которые позволяют максимально объективно подтвердить степень злокачественности опухоли. Учитывая пролиферативную активность клеток желудка, в настоящее время иммуногистохимическая диагностика экспрессии рецепторов является необходимым исследованием при онкологических патологиях.

    НER2/neu представляет собой мембранный белок, который кодируется геном ERBB2. Повышение его экспрессии имеет важное значение в патогенезе и прогрессировании определенных злокачественных процессов. Тестирование данного рецептора является важным биологическим маркером рака желудка, молочной железы, матки и ее придатков.

    Ki-67 – ядерный антиген, состоящий из двух полипептидных цепей и являющийся основной частью нуклеарного матрикса. Его экспрессия позволяет выделить пролиферирующие клетки опухолевидного образования, которые находятся в активной фазе жизненного цикла клетки. Данный маркер позволяет определить фенотип и скорость роста опухоли, риск ее метастазирования, потенциальную ответную реакцию на лечебные мероприятия и исход патологического процесса.

    Когда делают анализ?

    Итоговые данные исследования по методу ИГХ готовы спустя 7 дней. Заключение квалифицированного врача-патологоанатома содержат показатели:
    • специфических антител, к которым был определен тропизм исследуемого биоматериала – это явление свидетельствует о типе онкопатологии;
    • морфологической структуры патологической ткани – вида и количества атипичных клеток.

    Интерпретацию результатов проводит врач-онколог, окончательный диагноз устанавливается на совокупности итоговых данных комплексного обследования пациента.

    исследование - это что такое?

    Онкологические заболевания бывают самой страшной явью для абсолютного большинства людей. Но чтобы вовремя выявить серьезную проблему и начать от нее эффективно избавляться, необходимо проводить специальные обследования. Одно из них - ИГХ-исследование.

    Гены, рецепторы и факторы роста

    Точные причины, которые заставляют клетки активно делиться, образуя новообразования, зачастую имеющие онкологическую направленность, науке до сих пор неизвестны. Но вот то, как происходит рост клеток, уже достаточно хорошо изучено. Клетки тканей имеют сложную структуру. На поверхности клетки есть так называемые HER-2-рецепторы. Они служат своеобразными антеннами, слушающими команды организма. Кстати, аббревиатура HER-2 берет начало от английского словосочетания human epidermal growth factor receptor 2, что в дословном переводе значит "рецептор человеческого эпидермального фактора роста". Эти-то рецепторы и заставляют клетку делиться, расти или самовосстанавливаться.

    Активная работа рецептора и опухоль

    К сожалению, не всегда организм человека работает так, как должно быть в идеале, без сбоев и болезней. Пока наука точно не знает, почему, но случается так, что HER-2-рецепторы начинают активно получать команды "делиться и размножаться". А так как эти клеточные элементы очень исполнительные, то они заставляют клетки активно делиться, образуя опухоль. Только медицинские обследования, в том числе и ИГХ-исследование, позволяют определить статус новообразования, а также прогноз для лечения и жизни пациента.

    Генный статус опухоли

    Онкологические образования современной медициной определятся по статусу влияния гормональной терапии. Этот статус может быть отрицательным (негативным) и положительным (позитивным). Конкретизировать характер новообразования помогает ИГХ-исследование. Что показывает иммуногистохимия? Данное исследование помогает установить гормональную зависимость новообразования - герцепт-статус, а значит, правильно выбрать методику лечения, чтобы получить действенный результат.

    Негатив и позитив

    То, что гормональный герцепт-статус опухоли носит названия "положительный" или "отрицательный", много расскажет грамотному врачу. Но вот сами по себе эти определения не относятся к эмоциям, как может подумать простой обыватель, впервые услышавший об ИХГ-исследовании. Выявленный положительный герцепт-статус говорит о том, что этот тип онкологического заболевания имеет более агрессивный характер, он быстрее развивается, распространяясь по организму путем метастазирования. Но в то же время такая злокачественная опухоль с высоким уровнем вероятности откликнется на определенные виды лекарственных препаратов. Отрицательный герцепт-статус новообразования расскажет, что опухоль развивается медленно, но вот адекватного медикаментозного лечения для нее пока что нет.

    Иммуногистохимия - что это?

    Одно из самых распространенных онкозаболеваний среди женщин - рак молочной железы. ИГХ-исследование помогает определить тип новообразования и подобрать лечение в соответствии со сложившейся ситуацией. Иммуногистохимия - это лабораторное исследование биоптата (биоматериала, взятого в процессе биопсии) при помощи специального окрашивающего вещества. Это вещество окрашивает HER-2-рецепторы, и чем больше рецепторов, влияющих на появление и развитие "ненормальной" клетки, тем ярче будет окраска исследуемого биоматериала.

    Как определяется статус новообразования?

    Окрашенный биоматериал во время лабораторного исследования на определение герцепт-статуса подвергается визуальному исследованию. для этого прилагается специальная шкала, имеющая градиентную окраску от 0 до 3+. Этот способ позволяет различить 4 основных порога, в зависимости от которых предполагается вести больного дальше. Кажется - что проще? Окрасить исследуемые ткани при помощи специального вещества, разместить под микроскопом, тщательно рассмотреть, сравнивая увиденное с контрольными цветными образцами, и установить герцепт-статус опухоли. Но здесь огромную роль играет человеческий фактор, особенности освещения и так далее.

    Как проводится ИГХ-исследование

    При подозрении на онкологическое заболевание проводится исследование молочной железы. Расшифровка иммуногистохимического исследования содержит всего четыре порога. Но проблема в том, что средние два значения, а это будет 1+ и 2+ по шкале, предполагают неясный результат, требующий дополнительного исследования другим методом. То есть ИГХ-исследование - наиболее неоднозначный метод выявления герцепт-статуса новообразования. К тому же на результат исследования активно влияют, как уже упоминалось, человеческий фактор и внешние обстоятельства. Единственное, что наиболее точно определяются два крайних результата - отрицательный 0 (новообразование имеет отрицательный герцепт-статус) и 3+ (гормональный статус опухоли положительный).

    Женские гормоны и опухоли

    Как говорит современная медицина, большинство опухолей женской половой сферы являются зависимыми от гормонального уровня организма. На их развитие активно влияют женские половые гормоны - прогестерон и эстроген. Рецепторы к этим гормонам определяют образование и развитие онкозаболевания. Установленная гормональная зависимость позволяет достаточно четко определить схему лечения с последующими жизненным прогнозом. К тому же эти рецепторы играют свою роль не только в онкологических заболеваниях молочных желез, но и в таких серьезных проблемах, как женское бесплодие, эндометриоз и раковые болезни половой сферы - матки, яичников, шейки матки. Герцепт-статус опухоли, который устанавливается во время ИГХ-исследование эндометрия, например, позволит назначить лечение именно теми препаратами, которые помогут добиться адекватного результата без излишних экспериментов с подбором лекарственных средств в каждом конкретном случае.

    Если бесплодие

    Бесплодие - огромная проблема для многих современных семей. Проведенные научными медицинскими учреждениями исследования показали, что в достаточно большом количестве случаев бесплодие бывает обусловлено недостатком гормонального фона эндометрия - эпителиального слоя, выстилающего полость матки. Именно герцепт-статус и позволяет выявить ИГХ-исследование рецептивности эндометрия. Женские половые гормоны - активные участки процесса формирования яйцеклетки, ее оплодотворения, имплантации эмбриона в полость матки, а также последующего вынашивания беременности и родов. ИХГ-исследование эндометрия, как мы уже сказали, позволяет выявить герцепт-статус клеток эндометрия к эстрогену и прогестерону и в соответствии с полученными результатами подобрать для женщины правильное лечение.

    Диагностика лимфомы

    Онкологические заболевания - беда человечества. Хотя современная фармакология и технические разработки позволяют излечиваться от этих болезней. Но здесь очень важна диагностика, особенно на ранних стадиях заболевания. Онкология лимфы - достаточно распространенная беда. ИГХ-исследование при лимфоме - один из способов поставить точный диагноз, чтобы затем назначить адекватную терапию. Данное исследование проводится на биоптате лимфатической жидкости или ткани системы кроветворения. Взятый для исследования материал подвергается окрашиванию специальным веществами, помогающими определять онкомаркеры. К сожалению, этот вид исследования несовершенен и в большинстве случаев дополняется другими методами диагностики. К тому же часто не сама лимфатическая система становится причиной проблемы. Именно это и позволяет выявить ИГХ-исследование лимфы.

    ИГХ-анализ - своевременное знание

    Проблемы со здоровьем должны быть вовремя обнаружены и идентифицированы. Для этого-то и нужны всевозможные методы обследований, анализы. ИГХ-исследование - один из наиболее распространенных методов диагностики новообразований или других проблем с тканями различных органов. Исследование ИГХ проводится на взятом для определения проблемы материале - так называемом биоптате. Материал окрашивается специальными веществами для каждой конкретной цели, и с помощью визуального сравнения, проводимого врачом-гистологом, устанавливаются онкомаркеры, показывающие ту или иную проблему. Несовершенство иммуногистохимического исследования состоит в том, что материала может быть недостаточно, сыграет свою роль человеческий фактор, или же внешние причины не позволят установить точную картину проблемы. В любом случае для адекватной диагностики заболевания, тем более онкологического, необходимо проводить целый комплекс обследований, где одной из ступеней будет ИГХ-исследование. Что это такое при раке какого-ибо органа, ткани? Биоптат исследуется на онкомаркеры, позволяющие оценить их наличие в образце. Как помощь в постановке диагноза ИГХ-исследование незаменимо, также оно активно используется в установлении причин женского бесплодия.

    Медицина, и диагностическая в том числе, постоянно развивается. Возможно, в ближайшем будущем иммуногистохимическое исследование будет доведено до совершенства и позволит многим людям поставить адекватный диагноз с наименьшими затратами времени и сил.

    что показывает, расшифровка результатов. Как проводится игх анализ

    Иногда результатов гистологии бывает недостаточно. Если не удается получить окончательный ответ и поставить диагноз или необходимо уточнение молекулярных параметров опухолевого образования назначается иммуногистохимическое исследование.

    Что это такое

    Метод иммуногистохимии используют как дополнительный. Он помогает выявить в биологическом материале специфичные белки, которые характерны для определенного вида клеток и, как следствие, отличить одну разновидность опухолевого образования от другой. Также исследование помогает выявить:

    1. Маркеры иммуногистохимии, которые отвечают за чувствительность опухоли к воздействию лекарственных средств, лучевой терапии.
    2. Метастатический характер происхождения образования и определить первичный источник поражения.
    3. Гормоны и рецепторы к ним.
    4. Малигнизацию клеток.

    ИГХ как метод диагностики широко применяется в онкологии. Этот вид изучения тканей предполагает применение определенных реактивов. Они содержат в себе антитела или белковые соединения, которые помечены определенными веществами.

    ВАЖНО! Антитела (иммуноглобулины, специфические белки) вырабатываются различными клетками организма и обеспечивают иммунитет, при внедрении антигена. Часто вырабатываются при попадании вирусов, бактерий, при онкологии, вакцинации, пересадке тканей, а иногда и против собственных клеток, что приводит к аутоиммунным патологиям. Получают их от различных животных. [>

    При контакте с антигенами, которые могут содержаться в исследуемом биоптате, происходит специфическая реакция (антигенами являются межклеточные вещества ткани, компоненты клеточных структур). В результате нее можно судить о наличии или отсутствии того или иного вещества в тканях.

    ВАЖНО! Антигены — генетически чужеродное тело, которое при попадании в организм вызывает иммунную реакцию, а именно выработку антител для подавления этого чужеродного агента. В случае с ИГХ-анализом антигенами выступают молекулы, которые вырабатываются патологически измененными опухолевыми клетками.

    Структурная специфичность исследования — принципиально отличает ИГХ от других способов иммунологической диагностики, которые используют реакцию антиген-антитело. Т. е. специалисты оценивают помимо присутствия тех или иных веществ в тканях (при наличии или отсутствии окрашивания) и их количественный состав (по интенсивности окрашивания), еще пространственное распределение различных структурных элементов (цитоплазма, ядро, мембрана клетки и пр.) в тонком окрашенном срезе.

    Способы проведения исследования

    Реакцию можно получить несколькими способами. Часто применяется прямой, при котором используется один вид маркированных антител. Последние должны связаться с выявляемым веществом или молекулой-мишенью. Если последняя присутствует в биоптате, то исследуемая ткань окрашивается.

    Непрямой метод считается более информативным и чувствительным. Его суть заключается в поэтапном введении 2 разных антител. Немаркированные первичные антитела вступают в реакцию с опухолевым антигеном в биоптате, образуют комплекс антитело-антиген. Затем вводят вторичные уже маркированные антитела (реагент), которые связываются с определенной частью молекулы первичного антитела. Т. е. первичные антитела являются антигенами для вторичных.

    Когда назначается исследование?

    ИГХ назначается в том случае, когда обычного гистологического исследования недостаточно. Например, когда опухоль молочной железы имеет неспецифичное микроскопическое строение, не позволяющее поставить точный окончательный диагноз.

    Что показывает

    Биопсия с иммуногистохимией являются важной частью верификации диагноза при раке молочной железы, предстательной железы, мягких тканей и пр. Особенно актуально исследование для выявления лимфом, поскольку зачастую диагностировать эту болезнь без ИГХ невозможно. Большую роль ИГХ исследование играет в определении гистологического типа недифференцированных опухолевых образований, а также метастазов, которые имеют невыясненный первичный очаг.

    Иммуногистохимия рака молочной железы полезна в прогнозировании течения опухолевого процесса и возможности таргентной терапии. Она помогает оценить:

    • функциональное состояние клеток образования;
    • злокачественный потенциал и темп роста опухоли;
    • тенденцию к метастазированию.

    Как делается анализ?

    Чтобы провести исследование, необходимы образцы самой опухоли и близлежащих тканей. Их можно получить при биопсии или после хирургического вмешательства. Материалу необходимо пройти несколько этапов подготовки перед исследованием: фиксация, промывание, обезвоживание, погружение в парафин или заливка другим веществом.

    Исследуемый биологический объект должен получиться плотным, но не хрупким. Сначала материал промывают, обезвоживают и уплотняют в спиртах возрастающей крепости. Затем его просветляют путем погружения в смесь абсолютного спирта и О-ксилола в пропорции 1:1. После этого помещают в несколько порций чистого О-ксилола. И только потом биологический объект пропитывают в парафине. Последний этап помогает законсервировать ткань и на долгое время сохранить ее структурные особенности в парафиновом блоке.

    Затем лаборант производит с этих блоков срезы, при помощи специального прибора — микротома, толщиной до 1 мкм. Полученные срезы наклеивают на предметное стекло, которое смазано глицерином и смесью белка. Подсушивают.

    Чтобы исследуемый материал вступил в реакцию с антителом, необходимо его обезжирить и удалить парафин. Процедура называется депарафинизация. Для ее проведения используют 3 порции О-ксилола, а также спирты нисходящей крепости.

    Последний этап — окрашивание. Оно проводится для того, чтобы четко видеть структуру тканей под микроскопом. Лаборанты могут использовать огромное количество красителей. Условно их можно классифицировать по:

    • происхождению, например, животные — кармин, растительные — гематоксилин, синтетические — эозин;
    • химическим свойствам, например, нейтральные, основные, кислые.

    Чаще всего для этой процедур используют эозин, гематоксилин. Биологический материал помещают в раствор гематоксилина на несколько минут, затем промывают и дифференцируют результаты окрашивания. После этого провидится окрашивание в эозине, промывание и обезвоживание в спиртах восходящей крепости. Последовательная многоэтапная окраска позволяет на каждом этапе все больше определить нозологию и фенотип опухолевого образования. Патоморфолог изучает материл под микроскопом после каждого окрашивания. И только после оценки изменений и интерпретации полученной информации, назначает панель антител.

    Чтобы получить точные данные о патологическом процессе и верифицировать заболевание  лаборант приступает к обработке подготовленного образца специальными реактивами, содержащими меченые антитела. В результате происходит реакция между антителом и антигеном. Это сопровождается характерной визуализацией, которая зависит от веществ, используемых для маркировки.

    Что означают результаты?

    Иммуногистохимия молочной железы — это сложный многоступенчатый анализ, на результат которого влияет множество факторов, например, низкое качество реагентов, недостаточная фиксация исследуемого биологического объекта или неправильно подобранная панель антител. Количество искомых клеток-мишеней исчисляется сотнями, поэтому специалист должен понимать, что он ищет и использовать для этого необходимые антитела.

    Гистологи оценивают интенсивность окрашивания опухолевых клеток после взаимодействия с реактивами по специальной шкале:

    • 0-1+ — онкологии нет;
    • 2+ — онкологическое образование отрицательное;
    • 3+ — онкологическое образование положительное.

    Длительность ИГХ при раке молочной железы во многом зависит от способа его проведения. Бывает ручной и автоматический. Последний считается более совершенным, поскольку вероятность технической ошибки сведена к минимуму, да и проводится он гораздо быстрее.

    Перед определением тактики лечения онколог задается различными вопросами: какова вероятность рецидива заболевания у больного или его смерти, какой результат лечения можно ожидать. Для этого специалист изучает особенности и характеристики опухоли и в зависимости от различных предсказывающих и прогностических факторов назначает тактику лечения.

    Прогностические факторы

    К этим факторам относятся основополагающие признаки, которые определяют особенность протекания болезни и ее исход. При операбельных формах онкологии груди к таким факторам относятся: морфологическое строение новообразования и его размер, состояние лимфоузлов. Т. е. подобные характеристики определяют хронологию болезни.

    Особенности прогностических факторов:

    1. Базируются на биологических характеристиках опухолевого образования.
    2. Взаимосвязаны с продолжительностью жизни пациента в независимости от тактики терапии.
    3. Делят пациентов по степени риска смерти, рецидива.
    4. Примеры: индекс митотической активности, протеолитические ферменты, антиогенез и др.

    Индекс митотической активности (MAI) является независимым прогностическим фактором, который характеризует продолжительность жизни больных. У пациентов с индексом меньше 10 в процессе наблюдения летальный исход составлял 6 %, у пациентов с индексом больше 10 — 28 %.

    Протеолитические ферменты имеют значение в процессе метастазирования. В трансформированных злокачественных клетках таких ферментов вырабатывается больше, чем в здоровых, поэтому при злокачественных образованиях наблюдается выход этих веществ в межклеточное пространство и увеличение активности. Т. е. ферменты вовлечены в процесс онкогенеза. Т. о. пациенты с низким уровнем этих ферментов имеют более благоприятный прогноз по безрецидивной выживаемости.

    Способность новообразования расти и метастазировать во многом зависит от ангиогенеза — образования новых кровеносных сосудов. В процессе наблюдения пациентов в течение 10 лет, было выявлено, что у женщин с высоким значением плотности микрососудов в опухоли прогноз хуже.

    Предсказывающие факторы

    Эти факторы предсказывают эффективность лечения. Они помогают выделить группу пациентов с более-менее значимым ответом на проводимую терапию. К примеру, опреелить эффективность гормональных препаратов, уровень рецепторов стероидных гормонов.

    К клиническим факторам, которые помогают интерпретировать ответ на терапию при метастатической форме рака относятся:

    1. Локализация и количественный показатель метастазов. Например, при поражении кости — прогноз относительно благоприятный; поражение кости, 2 органов, легких — менее благоприятный; при поражении больше 2 органов, наличии метастаз в печени, мозгу и пр. — неблагоприятный.
    2. Временной интервал между лечением первичного новообразования и появления метастазов. Чем он продолжительнее, тем благоприятнее прогноз.
    3. Общее состояние здоровья пациента.
    4. Возрастная категория. Женщины в постменопаузе имеют больше шансов на благоприятный ответ на терапию.
    5. Рецепторы стероидных гормонов в опухоли (гормононезависимые новообразования не реагируют на гормональное лечение).

    Метастатический рак молочных желез считается хронической патологией. После полного регресса, полученного в результате химиотерапии, продолжительность жизни 5-10 лет встречается достаточно редко, примерно в 5-20 % случаев. Поэтому для лечения считается оптимальным вариантом — последовательное применение лечебных воздействий с как можно меньшей токсичностью, чтобы получить максимальный паллиативный эффект и отсрочить прогрессирование патологии, смерти.

    Достоверность результатов ИГХ молочной железы достигает 99 %. Методика чувствительна и высокоспецифичная. Она помогает верифицировать патологический процесс и установить стадию заболевания. Для ее проведения необходимо минимум биоптата и реактивов, при этом она будет информативна даже спустя длительное время после взятия биопсии.

    ИГХ при раке молочной железы

    Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование молочной железы дает возможность изучать образцы тканей, которые медики взяли во время биопсии. Информативная и новая методика, позволяющая определить формирование злокачественной опухоли, если у врачей есть подозрения. Многие женщины после 45 лет сталкиваются с раком молочных желез. Благодаря исследованиям медики могут определить тип и характер заболевания.

    Что такое иммуногистохимия?

    Иммуногистохимия

    Раковые клетки производят определенные белки, у которых есть связь с антителами. ИГХ позволяет изучить взаимодействие между ними. Во время исследования используются стандартные антитела. Учитывая определенные изменения при взаимодействии клеток, медики определяют структуру и форму злокачественного новообразования.

    Опухоль для человеческого организма является чужеродной. Во время борьбы с ней в теле пациента вырабатываются антитела. Иммуногистохимия помогает обнаружить раковые клетки, определяет их структуру и строение.

    Для врачей подобное исследование важно тем, что по результатам они подбирают максимально эффективное лечение пациентам. При помощи ИГХ можно определить:

    • развитие опухолей;
    • рецепторы стероидных гормонов;
    • образование злокачественной опухоли, если первичные признаки очага отсутствуют;
    • формирование новообразования без классификации;
    • количество мембранного белка (HER2) в клетках молочной железы.

    Результатами исследования занимается специалист онколог. Важно определить количество гормональных рецепторов в молочных железах. Чем больше показатели, тем опухоль спокойнее и медленнее растет. У пациента высокие шансы, чтобы полностью избавиться от рака на ранней стадии развития.

    Гормональная терапия в таких ситуациях позволяет добиться положительного исхода на 80%.

    Проведение исследования

    Лабораторная диагностика тканей молочной железы

    Иммуногистохимия (ИГХ) при раке молочной железы осуществляется методом забора небольшого количества тканей новообразования. Биопсия проводится в месте, где врачи предполагают формирование злокачественных клеток. Перед процедурой врач отмечает маркером место ее проведения на груди женщины.

    На исследование берутся также отсеченные ткани опухоли, которые были получены после хирургического вмешательства. Дальше диагностика проводится следующим образом:

    1. Полученный материал отправляют в лабораторию.
    2. Ткани помещают в специальную емкость, где находится формалин.
    3. Их обезжиривают.
    4. Добавляют жидкий парафин, чтобы получить блоки и информацию о строении, структуре клеток, тканей.
    5. Срезают слой, толщина которого составляет 1 мм.
    6. Укладывают на специально подготовленное стекло.
    7. Для окрашивания среза используются препараты и антитела ИГХ.
    8. Результаты исследования специалисты получают через 12 дней.

    Для определения рака молочной железы применяются различные маркеры. Если результаты исследования показывают присутствие в тканях большого количества гормонов (прогестерона и эстрогена), опухоль прогрессирует. В большинстве случаев присутствуют уже метастазы. Средняя концентрация гормонов указывает на то, что злокачественное новообразование слабо развивается. У пациента есть шансы пройти эффективное лечение медицинскими препаратами и добиться положительного результата.

    Исход будет благоприятный после применения гормональных средств, если маркер Ki-67 при онкологии груди находится в пределах 15-17%. О стремительном развитии опухоли говорит показатель, достигающий 35%. Врачи в такой ситуации назначают больным только химиотерапевтические препараты, которые смогут приостановить ее прогрессирование. Если показатели превышают 85%, больному невозможно помочь и избежать летального исхода.

    О чем говорят результаты?

    Результаты диагностики тканей

    Иммуногистохимический метод анализа позволяет определить многочисленные факторы, связанные со злокачественным новообразованием. Речь идет:

    • о видах и подвидах раковой опухоли;
    • об источниках метастазирования;
    • о площади поражения, на которую распространились раковые клетки по всему организму больного;
    • об эффективности проводимого лечения пациентам с онкологией.

    Исследования позволяют получить информацию, что касается стадии развития заболевания. Как быстро растет опухоль. Современные специалисты считают, что иммуногистохимический анализ является максимально информативным, если сравнивать его с другими привычными исследованиями при формировании рака молочных желез. Иногда врачам необходима именно гистология. В большинстве случаев проводятся оба анализа. Так специалисты получают больше информации о карциноме.

    В медицине существуют информационные факторы. Они позволяют изучить поведение и реакцию опухоли на лечение.

    Прогностические факторы

    Показывают возможное поведение злокачественного новообразования в момент проведения диагностики. Терапия не влияет на показатели. Специалист получает информацию о том, как быстро прогрессирует рак молочной железы. По результатам он может определить оптимальный метод лечения для каждого пациента индивидуально.

    Предсказывающие факторы

    Изучение позволяет получить информацию о том, как раковые клетки отреагируют на выбранную методику терапии.

    Прогностические и предсказывающие факторы могут быть систематизированы по отдельности. Но результаты исследования покажут схожие данные. При положительном раке молочной железы количество белка HER2 повышенное. Данные указывают на агрессивное протекание злокачественных процессов. В отдаленных органах присутствуют ранние метастазы.

    Негативный результат свидетельствует о небольшом количестве мембранного белка в опухоли. Она не будет реагировать на применение медицинских препаратов во время лечения.

    Расшифровка исследования

    Иммуногистохимия позволяет изучить структуру взятого материала во время биопсии или после оперативного вмешательства. Присутствие определенных антител даст возможность специалистам установить вид злокачественного новообразования.

    Интерпретацией и расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается квалифицированный специалист – онколог. Врач должен подробно рассказать пациенту, на что указывает полученная информация. В результатах прописывается показатель Ki-67. Он показывает насколько агрессивная опухоль.

    Во время исследований врачи изучают гормональный фон пациентки, который тесно связан с поведением злокачественного новообразования. Медики определяют площадь поражения патологическими процессами, скорость формирования метастаз.

    Иммуногистохимический анализ – это такой метод диагностики, позволяющий определить стадию рака молочной железы, форму заболевания, а также степень распространения его. На основании полученных данных специалист назначает максимально подходящее лечение.

    При стабильном гормональном фоне и неактивной опухоли женщине рекомендуют ограничиться приемом гормональных лекарств. Если рак молочной железы ведет себя агрессивно и активно развивается, показатель Ki-67 повышается. В данной ситуации врачи назначают больным более тяжелые химические препараты.

    В здоровом организме клетки самостоятельно восстанавливаются и нормально делятся. Положительный анализ на присутствие мембранного белка (HER2) указывает, что рак прогрессирует. Злокачественная опухоль будет увеличиваться в объеме. Чтобы подавить ее распространение и рост специалисты назначают больным медикаментозную терапию.

    Отрицательные результаты РМЖ с негативным показателем HER2 требуют применения более сильных химиотерапевтических препаратов. Лечение подбирает врач онколог, учитывая индивидуальные особенности пациента и протекание патологических процессов.

    Иммуногистохимия представляет собой серьезный и сложный метод диагностики рака молочной железы. Медики во время исследований применяют многочисленные маркеры. Правильно расшифровать результаты может только квалифицированный доктор. В большинстве случаев при подтверждении развития рака у женщины, собирают целый врачебный консилиум. Мнение разных специалистов позволяет правильно и адекватно подобрать, также расписать тактику лечения злокачественной опухоли.


    Смотрите также